Метионин фото: (Methionine), , , , , , 250 , , , 250

Содержание

Ученые назвали помогающую в профилактике лечения рака диету — Российская газета

Американские ученые провели исследование с целью выяснить, какой тип питания помогает при профилактике лечения онкологических заболеваний. Выяснилось, что употребление овощей и фруктов способствует повышению эффективности химиотерапии и лучевой терапии при лечении онкологии, сообщает издание Nature.

Опыты проводились на мышах, из рациона которых были полностью исключены мясо, рыба и молочные продукты. Целью было исключить из пищи вещество метионин, присутствующее в протеинах. Выяснилось, что ограничение в рационе аминокислоты метионина положительно влияет на эффективность химиотерапии и лучевой терапии при лечении рака через контролируемые и воспроизводимые изменения одноуглеродного метаболизма.

В исследовании подобной схемы питания на людях ограничение метионина приводило к положительным эффектам на системный метаболизм, которые были аналогичны тем, которые были получены на мышах.

Кроме того, путем исключения из рациона вышеуказанных продуктов усиливался эффект препарата 5-фторурацила, который обладает противораковым действием.

Добавим, что несколько дней назад ученые медицинского колледжа Бейлора в США назвали основную причину появления рака. В своем докладе, ставшем результатом многолетнего исследования, они заключили, что основной причиной возникновения онкологических заболеваний у человека является дисфункция гена TP53, который обычно останавливает рост и деление клетки при ее повреждении. Были также обнаружены четыре гена, чья высокая активность в опухолях связана с угрозой развития рака.

Как сообщает издание Корреспондент.net, в середине июня в США началось тестирование на собаках новой вакцины против рака, которая может предотвратить возникновение онкологического заболевания или затормозить его развитие. По мнению профессора Стивена Джонсона, который вместе с коллегами из университета штата Аризона ведет подобные исследования в течение десяти лет, течение онкологического заболевания у собак схоже с тем, как развивается рак у людей. Как отметил ученый, если опыты в течение трех лет пройдут успешно, подобную вакцину можно будет создать и для людей.

Корм сухой для кошек Farmina ND Лоу Грэйн 5 кг курица с гранатом

Chicken&Pomegranate

Курица, спельта, овеси гранат. Полнорационный сухой корм для взрослых кошек.

Ингредиенты:свежее куриное мясо без костей (24%), дегидратированное куриное мясо (24%), спельта (10%), овес (10%), куриный жир, дегидратированные цельные яйца, свежая сельдь, дегидратированная сельдь, рыбий жир (сельди), пульпа сахарной свеклы, волокна гороха, сушеная морковь, сушеная люцерна, инулин, фруктоолигосахариды, дрожжевой экстракт (источник маннанолигосахаридов), сушеный гранат (0,5%), сушеные яблоки, сушеный шпинат, подорожник (0,3%), дегидратированный сладкий апельсин, сушеная черника, хлорид натрия, сухие пивные дрожжи, корень куркумы (0,2%), глюкозамин, хондроитин сульфат.

Пищевые добавки на 1 кг:

Витамин А — 18000 ME; Витамин D3 — 1200 ME; Витамин Е — 600 мг; Витамин С — 300 мг; Ниацин — 150 мг; Пантотеновая кислота — 50 мг; Витамин В2 — 20 мг; Витамин В6 — 8,1 мг; Витамин B1 — 10 мг;Витамин H — 1,5 мг; Фолиевая кислота — 1,5 мг; Витамин B12 — 0,1 мг; Холина хлорид – 2500 мг; Бета-каротин — 1,5 мг;  Хелат цинка аналогичный метионин гидроксилазе — 910 мг; Хелат марганца аналогичный метионин гидроксилазе — 380 мг;  Хелат железа гидрата глицина — 250 мг;  Хелат меди аналогичный метионин гидроксилазе — 88 мг; DL-Метионин — 5000 мг; Таурин — 4000 мг; L-Карнитин — 300 мг. Специальные добавки: экстракт алоэ вера — 1000 мг; экстракта зеленого чая – 100 мг; экстракт розмарина. Антиоксиданты: экстракт токоферолов натурального происхождения.

Питательные вещества: сырой белок — 36,00%; сырой жир и масла — 20,00%; сырая клетчатка — 1,90%; влага – 8,00%; сырая зола — 8,10%; кальций — 1,20%; фосфор — 1,10%; магний — 0,09%; Омега-6 — 3,30%; Омега-3 — 0,90%; докозагексаеновая кислота (DHA) — 0,50%; эйкозапентаеновая кислота (EPA) — 0,30%; глюкозамин – 1200 мг/кг; хондроитин сульфат – 900 мг/кг.

Рекомендации по применению. Рекомендованное суточное количество корма указано в таблице на упаковке. При переводе на N&D рекомендуется постепенно замещать предыдущий корм на новый. Хранить в прохладном, сухом месте, в закрытой упаковке. Произведено за 18 месяцев до окончания срока годности, указанного на упаковке. Производится из ингредиентов преимущественно из Италии, Дании и Франции. Масса нетто, срок годности, код партии и регистрационный номер: см. упаковку.

Всё о компании Adisseo — Агроинвестор

Компания Adisseo France SAS была основана в 1939 году под названием AEC (Alimentation Equilibrée de Commentry). Штаб­квартира — Антони, Франция. Последующие исторические имена компании: Rhone Poulenc AN, Aventis AN. ООО «Адиссео Евразия» — российское подразделение Adisseo, ответственное за развитие бизнеса в регионе CIS.

В 2006 году компания вошла в состав China National Bluestar Corporation Group. К 2016 году в состав материнской корпорации ChemChina вошли такие химические компании как, например, Pirelli и Syngenta. В 2018 году Adisseo присоединила к себе европейского производителя кормовых добавок — Nutriad. 

Направления деятельности. Adisseo производит широкую гамму продуктов под торговыми марками «Родимет»® (метионин, включая DL-форму и гидрокси-метионин), «Микровит»® (витамины, включая защищенные формы для жвачных), «Ровабио»® (ферменты), «Смартамин»® (защищенный метионин для жвачных), «Метасмарт»® (защищенный он-метионин для жвачных), «Селиссео»® (органический селен) и «Альтерион»® (пробиотик), «Адимикс»®, «Апекс»® (улучшение пищеварения), «Ультрацид»»®, Сальмо-Нил»®, «Эвацид»®, «Окси-нил»®, «Европелин»® (консервация и стабилизация), «Густи»®, «Оптисвит»® (улучшение поедаемости корма), «Токси-Нил»®, «Юнике»® (контроль микотоксинов), «Нутри»® (функциональные ингредиенты).

Adisseo впервые разработала коммерческий синтез синтетического метионина для людей в 1945 году и сегодня является одним из мировых лидеров производства как жидкого, так и порошкообразного продукта под торговой маркой «Родимет»®. Первый коммерческий килограмм витамина А — «Микровит® А» был произведен во Франции в 1958 году.

С 1996 года Adisseo производит гамму кормовых ферментов «Ровабио»®. Стратегия компании предполагает запуск на мировой кормовой рынок минимум одного нового продукта каждый год.

Активы компании (подразделение кормовых добавок). 1700 сотрудников, семь производственных площадок (Франция, Испания, Бельгия, Великобритания, КНР). Поставки кормовых добавок в 130 стран мира через пять региональных офисов. Адиссео Евразия располагает складом продукции в Москве и сетью дистрибьюторов. Все производства сертифицированы по ISO, OHSAS и FAMI QS.

Экспериментальный центр по изучению питания животных CERN, биохимическая лаборатория Carat, исследовательский центр по биотехнологиям CINABio (Франция), партнерские исследовательские центры, международная сеть NIRS лабораторий.

Проекты в России. Компания «Адиссео Евразия» с 2015 года активно реализует в России ряд проектов в сфере эффективного выращивания животных, производства продукции, кормопроизводства и биохимической аналитики, главным из которых является проект под названием DIM (Design-Implement-Monitor), суть которого заключается в технологической конверсии метионина-порошка на комбикормовых предприятиях в его жидкий аналог (HMTBA). Под патронажем фирмы и ее партнеров комбикормовые заводы и цеха оснащают специальным оборудованием для впрыска жидкого метионина непосредственно в смеситель. «Адиссео» предоставляет своим ключевым клиентам уникальную возможность определить и подтвердить уровни усваиваемых аминокислот и обменной энергии, содержание общего и фитатного фосфора в кормах и сырье посредством опытов in vivo. Метод PNE, объединяющий использование ближней инфракрасной спектроскопии (NIR) и результаты тестов питательности in vivo, представляет эффективный инструмент контроля качества сырья и кормов для моногастричных животных. PNE позволяет оптимизировать источники сырья и сделать матрицу питательности компонентов корма максимально точной. Таким образом, технологи «Адиссео» способны дать максимально точную оценку наиболее дорогостоящих питательных веществ, используемых в рационах сельскохозяйственных животных. В качестве поддержки отечественных производителей премиксов и комбикормов компания организует во Франции регулярные премиксные практикумы для повышения квалификации технологов комбикормового производства.

Adisseo — член Национального кормового союза (Россия) и FEFANA (Евросоюз).

Основная цель. Основная цель «Адиссео» в странах бывшего CCCР — способствовать развитию премиксного и комбикормового производства на территории России и стран СНГ.

Научно-техническая поддержка партнеров, гибкая инвестиционная и ценовая политика позволили компании вместе с ее партнерами занять лидирующее место на рынке кормовых добавок в странах СНГ.

Одна аминокислота обеспечивает прочность паучьей нити

Ученые из Германии выяснили, что аминокислота метионин обеспечивает пластичность белкового домена (элемент третичной структуры белка), который является составной частью шелка паука. Эта пластичность существенно увеличивает прочность соединения между отдельными доменами, сообщает пресс-служба Вюрцбургского университета. Ученые опубликовали свои выводы в текущем номере журнала

Nature Communications.

Природа использует ограниченный набор из 20 различных аминокислот для создания всех белков, которые играют важную роль почти в каждой задаче живого организма. После синтеза цепочек аминокислот большинство белков складываются в высокоупорядоченные третичные структуры.

Аминокислоты можно условно разделить на две группы в зависимости от свойств их боковых цепей. Так называемые гидрофобные боковые цепи плохо растворяются в воде. Они часто располагаются в ядре белка и стабилизируют его форму. Гидрофильные, или водорастворимые, боковые цепи имеют тенденцию находиться на поверхности белка, где они отвечают за практически неограниченное количество функций. Метионин относится к группе гидрофобных аминокислот.

«На сегодняшний день молекулярные биологи уделяют мало внимания этой аминокислоте. Считается, что в белках боковая цепь метионина имеет небольшое функциональное значение», – отмечает Ханнес Нойвайлер (Hannes Neuweiler), преподаватель на кафедре биотехнологии и биофизики в Вюрцбургском университете и руководитель исследования.

Эта точка зрения теперь может измениться. Известно, что боковая цепь метионина является исключительно гибкой по сравнению с боковыми цепями других 19 аминокислот. Нойвайлер и его команда смогли показать, что пауки используют это свойство, помещая большое количество метионина в ядро​​ своих белков шелка. Здесь аминокислота передает свою гибкость всей структуре белкового домена, что делает ее пластичной.

«Шелк паука – один из самых прочных материалов, встречающихся в природе. Он прочнее, чем высокотехнологичные волокна из кевлара или углерода», – говорит Ханнес Нойвайлер. Уникальное сочетание прочности и эластичности делает его чрезвычайно привлекательным для промышленности. Будь то в авиации, текстильной промышленности или в медицине, потенциальное применение этого материала является многочисленным.

Хотя синтетический шелк пауков уже производится в промышленных масштабах и используется в различных продуктах, он еще не способен имитировать превосходные механические свойства природного шелка. Последние выводы исследователей из Вюрцбурга смогут помочь устранить недостатки.

[Фото: PIXABY.COM / COLLAGE: HANNES NEUWEILER]

Незаменимые аминокислоты. Справка — РИА Новости, 28.02.2011

Валин необходим для метаболизма в мышцах, он активно участвует в процессах восстановления поврежденных тканей. Помимо этого, он может быть использован мышцами в качестве дополнительного источника энергии. Валином богаты зерновая пища, мясо, грибы, молочные продукты, а также арахис.

Лизин необходим для нормального формирования костей и роста детей, способствует усвоению кальция и поддержанию нормального обмена азота у взрослых. Лизин участвует в синтезе антител, гормонов, ферментов, формировании коллагена и восстановлении тканей. Пищевыми источниками лизина являются сыр, яйца, рыба, молоко, картофель, красное мясо, соевые и дрожжевые продукты.

Лейцин защищает мышечные ткани и может являться источником энергии. Его наличие способствует восстановлению костей, кожи, мышечной ткани. Снижает уровень холестерина. К пищевым источникам лейцина относятся бурый рис, бобовые, мясо, орехи.

Изолейцин необходим для синтеза гемоглобина, увеличивает выносливость и способствует восстановлению мышц. К пищевым источникам изолейцина относятся куриное мясо, кешью, яйца, рыба, чечевица, мясо, рожь, миндаль, нут (турецкий горох), печень, соя.

Треонин способствует поддержанию нормального белкового обмена в организме, помогая при этом работе печени. Необходим организму для правильной работы иммунной системы. Содержится в яйцах, молочных продуктах, бобах и орехах.

Метионин способствует нормальному пищеварению, сохранению здоровой печени, участвует в переработке жиров, защищает от воздействия радиации. Метионин содержится в бобовых, яйцах, чесноке, луке, йогурте мясе.

Фенилаланин является нейромедиатором для нервных клеток головного мозга. Эффективно помогает при депрессии, артрите, мигрени, ожирении. Не усваивается организмом, которому не хватает витамина С. Содержится в говядине, курином мясе, рыбе, соевых бобах, яйцах, твороге, молоке, а также является составной частью синтетического сахарозаменителя — аспартама.

Триптофан используется организмом для синтеза в головном мозге серотонина, который в свою очередь является важнейшим нейромедиатором. Необходим при бессоннице, депрессии и для стабилизации настроения. Снижает вредное воздействие никотина. В пище эта аминокислота находится в буром рисе, деревенском сыре, мясе, бананах, йогурте, сушеных финиках, курице, кедровых орехах и арахисе.

Потребность человека в незаменимых аминокислотах составляет от 250 до 1100 миллиграммов в сутки. Существуют биологически активные добавки, содержащие необходимые дозы этих веществ. Особо внимание восполнению их в организме рекомендуется уделять вегетарианцам (поскольку некоторые незаменимые аминокислоты в необходимых количествах содержатся только в продуктах животного происхождения), беременным женщинам и спортсменам.

Материал подготовлен на основе информации открытых источников

Смотрите полный выпуск программы «Сытые и стройные» с Маргаритой Королевой: «Пища для мозга, или Что надо есть, чтобы ничего не забывать» >>

Гепатовет, суспензия для кошек и собак

Гепатовет, суспензия для кошек и собак

Подробности
Просмотров: 2158

 

Инструкция
по применению препарата Гепатовет

собакам и кошкам при заболеваниях печени различной этиологии

I. Общие сведения

Торговое наименование лекарственного препарата: Гепатовет (Hepatovet). Международное не патентованное наименование: лецитин + метионин + орнитин + расторопша + бессмертник.

Лекарственная форма: суспензия для орального применения.

Препарат в качестве действующих веществ в 1 мл содержит:

  • эссенциальные фосфолипиды – 60 мг;
  • метионин – 100 мг, L-орнитин – 50 мг;
  • расторопши пятнистой экстракт – 15 мг;
  • травы бессмертника – 15 мг

а также вспомогательные компоненты:

  • сорбат калия – 1,5 мг;
  • бензоат натрия – 1,5 мг;
  • натрия карбоксиметилцеллюзоза – 1,5 мг;
  • твин-80 – 6 мг;
  • вода дистиллированная – до 1 мл

Срок годности лекарственного препарата в закрытой упаковке при соблюдении условий хранения – 2 года со дня изготовления, после вскрытия флакона – не более 21 суток.

Запрещается применение Гепатовета по истечении срока годности.

Хранят препарат в закрытой упаковке производителя, в сухом защищенном от света месте, отдельно от пищевых продуктов и кормов, при температуре от 2 до 25 градусов Цельсия.

Гепатовет следует хранить в местах, недоступных для детей.

Специальных мер предосторожности при уничтожении неиспользованного лекарственного средства не требуется.

II. Фармакологические свойства

Гепатоветгепатотропный лекарственный препарат, в состав которого входят эссенциальные фосфолипиды, флавоноиды, аминокислоты – метионин и орнитин. Комплекс биологически активных веществ в препарате улучшает функциональное состояние печени и её дезинтоксикационную функцию, способствует сохранению и восстановлению структуры гепатоцитов; нормализует уровень аммиака в организме животных, ускоряет регенерацию клеток печени.

Гепатовет по степени воздействия на организм относится к малоопасным веществам (4 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76), в терапевтических дозах не оказывает эмбриотоксического, тератогенного, канцерогенного и сенсибилизирующего действия.

III. Порядок применения

Гепатовет назначают собакам и кошкам самостоятельно или в составе комплексной терапии при острых и хронических заболеваниях печени различной этиологии, для нормализации функции и регенерации печени после эндо- и экзотоксикозов, соматических и ин­фекционных заболеваний, а также для снижения отрицательного влияния лекарственных средств, обладающих гепатотоксичностью.

Противопоказанием к применению Гепатовета является повышенная индивидуальная чувствительность животного к компонентам лекарственного препарата, печеночная энцефалопатия и эпилепсия.

Препарат применяют собакам и кошкам перорально, индивидуально с небольшим количеством корма или вводят принудительно с помощью шприца-дозатора 2-3 раза в день в течение 3-5 недель, в дозах, указанных в таблице:

 

Гепатовет для собак

Масса тела животного Разовая доза суспензии для собак, мл
Суточная доза суспензии для собак, мл
до 10 кг 1 2-3
11-20 кг 2 4-6
21-30 кг 3 6-9
31-40 кг 4 8-12
от 41 и более кг 5 10-15

 

Гепатовет для кошек

Масса тела животного Разовая доза суспензии для кошек, мл
Суточная доза суспензии для кошек, мл
до 3 кг 1 2-3
3-6 кг 2 4-6
от 7 и более кг 3 6-9

 

Перед применением суспензию во флаконе следует тщательно взболтать в течение 1-2 минут.

При необходимости курс лечения повторяют через 2-3 недели.

Передозировка.

Симптомы передозировки у животных не выявлены.

При применении Гепатовета в соответствии с настоящей инструкцией побочных явлений и осложнений у животных, как правило, не наблюдается. У отдельных животных через 10-15 минут после применения лекарственного препарата отмечается гиперсаливация, которая самопроизвольно прекращается и не требует применения лекарственных средств.

В случае появления аллергических реакций использование препарата прекращают и назначают животному антигистаминные и симптоматические средства.

При пропуске приема одной или нескольких доз лекарственного препарата его применение возобновляют в тех же дозировках и по той же схеме.

Гепатовет совместим с кормами, лекарственными средствами и кормовыми добавками.

IV. Меры личной профилактики

При проведении лечебно-профилактических мероприятий с использованием Гепатовета следует соблюдать общие правила личной гигиены и техники безопасности, предусмотренные при работе с лекарственными средствами.

Пустую тару из-под лекарственного препарата запрещается использовать для бытовых целей, она подлежит утилизации с бытовыми отходами.

Купить Гепатовет, суспензия для собак и кошек, можно в ветеринарной клинике Котофей, г. Днепр. Цена должна быть уточнена.

 

Лимитирующие аминокислоты в кормлении животных

Протеиновое питание невозможно представить без рассмотрения роли отдельных аминокислот. Даже при общем положительном протеиновом балансе организм животного может испытывать недостаток протеина. Это связано с тем, что усвоение отдельных аминокислот взаимосвязано друг с другом, недостаток или избыток одной аминокислоты может приводить к недостатку другой. Часть аминокислот не синтезируется в организме человека и животных. Они получили название незаменимых.

В рационах для птицы главными лимитирующими аминокислотами являются метионин и цистин, в рационах для свиней – лизин. Организм должен получать достаточное количество главной лимитирующей кислоты с кормом для того, чтобы и другие аминокислоты могли эффективно использоваться для синтеза белка.

Метионин способствует отложению жира в мышцах, необходим для образования новых органических соединений холина (витамина В4), креатина, адреналина, ниацина (витамина В5) и др. Дефицит метионина в рационах приводит к снижению уровня плазменных белков (альбуминов), вызывает анемию (снижается уровень гемоглобина крови), при одновременном недостатке витамина Е и селена способствует развитию мышечной дистрофии. Недостаточное количество метионина в рационе вызывает отставание в росте молодняка, потерю аппетита, снижение продуктивности, увеличение затрат корма, жировое перерождение печени, нарушение функций почек, анемию и истощение. При большом избытке метионина наблюдается дисбаланс (нарушается равновесие аминокислот, в основе которого лежат резкие отклонения от оптимального соотношения незаменимых аминокислот в рационе), который сопровождается нарушением обмена веществ и торможением скорости роста у молодняка.

Цистин — серосодержащая аминокислота, взаимозаменяемая с метионином, участвует в окислительно-восстановительных процессах, обмене белков, углеводов и желчных кислот, способствует образованию веществ, обезвреживающих яды кишечника, активизирует инсулин, вместе с триптофаном цистин участвует в синтезе в печени желчных кислот, необходимых для всасывания продуктов переваривания жиров из кишечника, используется для синтеза глютатиона. Цистин обладает способностью поглощать ультрафиолетовые лучи. При недостатке цистина отмечается цирроз печени, задержка оперяемости и роста пера у молодняка, ломкость и выпадение (выщипывание) перьев у взрослой птицы, снижение сопротивляемости к инфекционным заболеваниям.

Метионин и цистин серосодержащие аминокислоты. При этом метионин может трансформироваться в цистин, поэтому эти аминокислоты нормируются вместе, а при недостатке в рацион вводятся метиониновые добавки.
Лизин входит в состав практически всех белков животного, растительного и микробного происхождения, однако протеины злаковых культур бедны лизином. Лизин регулирует воспроизводительную функцию, при его недостатке нарушается образование спермиев и яйцеклеток необходим для роста молодняка, образования тканевых белков. Лизин принимает участие в синтезе нуклеопротеидов, хромопротеидов (гемоглобин), тем самым регулирует пигментацию шерсти животных. Регулирует количество продуктов распада белка в тканях и органах. Способствует всасыванию кальция. Участвует в функциональной деятельности нервной и эндокринной систем, регулирует обмен белков и углеводов, однако реагируя с углеводами, лизин переходит в недоступную для усвоения форму, является исходным веществом при образовании карнитина, играющего важную роль в жировом обмене.

Специалисты ФГБУ «Кемеровская МВЛ» (Уникальный номер записи в Реестре аккредитованных лиц RA.RU.21ПМ52) проводят исследования по определению массовой доли лизина, метионина и цистина методом капиллярного электрофореза. По вопросам определения содержания аминокислот в кормах для животных вы всегда можете обратиться в наш испытательный центр, а также получить консультации по интересующим вас вопросам.

По информации ФГБУ «Кемеровская МВЛ»

Подпишитесь на нас в ЯНДЕКС.НОВОСТИ и в Telegram , чтобы читать новости сразу, как только они появляются на сайте.

Фото-лейцин и фото-метионин позволяют идентифицировать белок-белковые взаимодействия в живых клетках

Синтез и биосинтетическое включение в белки

Мы синтезировали три новых аминокислоты (рис. 1a и дополнительное примечание онлайн), которые напоминают изолейцин, лейцин и метионин по структуре, но содержат фотоактивируемое диазириновое кольцо, которое дает реактивный карбен после индуцированной светом потери азота. Все три аминокислоты были синтезированы α-бромированием 16 соответствующих азикарбоновых кислот с последующим аминолизом азибромкарбоновых кислот.Хотя фото-Leu и фото-Met были получены в количествах, составляющих несколько граммов, фото-Ile было получено из того же количества исходного материала в 20 раз меньше. В случае фото-Met синтез Strecker 17 , исходя из 4,4′-азипентаналя, также давал желаемый продукт, но аналогичные попытки синтезировать фото-Leu и фото-Ile оказались безуспешными. Ферментативное разрешение энантиомеров давало чистый L-фото-Leu, L-фото-Met и D-фото-Met (рис. 1b). Мы не делали попыток разделить энантиомеры и диастереомеры фото-Иле.DL-фото-Met, меченный 14 C, был получен синтезом Штрекера с использованием [ 14 C] NaCN (фиг. 1b).

Рисунок 1: Новые фотореактивные аминокислоты включены в белки.

( a ) Структуры трех новых аминокислот, фото-Ile, фото-Leu и фото-Met (слева), показаны рядом со структурами природных аминокислот изолейцина, лейцина и метионина (справа). ( b ) Смеси DL или чистые энантиомеры (как указано) разделяли с помощью тонкослойной хроматографии на хиральной пластине.Начало и фронт растворителя находятся внизу и вверху изображения соответственно. Аминокислоты определяли окрашиванием нингидрином (дорожки 1-7) или авторадиографией (дорожка 8). ( c ) Клетки COS7 выращивали в отсутствие (дорожки 2 и 4) или в присутствии (дорожки 1 и 3) [1- 14 C] фото-Met. Белки разделяли с помощью SDS-PAGE, а затем детектировали окрашиванием кумасси синим (дорожки 1 и 2) и флюорографией (дорожки 3 и 4). ( d ) Осажденные белки переваривали проназой.Добавляли избыток немеченого глутамина и фото-Met, и образцы нагревали с 7 н. HCl. Аминокислоты разделяли хроматографией на Dowex 50WX8. Фракции колонки анализировали на присутствие радиоактивности, фото-Met (обнаруживаемого по поглощению при 350 нм) и аминогрупп (обнаруживаемого с помощью анализа флуоресцимина). Значения корректируются для фона и нормализуются до наиболее интенсивного пика. Общее восстановление радиоактивности в элюате колонки составило 85%.

Чтобы продемонстрировать биосинтетическое включение фото-Met в белки, мы культивировали фибробластоподобные клетки COS7 млекопитающих в присутствии [1- 14 C] фото-Met.Чтобы уменьшить конкуренцию за активацию тРНК синтетаз, мы использовали культуральную среду, лишенную структурно родственных аминокислот лейцина и метионина (LM-2) или лишенную лейцина, метионина, изолейцина и валина (LM-4). Белки включали радиоактивную аминокислоту, так как мы смогли обнаружить радиоактивность, связанную с белками, с помощью авторадиографии после разделения с помощью SDS-PAGE (рис. 1c, дорожка 3). Чтобы доказать, что обнаруженная радиоактивность представляет собой интактный [1- 14 C] фото-Met, мы подвергли меченые белки полному гидролизу и разделению аминокислот на ионообменной колонке 18 .Из радиоактивности меченых белков 88% было интактным [1- 14 C] фото-Met (рис. 1d, фото-Met). Небольшой пик (7%) элюирования немного раньше, чем глутаминовая кислота (рис. 1d, Glu), также наблюдался, если свободный [1- 14 C] фото-Met просто нагревали в используемых условиях гидролиза (данные не показаны), и поэтому мы пришли к выводу, что он представляет собой продукт термического разложения. Радиоактивность, возникающая в результате разложения с последующей реинтеграцией, проявляется в виде аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты, но этот путь не включает радиоактивность.Мы пришли к выводу, что по крайней мере 95% инкорпорированной радиоактивности представляет собой неповрежденный [1- 14 C] фото-Met. Мы получили количественные данные о частоте включения фото-Met во вновь синтезированные белки путем мечения с [1- 14 C] фото-Met и [ 3 H] фенилаланином. Сравнение количества включенных изотопов (таблица 1) показало, что частота включения [1- 14 C] фото-Met составляла 14% от частоты включения [ 3 H] Phe, что соответствует 0.7% от общего количества аминокислот.

Таблица 1 Определение частоты включения фото-Met во вновь синтезированные белки

Фото-аминокислоты функциональны и нетоксичны

Неестественные аминокислоты часто токсичны для клеток. Таким образом, мы контролировали биосинтез белка путем включения [ 3 H] Phe и определяли жизнеспособность клеток, выращенных в присутствии или в отсутствие фото-аминокислот, путем исключения трипанового синего (дополнительная таблица 1 онлайн). Из-за нехватки двух незаменимых аминокислот биосинтез белка был снижен примерно до 65% от биосинтеза в полной питательной среде.Добавление фото-Leu или фото-Ile не имело существенного эффекта, тогда как добавление фото-Met увеличивало биосинтез белка. Хотя клетки росли немного медленнее, чем в полной питательной среде, их жизнеспособность (дополнительная таблица 1) и морфология (данные не показаны) не пострадали. Кроме того, фотоактивация УФ-светом в течение 3 минут, достаточная для активации более 99% активируемых групп, не влияла на жизнеспособность клеток (дополнительная таблица 2 онлайн). Мы также проверили, являются ли белки, продуцируемые в клетках, выращенных с фото-аминокислотами, функциональными или нет.С этой целью мы трансфицировали клетки векторами, кодирующими слитые конструкции GFP из GTPase Rab5 и конститутивно активированных (GFP-Rab5QL) или доминантно-отрицательных (GFP-Rab5SN) мутантов 19 , переключили клетки на среду, содержащую фото-аминокислоты, и контролировали флуоресценцию GFP с помощью конфокальной микроскопии (дополнительный рис. 1 онлайн). GFP-Rab5 локализован в эндосомах, GFP-Rab5QL — в увеличенных эндосомах и GFP-Rab5SN — в цитозоле, все согласуется с предыдущими сообщениями 19 . Ни на интенсивность флуоресценции, ни на локализацию не влияло присутствие какой-либо из фотоаминокислот.При частоте замены фото-Met на Met 35% (см. Ниже) более 80% слитых белков будут иметь фото-Met как в Rab5-, так и в GFP-части слияния, и более 99% хотя бы в одной из двух частей. Мы пришли к выводу, что фото-аминокислоты не нарушают функцию Rab5 или GFP.

Чтобы подтвердить эти результаты с помощью количественного анализа, мы измерили активность β-галактозидазы, которая была выражена в отсутствие или в присутствии фото-аминокислот в среде (дополнительная таблица 3 онлайн).Добавление любой из трех фото-аминокислот или смеси фото-Met и фото-Leu не влияло на активность фермента. Escherichia coli β-галактозидаза содержит 23 метионина, из которых в среднем 8 заменяются фото-Met; ожидается, что менее 0,01% белка не будет замещено фото-Met. Мы пришли к выводу, что фото-аминокислоты нетоксичны для культивируемых клеток млекопитающих и могут, по крайней мере частично, функционально замещать аминокислоты с разветвленной цепью и метионин.

Специфическое фото-перекрестное связывание с помощью стратегии «кормления и вспышки»

Для изучения фото-перекрестного связывания, индуцированного фото-аминокислотами, мы трансфицировали клетки COS7 плазмидой, содержащей ген, кодирующий кавеолин-1 (см. 20), кормили клетки тремя фото-аминокислотами и искали образование ковалентных димеров кавеолина-1 при УФ-облучении (рис. 2а). Контроли показали, что перекрестное сшивание не происходит в отсутствие фото-аминокислот (рис. 2а, дорожка 1), и мы не обнаружили какого-либо сшивания в необлученных образцах в присутствии фото-аминокислот (рис.2а, полосы 2–4). Иногда слабое поперечное сшивание индуцировалось облучением в отсутствие фото-аминокислот (см. Пример на рис. 3b, дорожка 1), что согласуется с предыдущими сообщениями о прямом УФ-сшивании 21 . В образцах, облученных в присутствии фото-аминокислот (рис. 2а, дорожки 5-7), мы наблюдали, что значительные количества сшитого димера образовывались с фото-Leu и фото-Met, но не с фото-Ile.

Рисунок 2: Фото-перекрестное сшивание, индуцированное фото-аминокислотами.

( a c ) клетки COS7 ( a , b ) или клетки HeLa ( c ) выращивали в LM-4 ( a ) или LM-2 ( b , c ) в отсутствие или в присутствии L-фото-Leu (pL), L-фото-Met (pM) или DL-photo-Ile (pI) или их смесей (pLM или pLMI), а затем облучали УФ-излучением. (+) или необлученный (-). Сшитые продукты, образующиеся после УФ-облучения, были обнаружены с помощью SDS-PAGE и вестерн-блоттинга с использованием анти-кавеолина 1 ( a ) для обнаружения сверхэкспрессированного кавеолина 1, антистоматина ( b ) для обнаружения эндогенного стоматина или анти-EEA1 ( c ) для обнаружения эндогенного EEA1.Для сравнения эффективности поперечного сшивания показано сшивание с двумя различными концентрациями DSS ( b , дорожки 8 и 9). Фото-сшивание эндогенного EEA1 с помощью фото-Leu и фото-Met по сравнению с химическим сшиванием с использованием DSS или параформальдегида (PFA), как указано ( c ).

Рисунок 3: Специфичность включения и сшивания с помощью фото-Met и фото-Leu.

( a , b ) Клетки COS7, трансфицированные HA-меченным человеческим PGRMC1, выращивали в LM-4 в отсутствие или в присутствии фото-Leu ( a ) или фото-Met ( b ) плюс указанная конкурирующая аминокислота.Поперечные сшивки, образовавшиеся после УФ-облучения, выявляли вестерн-блоттингом с использованием антител к эпитопу НА. ( c ) Клетки COS7 выращивали в присутствии [1- 14 C] фото-Met, постоянного следового количества [ 3 H] Phe и конкурирующих немеченых аминокислот, как указано. Белок осаждали, и радиоактивность связанного с белком определяли сцинтилляционным счетом. График показывает количество включенного [1- 14 C] фото-Met, нормированное на синтез белка, как определено по включению [ 3 H] Phe.Контрольное значение, полученное в отсутствие конкурирующей аминокислоты (Con), установлено на 100. Данные являются средними ± стандартное отклонение. трех определений.

Поперечное сшивание с фото-аминокислотами не ограничивалось трансфецированными белками. Эндогенные белки стоматин 22 (фиг. 2b) и EEA1 (ссылка 23; фиг. 2c) также были сшиты с эффективностью, сравнимой с эффективностью, полученной с химическими сшивающими агентами дисукцинимидил субератом (DSS) или параформальдегидом. В частности, для большого белка EEA1 сшивание фото-аминокислотами превосходит химическое сшивание, поскольку оно позволяет разрешить дискретные сшитые полосы (рис.2c, дорожки 1-3), тогда как химическое сшивание приводило к образованию высокомолекулярных агрегатов, которые не были разделены с помощью SDS-PAGE (рис. 2c, дорожки 5,6).

Структура трех фото-аминокислот предполагает, что фото-Ile, фото-Leu и фото-Met могут заменять изолейцин, лейцин и метионин соответственно. Если это так, добавление комплементарной аминокислоты должно сильно снизить включение и ингибировать фото-перекрестное сшивание. Мы трансфицировали клетки плазмидой, кодирующей мембранный белок PGRMC1 (ref.24) и оценили, конкурируют ли метионин, валин, лейцин или изолейцин за сшивание с помощью фото-Leu и фото-Met. Мы наблюдали конкуренцию за сшивание фото-Leu (рис. 3a, дорожки 3–7) в основном с лейцином и конкуренцию за сшивание с помощью фото-Met (рис. 3b, дорожки 3–7) в основном с метионином и в меньшей степени от лейцина. Валин и изолейцин не конкурировали с фото-Met, а скорее усиливали сшивание. Метионин и лейцин также сильно конкурировали с [1- 14 C] фото-Met за включение в белки, тогда как присутствие валина и изолейцина слегка стимулировало включение фото-аминокислоты (рис.3в). Примечательно, что все четыре из этих аминокислот транспортируются в клетки с помощью транспортной системы L-типа 25 , которая предположительно также транспортирует три фото-аминокислоты. Сильная разница в конкуренции с метионином и лейцином по сравнению с валином и изолейцином исключает возможность конкуренции на уровне поглощения.

Сшивка с фото-аминокислотами должна быть очень специфичной из-за короткого периода полужизни карбена в активированном состоянии и отсутствия какой-либо спейсерной молекулы.Чтобы продемонстрировать эту специфичность, мы проанализировали перекрестное сшивание субъединиц 19S протеасомной регуляторной частицы, комплекса из 17 белковых субъединиц. В отличие от ядерной частицы 20S протеасомы, структурные данные с высоким разрешением для комплекса 19S недоступны. Взаимодействия отдельных субъединиц были картированы с помощью дрожжевого двугибридного анализа и нескольких других подходов in vitro , что привело к предварительной карте взаимодействий 26,27 . Мы проанализировали цитозоль фото-перекрестно-сшитых клеток HeLa с антителами к двум из субъединиц 19S, Rpt4 (S10b) и Rpt1 (S7) (рис.4). После перекрестного связывания Rpt4 был обнаружен в трех различных поперечно-сшитых полосах с молекулярной массой 120, 140 и 145 кДа (фиг. 4, дорожка 3), что согласуется с сообщенными взаимодействиями с тремя другими субъединицами протеасомы 26 . Напротив, Rpt1 не был обнаружен в какой-либо заметной поперечно-сшитой полосе (фиг. 4, дорожка 4). Полоса 115 кДа, уже обнаруженная перед облучением (фиг. 4, дорожка 2), отражает перекрестную реактивность антитела. Только слабая полоса при 155 кДа появлялась при гораздо более длительном времени воздействия на блот (данные не показаны).Несмотря на высокую гомологию двух белков (44% идентичности, 62% сходства), общих партнеров по взаимодействию обнаружено не было, что свидетельствует о высокой специфичности процедуры. Ни одна из поперечно сшитых полос, которые имели Rpt4, не содержала Rpt1, что согласуется с отсутствием взаимодействия между этими двумя субъединицами, о котором сообщалось в предыдущих исследованиях 26,27 .

Рисунок 4: Фотоперекрестное связывание показывает специфические взаимодействия протеасомных субъединиц in vivo .

Клетки HeLa выращивали в LM-2 в присутствии фото-Leu и фото-Met, а затем облучали УФ (+) или не подвергали облучению (-).Цитозольные фракции подвергали SDS-PAGE и вестерн-блоттингу против hRpt1 или hRpt4. Rpt4 дает три дискретных сшитых полосы, ни одна из которых не содержит Rpt1. Очень долгая выдержка показывает, что поперечно-сшитая полоса Rpt1 мигрирует медленнее, чем три поперечно-сшитой полосы, образованные Rpt4 (данные не показаны).

PGRMC1 взаимодействует с Insig-1 и SCAP

Мы использовали новую технологию для изучения белок-белковых взаимодействий в комплексе мембранных белков, участвующих в регуляции клеточного гомеостаза липидов.По крайней мере, три мембранных белка, SCAP, Insig-1 и SREBP 28,29,30 , являются частью этой сборки, и недавние данные указывают на существование дополнительных неидентифицированных компонентов 31 . Комплекс расположен в эндоплазматическом ретикулуме, в котором он реагирует на низкий уровень холестерина. PGRMC1, прогестерон-связывающий мембранный белок эндоплазматического ретикулума 24,32 , может быть другим белком, участвующим в этом процессе. В частности, мы подозревали, что он может напрямую взаимодействовать с Insig-1.Чтобы проверить это, мы соэкспрессировали PGRMC1 (PGRMC1-HA) с меткой гемагглютинина (HA) и Insig-1 с меткой Myc (Insig-1 – Myc) в клетках COS7, затем культивировали клетки с фото-Met или без фото-Met и фото-кросс. -связал их. Чтобы обнаружить сшитые белки, мы иммунопреципитировали экстракты, обработанные детергентом, антителом к ​​HA и проанализировали преципитаты на присутствие Insig-1 с помощью вестерн-блоттинга с антителом к ​​Myc. Когда клетки выращивали в отсутствие фото-Met, было обнаружено только небольшое количество коиммунопреципитированного Insig-1, но не было сшитой полосы (рис.5а, дорожка 2). В клетках, выращенных с фото-Met, сильная полоса появлялась при ожидаемой молекулярной массе сшитого комплекса Insig-1 – PGRMC1 (рис. 5a, дорожка 1). Мы обнаружили идентичную полосу, используя обратный порядок обнаружения, то есть иммунопреципитацию анти-Myc с последующим блоттингом антителом к ​​метке НА (фиг. 5а, дорожка 3). Эти результаты демонстрируют прямое взаимодействие между двумя белками в живых клетках. Таким же способом мы обнаружили прямое взаимодействие между SCAP и PGRMC1 (рис.5b, дорожка 3), но отсутствует взаимодействие между Insig-1 и неродственным сверхэкспрессированным белком с локализацией в эндоплазматическом ретикулуме (рис. 5b, дорожки 5 и 6), что подтверждает специфичность процедуры фото-перекрестного связывания.

Фигура 5: Прямое взаимодействие in vivo между Insig-1 и PGRMC1.

( a ) Клетки COS7 трансфицировали HA-меченным PGRMC1 и Myc-tagged Insig-1 и выращивали в LM-4 в присутствии или в отсутствие фото-Met. Клетки подвергали УФ-облучению или нет, как указано, лизировали и подвергали иммунопреципитации (IP) анти-HA или анти-Myc, как указано.Иммунопреципитированные белки подвергали SDS-PAGE и вестерн-блоттингу (WB) для обнаружения перекрестных связей с анти-Myc или анти-HA, как указано. Небольшая разница в кажущейся молекулярной массе поперечной сшивки обусловлена ​​разным процентным содержанием гелей, используемых для SDS-PAGE. Присутствие несшитого Insig-1 в левых дорожках указывает на нековалентную коиммунопреципитацию. Сильная полоса на дорожках 3 и 4 (IgG-HC) представляет собой перекрестно реагирующую тяжелую цепь IgG. ( b ) Клетки COS7 трансфицировали векторами, кодирующими меченые белки, как указано, перекрестно связывали и подвергали иммунопреципитации с последующим SDS-PAGE и вестерн-блоттингом, как указано выше.Обратите внимание, что SCAP образует высокомолекулярную перекрестную связь, вероятно, димер, и Insig-1 перекрестно связывается с PGRMC1, тогда как Insig-1 не перекрестно связывается с TRP-1-ER, который также локализован в эндоплазматическая сеть.

Необычный бидентатный комплекс метионина рутения (II): фотораспаковка и антимикробная активность

  • 1.

    Boucher HW, Talbot GH, Bradley JS, Edwards JE, Gilbert D, Rice LB, Scheld M, Spellberg B, Bartlett J ( 2009) Плохие ошибки, никаких лекарств: нет ЭСКАПЕ! Новости Общества инфекционных болезней Америки.Clin Infect Dis 48: 1–12

    PubMed Статья Google ученый

  • 2.

    Роджерс К.Л., Фей П.Д., Рупп М.Э. (2009) Коагулазонегативные стафилококковые инфекции. Infect Dis Clin N Am 23: 73–98

    Статья Google ученый

  • 3.

    Мустафа А.Н., Ндахи Н.П., Пол ББ, Фугу МБ (2014) Синтез, характеристика и антимикробные исследования комплексов металлов (II) ципрофлоксацина.J Chem Pharm Res 6 (4): 588–593

    CAS Google ученый

  • 4.

    Уивароши В. (2013) Металлокомплексы хинолоновых антибиотиков и их применение: обновленная информация. Молекулы 18: 11153–11197

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 5.

    Abbadi BL, Rodrigues-Junior VDS, Dadda ADS, Pissinate K, Villela AD, Campos MM, Lopes LGF, Bizarro CV, Machado P, Sousa EHS, Basso LA (2018) Является ли IQG-607 потенциальным металлодромом или металлопропрепарат с определенной молекулярной мишенью при микобактериях туберкулеза? Фронтальный микробиол 880: 1–9

    Google ученый

  • 6.

    Sousa EHS, Ridnour LA, Gouveia FS Jr, Silva CDS, Wink DA, Lopes LGF, Sadler PJ (2016) Активированное тиолом высвобождение HNO из рутениевого комплекса антиангиогенеза и ингибирование HIF-1α для лечения рака. ACS Chem Biol 11 (7): 2057–2065

    Статья CAS Google ученый

  • 7.

    Огунниран К.О., Аджанаку К.О., Джеймс О.О., Адекоя Дж.А., Нвиньи О.К. (2008) Синтез, характеристика, антимикробная активность и токсикологическое исследование некоторых металлических комплексов смешанных антибиотиков.Afr J Pure Appl Chem 2 (7): 69–74

    Google ученый

  • 8.

    Li F, Collins JG, Keene FR (2015) Комплексы рутения как противомикробные средства. Chem Soc Rev 44: 2529–2542

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 9.

    Yang Y, Liao G, Fu C (2018) Последние достижения в области октаэдрических комплексов полипиридилрутения (II) в качестве антимикробных агентов. Полимеры 10: 650–662

    PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 10.

    Sousa AP, Ellena J, Gondim ACS, Lopes LGF, Sousa EHS, Vasconcelos MA, Teixeira EH, Ford PC, Holanda AKM (2018) Фотохимические исследования cis — [Ru (bpy) 2 (4-bzpy) (CO)] (PF 6 ) 2 и цис — [Ru (bpy) 2 (4-bzpy) (Cl)] (PF 6 ): связывание азотистых оснований, индуцированное синим светом. Многогранник 144: 88–94

    Артикул. CAS Google ученый

  • 11.

    Gong G, Xu J, Huang X, Du W. (2019) Влияние комплекса метионин-рутений на образование фибрилл амилоидного полипептида островков человека.J Biol Inorg Chem 24 (2): 179–189

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 12.

    Ma B, Qian H, Feng Y, Huang W (2016) Структуры и фотофизические свойства семейства комплексов на основе [Ru (dcmb) 2 ] 2+ , содержащих пиридиловый и аминокислотный вспомогательные лиганды . Многогранник 104: 37–45

    CAS Статья Google ученый

  • 13.

    Ануфриева Н.В., Морозова Е.А., Куликова В.В., Бажулина Н.П., Манухов И.В., Дегтев Д.И., Гнучих Е.Ю., Родионов А.Н., Завильгельский Г.Б., Демидкина Т.В. пролекарства против грамположительных и грамотрицательных бактерий.Acta Naturae 7 (4): 128–135

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 14.

    Beck W (2009) Металлокомплексы биологически важных лигандов, CLXXII [1]. Ионы металлов и комплексы металлов как защитные группы аминокислот и пептидов — реакции с согласованными аминокислотами. Z Naturforsch 64 (2): 1221–1245

    CAS Статья Google ученый

  • 15.

    Bente EA, Stephan SI (1993) Твердофазный синтез защищенных пептидов с использованием новых линкеров кобальта (III) аммина. Int J Pept Protein Res 42: 138–154

    Google ученый

  • 16.

    So WH, Wong CTT, Xia J (2018) Фотоклетка пептидов: краткое описание химии и биологических применений. Chin Chem Lett 29: 1058–1062

    CAS Статья Google ученый

  • 17.

    Лиобет А.И., Альварес М., Альберисио Ф. (2009) Аминокислотные защитные группы. Chem Rev 109: 2455–2504

    Артикул CAS Google ученый

  • 18.

    Салливан Б.П., Салмон Д.Д., Мейер Т.Дж. (1978) Смешанные фосфин-2,2’-бипиридиновые комплексы рутения. Inorg Chem 17: 3334–3341

    CAS Статья Google ученый

  • 19.

    Sauaia MG, Tfouni E, Santos RHA, Gambardella MTP, Del Lama MPFM, Guimarães LF, Silva RS (2003) Использование ВЭЖХ для идентификации цис и транс -диаквабис (2,2 ‘-Бипиридин) комплексы рутения (II): кристаллическая структура цис — [Ru (H 2 O) 2 (bpy) 2 ] (PF 6 ) 2 .Inorg Chem Comm 6: 864–868

    Статья CAS Google ученый

  • 20.

    APEX3 (2012) Версия 2016.1-0; Bruker AXS Inc: Мэдисон, Висконсин,

    ,
  • ,
  • , 21.

    , Шелдрик, GM (2008), SADABS, версия 2008/1; Bruker AXS Inc

  • 22.

    Sheldrick GM (2015) SHELXT — интегрированное определение пространственной группы и кристаллической структуры. Acta Cryst A71: 3–8

    Google ученый

  • 23.

    Sheldrick GM (2015) Уточнение кристаллической структуры с помощью SHELXL. Acta Crystallogr Sect C-Struct Chem 71: 3–8

    Статья CAS Google ученый

  • 24.

    Sheldrick GM (2008) Краткая история SHELX. Acta Cryst A64: 112–122

    Артикул CAS Google ученый

  • 25.

    Доломанов О.В., Бурхис Л.Дж., Гилдеа Р.Дж., Ховард Дж.А.К., Пушманн Х. (2009) OLEX2: полное структурное решение, программа уточнения и анализа.J Appl Cryst 42: 339–341

    CAS Статья Google ученый

  • 26.

    Macrae CF, Edgington PR, McCabe P, Pidcock E, Shields GP, Taylor R, Towler M, van de Streek J (2006) Меркурий: визуализация и анализ кристаллических структур. J Appl Cryst 39: 453–457

    CAS Статья Google ученый

  • 27.

    Farrugia L (1997) ORTEP-3 для Windows — версия ORTEP-III с графическим интерфейсом пользователя (GUI).J Appl Cryst 30: 565

    CAS Статья Google ученый

  • 28.

    Кросби Г.А., Демас Дж. Н. (1971) Измерение квантовых выходов фотолюминесценции. Ред. J Phys Chem 75: 991–1024

    CAS Статья Google ученый

  • 29.

    Калверт Дж. Г., Питтс Дж. Н. (1967) Фотохимия. Уайли, Нью-Йорк

    Google ученый

  • 30.

    Abreu AC, Coqueiro A, Sultan AR, Lemmens N, Kim HK, Verpoorte R, Wamel WJB, Simões M, Choi YH (2017) В поисках новой концепции противомикробного лечения: изофлавоноиды из Cytisus striatus в качестве адъювантов антибиотиков против MRSA. Научный представитель 7 (3777): 1–16

    CAS Google ученый

  • 31.

    McAuliffe CA, Quagliano JV, Vallarino LM (1966) Металлические комплексы аминокислоты DL-метионин. Inorg Chem 5 (11): 1996–2003

    CAS Статья Google ученый

  • 32.

    Patalenszki J, Bíró L, Bényei AC, Muchova TR, Kasparkova J, Buglyó P (2015) Полусэндвич-комплексы рутения, осмия, родия и иридия с DL-метионином или S-метил-L-цистеином: твердое состояние и исследование равновесия раствора. RSC Advances 5: 8094–8107

    CAS Статья Google ученый

  • 33.

    Santos ER, Graminha AE, Schultz MS, Correia I, Araújo HSS, Corrêa RS, Ellena J, Lacerda EPS, Pessoa JC, Batista AA (2018) Цитотоксическая активность и структурные особенности Ru (II) / фосфина / аминокислотные комплексы.J Inorg Biochem 182: 48–60

    PubMed Статья CAS Google ученый

  • 34.

    Gong G, Xu J, Huang X, Du W. (2019) Влияние комплекса метионин-рутений на образование фибрилл амилоидного полипептида островков человека. J Biol Inorg Chem 24: 179–189

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 35.

    Sousa AP, Ellena J, Gondim ACS, Lopes LGF, Sousa EHS, Vasconcelos MA, Teixeira EH, Ford PC, Holanda AKM (2018) Антимикробная активность цис — [Ru (bpy) 2 (L ) (L ‘)] n + комплексы, где L = 4- (4-хлорбензоил) пиридин или 4- (бензоил) пиридин и L’ = Cl- или CO.Многогранник 144: 88–94

    Артикул. CAS Google ученый

  • 36.

    Silva JJN, Guedes PMM, Zottis A, Balliano TL, Silva FON, Lopes LGF, Ellena J, Oliva G, Andricopulo AD, Franco DW, Silva JS (2010) Новые комплексы рутения как потенциальные лекарства от болезни Шагаса : ингибирование ферментов и трипаноцидная активность in vitro / in vivo. Br J Pharmacol 160: 260–269

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 37.

    Sousa AP, Nascimento JS, Ayala AP, Bezerra BP, Sousa EHS, Lopes LGF, Holanda AKM (2019) Новый водорастворимый карбонильный комплекс рутения (II): цис — [Ru (bpy) 2 (SO 3 ) (CO)]. Многогранник 167: 111–118

    Артикул. CAS Google ученый

  • 38.

    Корби П.П., Мельников П., Массабни А.С. (2000) Твердый комплекс никеля (II) с сульфоксидом метионина. J Alloy Compd 308: 153–157

    CAS Статья Google ученый

  • 39.

    Накамото К., Моримото Ю., Мартелл А.Е. (1961) Инфракрасные спектры хелатных соединений металлов. IV. Инфракрасные спектры аддитивных соединений ацетилацетонатов металлов. J Am Chem Soc 83: 4533–4536

    CAS Статья Google ученый

  • 40.

    Логачева Н.М., Баулин В.Е., Цивадзе А.Ю., Пятова Е.Н., Иванова И.С., Великодный Ю.А., Чернышев В.В. (2009) Ni (II), Co (II), Cu (II), Zn (II) и Na (I) комплексы гибридного лиганда 4 ‘- (4 ‴ -бензо-15-краун-5) -метилокси-2,2’: 6 ‘, 2 ″ -терпиридин.Dalton Trans 14: 2482–2489

    Артикул CAS Google ученый

  • 41.

    Llanguri R, Morris JJ, Stanley WC, Bell-Loncella ET, Turner M, Boyko WJ, Bessel CA (2001) Электрохимические и спектроскопические исследования оксимных комплексов бис (бипиридил) рутения (II). Inorg Chim Acta 315: 53–65

    CAS Статья Google ученый

  • 42.

    Brissard M, Convert O, Gruselle M, Guyard-Duhayon C, Thouvenot R (2003) Энантиоспецифический синтез Δ и Λ [Ru (bpy) 2 ppy] + и [Ru (bpy ) 2quo] + (bpy = 2,2′-бипиридин, ppy = фенилпиридин-H +, quo = 8-гидроксихинолат): исследования ЯМР 1H и 13C и определение структуры рац- [Ru (bpy ) 2quo] P с помощью рентгеновских лучей Ф 6.Inorg Chem 42: 1378–1385

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 43.

    Majumder K, Butcher RJ, Bhattacharya S (2002) Химия некоторых аминокислотных комплексов рутения. Синтез, характеристика и свойства связывания ДНК. Inorg Chem 41 (17): 4605–4609

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 44.

    Durham B, Wilson SR, Hodgson DJ, Meyer TJ (1980) Cis транс фотоизомеризация в Ru (bpy) 2 (OH 2 ) 2 2+ .Кристаллическая структура транс — [Ru (bpy) 2 (OH 2 ) (OH)] (ClO 4 ) 2 . J Am Chem Soc 102: 600–607

    CAS Статья Google ученый

  • 45.

    Garner RN, Gallucci JC, Dunbar KR, Turro C (2011) [Ru (bpy) 2 (5-цианоурацил) 2 ] 2+ в качестве потенциального активируемого светом двойного действия терапевтическое средство. Inorg Chem 50: 9213–9215

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 46.

    Abreu FD, Paulo TF, Gehlen MH, Ando RA, Lopes LGF, Gondim ACS, Vasconcelos MA, Teixeira EH, Sousa EHS, Carvalho IMM (2017) Арилзамещенные комплексы рутения (II): стратегия улучшенного фоторасщепления и эффективной ДНК привязка. Inorg Chem 56: 9084–9096

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 47.

    Abreu FD, Diógenes ICN, Lopes LGF, Sousa EHS, Carvalho IMM (2016) Бипиридиновые комплексы рутения (II) с боковыми антраценильными и нафтильными фрагментами: стратегия для генератора ROS с селективностью связывания ДНК.Inorg Chim Acta 439: 92–99

    CAS Статья Google ученый

  • 48.

    Silva CDS, Paz IA, Abreu FD, Sousa AP, Veríssimo CP, Nascimento NRF, Paulo TF, Zampieri D, Eberlin MN, Gondim ACS, Andrade LC, Carvalho IMM, Sousa EHS, Lopes LGF (2018) Металлонитрозильные комплексы, связанные с тиокарбонилом, с индуцированным видимым светом расщеплением ДНК и многообещающей вазодилатационной активностью. J Inorg Biochem 182: 83–91

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 49.

    Снайдер Д.С., Макинтош Т.Дж. (2000) Липополисахаридный барьер: корреляция чувствительности к антибиотикам с проницаемостью для антибиотиков и кинетикой связывания флуоресцентных зондов. Биохимия 39: 11777–11787

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 50.

    Хан Н.Х., Пандья Н., Куреши Р.И., Абди ШР, Агравал С., Баджадж Х.С., Пандья Дж., Гупте А. (2009) Синтез, характеристика, связывание ДНК и исследования расщепления хиральных комплексов салена Ru (II).Spectrochim Acta Part A Mol Biomol Spectrosc 74: 113–119

    Статья CAS Google ученый

  • 51.

    Bolhuis A, Hand L, Marshall JE, Richards AD, Rodger A, Aldrich-Wright J (2011) Антимикробная активность интеркаляторов на основе рутения. Eur J Pharm Sci 42: 313–317

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 52.

    Smith NA, Zhang P, Greenough SE, Horbury MD, Clarkson GJ, McFeely D, Habtemariam A, Salassa L., Stavros VG, Dowson CG, Sadler PJ (2017) Борьба с УПП: фотоактивируемый рутений (ii) — изониазидный комплекс проявляет быструю селективную антимикобактериальную активность.Chem Sci 8 (1): 395–404

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 53.

    Carvalho JMS, Batista AHM, Nogueira NAP, Holanda AKM, Sousa JR, Zampieri D, Bezerra MJB, Barreto FS, Moraes MO, Batista AA, Gondim ACS, Paulo TF, Lopes LGF, Sousa EHS (2017) Бифосфиновый рутениевый комплекс с сильным антибактериальным и противораковым действием. Новый J Chem 41: 13085–13095

    Артикул Google ученый

  • L-фото-лейцин L-фото-метионин — Пирс

    ИНСТРУКЦИИ L- Фото Лейцин L- Фото Метионин 22610 22615 Номер Описание 22610 L- Фото Лейцин (L-2-амино-4,4-азипентановая кислота), 100 мг. Молекулярный вес: 143.15 Формула: C 5 H 9 N 3 O 2 H 2 NHO OH NN 1984.2 22615 L- Фото Метионин (L-2-амино-5,5-ази гексановая кислота), 100 мг. Молекулярный вес: 157,17. Формула: C 6 H 11 N 3 O 2 H 2 NHNNO OH. Хранение: После получения хранить при 4 ° C в темноте. Продукт поставляется при температуре окружающей среды. Введение L- Фото Лейцин и L- Фото Метионин — производные аминокислот, содержащие диазириновые кольца для защиты от ультрафиолета. (УФ) фото сшивание белков.Эти фотоактивные аминокислоты заменяют соответствующие природные аминокислоты и включаются непосредственно в белки с использованием эндогенного механизма трансляции млекопитающих. Общая скорость включения составляет 10-20%, в зависимости от частоты встречаемости аминокислот, длины последовательности, содержания белка и оборота белка. Фото активация диазириновых колец создает реактивные карбеновые промежуточные соединения, которые необратимо сшивают белки связью нулевой длины. Сшивание происходит внутри доменов межбелкового взаимодействия и приводит к восстановлению> 90% сшитых белков после лизиса клеток.Совместное использование L- фото лейцина и L- фото метионина максимизирует вероятность сшивания белковых комплексов. Полученные комплексы имеют увеличенную молекулярную массу, что видно с помощью SDS-PAGE и вестерн-блоттинга. Другие методы обнаружения сшитого продукта включают эксклюзионную хроматографию, седиментацию в градиенте плотности сахарозы и масс-спектрометрию. Важная информация о продукте • L- Фото Лейцин и L- Фото Метионин стабильны в типичных лабораторных условиях освещения. ; однако избегайте длительного воздействия света.• Поскольку лейцин и метионин являются незаменимыми аминокислотами, присутствующими в средах для культивирования клеток, эти фотоактивные производные необходимо использовать в сочетании с DMEM за вычетом метионина и лейцина (ограничивающая среда Игла, модифицированная Дульбекко (за вычетом L- лейцина ). и L- метионин [DMEM-LM], продукт № 30030) и сыворотка, диализированная PBS (продукт № 89986). Инкубация клеток со средой DMEM-LM снижает рост клеток из-за отсутствия незаменимых аминокислот. кислоты.На жизнеспособность клеток не влияет добавление фотоаминокислот при использовании в указанных концентрациях. • Для достижения наилучших результатов используйте вместе L- Фото Лейцин и L- Фото Метионин , чтобы максимально увеличить потенциал для сшивания белковых комплексов. Если используется только одна из фотоаминокислот, добавьте в среду DMEM-LM 105 мг / л L-лейцина для тканевых культур или 30 мг / л L-метионина для тканевых культур, в зависимости от того, какая аминокислота является дефицитной.• L- Фото Лейцин и L- Фото Метионин растворимы в водных растворах до 10 мг / кг. мл и 6 мг / мл соответственно. Pierce Biotechnology PO Box 117 (815) 968-0747 www.thermo.com/pierce 3747 N. Meridian Road Rockford, lL 61105 USA (815) 968-7316 факс

    ЯМР-метод для мониторинга фотографий -разложение рибофлавина и метионина |

    Воздействие света на белое вино вызывает несколько реакций, приводящих к изменению цвета, вкуса и, как следствие, влияющих на сенсорный профиль.Эти реакции могут происходить, когда белое вино разливают в бутылки из прозрачного стекла, и их механизмы зависят как от воздействия света, так и от химического состава белого вина. Особое внимание было уделено реакции с участием рибофлавина (RF), фотосенсибилизирующего соединения, и метионина (Met), серосодержащей аминокислоты, которая может вызывать образование летучих соединений серы (VSC), а именно метантиола и диметилового эфира. дисульфид. Эти соединения являются причиной дефекта, известного как световой привкус.Предыдущие исследования показали, что гидролизуемые дубильные вещества, в частности дубильные вещества из ореховых галлов, ограничивают как разложение Met, так и образование VSC. Эффективность гидролизуемых дубильных веществ была также доказана после воздействия света и хранения в течение 24 месяцев.

    Чтобы лучше понять роль таннинов в реакциях фотодеградации, был применен метод ЯМР. Раствор, содержащий RF (0,2 мМ) и Met (2 мМ), подкисленный при pH 3,2, подвергали воздействию света с использованием флуоресцентных ламп.Раствор подвергали воздействию света до двух часов, отбирая его каждые 15 минут. Те же экспериментальные условия применялись в присутствии галловой кислоты (2 мМ), составной единицы танинов галлового ореха.

    За деградацией RF и Met следили, и, как и ожидалось, их сигналы уменьшались по мере увеличения освещенности. Результаты подтвердили, что новый сигнал появился при 2,64 ppm. Этот сигнал был приписан фрагменту SOCh4 сульфоксида метионина путем добавления стандартного раствора и стандартных методов определения 2D-ЯМР.Кинетику образования сульфоксида метионина измеряли для увеличенной продолжительности воздействия света, и ее скорость была вдвое ниже при добавлении галловой кислоты. Этот результат предполагает, что ограниченная деградация Met в присутствии дубильных веществ, также наблюдаемая в предыдущих исследованиях, связана с их действием в качестве конкурента Met в восстановлении RF из его возбужденной формы.

    Метод ЯМР подходит для мониторинга реакции фотодеградации RF и Met. Дальнейшие исследования были проведены с целью проверки и доказательства способности танинов гасить как синглетный кислород, так и RF.

    Авторы: Даниэла Фракассетти, Мелисса Мастро, Сара Лимбо, Антонио Тирелли, Энцио Рагг

    Департамент пищевых продуктов, окружающей среды и питания (DeFENS), Università degli Studi di Milano Via G. Celoria, 2 20133 Милан (Италия)

    Эл. Почта: [email protected]

    Ключевые слова: Световое воздействие, ЯМР, Окисление, Танины

    Теги: Серия конференций IVESOENO IVAS 2019

    (PDF) «Необычный бидентатный комплекс метионина рутения (II): фотораспыление и антимикробное действие.»

    Журнал биологической неорганической химии JBIC

    1 3

    24. Шелдрик Г.М. (2008) Краткая история SHELX. Acta Cryst

    A64: 112–122

    25. Доломанов О.В., Бурхис Л.Дж., Гилдеа Р.Дж., Howard JAQ, Puschmann

    H (2009) OLEX2: полное структурное решение, уточнение и программа анализа

    . J Appl Cryst 42: 339–341

    26. Macrae CF, Edgington PR, McCabe P, Pidcock E, Shields GP ,

    Тейлор Р., Таулер М., Ван де Стрик Дж. (2006) Меркурий: визуализация

    и анализ кристаллических структур.J Appl Cryst 39: 453–457

    27. Farrugia L (1997) ORTEP-3 для Windows — версия ORTEP-

    III с графическим интерфейсом пользователя (GUI). J Appl Cryst 30: 565

    28. Кросби Г.А., Демас Дж. Н. (1971) Измерение квантовых выходов фотолюминов

    центов. Rev J Phys Chem 75: 991–1024

    29. Калверт Дж. Г., Питтс Дж. Н. (1967) Фотохимия. Wiley, New York,

    30. Abreu AC, Coqueiro A, Sultan AR, Lemmens N, Kim HK, Ver-

    soft R, Wamel WJB, Simões M, Choi YH (2017) В поисках новой концепции

    nature в противомикробных препаратах: изофлавоноиды

    из Cytisus striatus в качестве адъювантов антибиотиков против MRSA.Sci

    Rep 7 (3777): 1–16

    31. McAuliffe CA, Quagliano JV, Vallarino LM (1966) Металл

    комплексы аминокислоты DL-метионина. Inorg Chem

    5 (11): 1996–2003

    32. Patalenszki J, Bíró L, Bényei AC, Muchova TR, Kasparkova J,

    Buglyó P (2015) Полусэндвич-комплексы рутения, осмия,

    родия и иридий с DL-метионином или S-метил-L-цистеином:

    исследование равновесия твердого состояния и раствора. RSC Advances

    5: 8094–8107

    33.Santos ER, Graminha AE, Schultz MS, Correia I, Araújo HSS,

    Corrêa RS, Ellena J, Lacerda EPS, Pessoa JC, Batista AA (2018)

    Цитотоксическая активность и структурные особенности Ru (II) / фосфина /

    аминокислотных комплекса. J Inorg Biochem 182: 48–60

    34. Gong G, Xu J, Huang X, Du W (2019) Влияние комплекса метионин —

    рутений на образование фибрилл амилоидного полипептида

    островков человека. J Biol Inorg Chem 24: 179–189

    35.Sousa AP, Ellena J, Gondim ACS, Lopes LGF, Sousa EHS, Vas-

    conslos MA, Teixeira EH, Ford PC, Holanda AKM (2018) Anti-

    микробная активность цис- [Ru (bpy) 2 (L ) (L ′)] n +, где

    L = 4- (4-хлорбензоил) пиридин или 4- (бензоил) пиридин и L ′ =

    Cl- или CO. Полиэдр 144: 88–94

    36. Silva JJN, Guedes PMM, Zottis A, Balliano TL, Silva FON, Lopes

    LGF, Ellena J, Oliva G, Andricopulo AD, Franco DW, Silva JS

    (2010) Новые комплексы рутения как потенциальные препараты для Cha-

    газовая болезнь: ингибирование ферментов и трипаноцидная активность invitro / in vivo

    .Br J Pharmacol 160: 260–269

    37. Sousa AP, Nascimento JS, Ayala AP, Bezerra BP, Sousa

    EHS, Lopes LGF, Holanda AKM (2019) Новый водорастворимый карбонильный комплекс рутения (II)

    : цис- [Ru (bpy) 2 (SO3) (CO)]. Поли-

    hedron 167: 111–118

    38. Корби П.П., Мельников П., Массабни А.С. (2000) Твердый комплекс никеля (II)

    с сульфоксидом метионина. J Alloy Compd 308: 153–157

    39. Накамото К., Моримото Ю., Мартелл А.Е. (1961) Инфракрасный спектр —

    tra металлических хелатных соединений.IV. Инфракрасные спектры аддитивных соединений ацетилацетонатов металлов. J Am Chem Soc

    83: 4533–4536

    40. Логачева Н.М., Баулин В.Е., Цивадзе А.Ю., Пятова Е.Н., Иванова

    И.С., Великодный Ю.А., Чернышев В.В. (2009) Ni (II), Co (II), Cu (II),

    Комплексы Zn (II) и Na (I) гибридного лиганда 4 ‘- (4 ‴ -бензо-

    15-краун-5) -метилокси-2,2′: 6 ‘, 2 ″ -Терпиридин. Dalton Trans

    14: 2482–2489

    41. Llanguri R, Morris JJ, Stanley WC, Bell-Loncella ET, Turner M,

    Boyko WJ, Bessel CA (2001) Электрохимические и спектроскопические исследования

    оксимных комплексов бис (бипиридил) рутений (II).

    Inorg Chim Acta 315: 53–65

    42. Brissard M, Convert O, Gruselle M, Guyard-Duhayon C, Thou-

    venot R (2003) Энантиоспецифический синтез Δ и Λ [Ru (bpy) 2

    ppy] + и [Ru (bpy) 2quo] + (bpy = 2,2′-бипиридин, ppy = phe-

    нилпиридин-H +, quo = 8-гидроксихинолат): исследования 1H и 13C ЯМР

    и X- определение лучевой структуры рац- [Ru (bpy) 2quo]

    PF6. Inorg Chem 42: 1378–1385

    43. Majumder K, Butcher RJ, Bhattacharya S (2002) Chemistry of

    некоторых аминокислотных комплексов рутения.Синтез, характеристика

    и свойства связывания ДНК. Inorg Chem 41 (17): 4605–4609

    44. Дарем Б., Уилсон С.Р., Ходжсон Д.Д., Мейер Т.Дж. (1980) Cis-

    транс-фотоизомеризация в Ru (bpy) 2 (Oh3) 22+. Кристаллическая структура —

    транс- [Ru (bpy) 2 (Oh3) (OH)] (ClO4) 2. J Am Chem Soc

    102: 600–607

    45. Гарнер Р. Н., Галуччи Дж. К., Данбар К. Р., Turro C (2011) [Ru (bpy) 2 (5-

    цианоурацил) 2] 2+ в качестве потенциального источника света -активированный терапевтический агент двойного действия

    peutic agent.Inorg Chem 50: 9213–9215

    46. Abreu FD, Paulo TF, Gehlen MH, Ando RA, Lopes LGF, Gondim

    ACS, Vasconcelos MA, Teixeira EH, Sousa EHS, Carvalho IMM

    (2017) Арилзамещенные Комплексы рутения (II): стратегия

    усиленного фоторасщепления и эффективного связывания ДНК. Inorg Chem

    56: 9084–9096

    47. Abreu FD, Diógenes ICN, Lopes LGF, Sousa EHS, Carvalho

    IMM (2016) Бипиридиновые комплексы рутения (II) с боковым звеном

    антраценильные и нафтильные фрагменты: стратегия Генератор АФК

    с селективностью связывания ДНК.Inorg Chim Acta 439: 92–99

    48. Silva CDS, Paz IA, Abreu FD, Sousa AP, Veríssimo CP, Nasci-

    mento NRF, Paulo TF, Zampieri D, Eberlin MN, Gondim ACS,

    Andrade LC , Carvalho IMM, Sousa EHS, Lopes LGF (2018)

    Тиокарбонил-связанные металлонитрозильные комплексы с видимым светом

    , индуцированным расщеплением ДНК и многообещающей активностью вазодилатации.

    J Inorg Biochem 182: 83–91

    49. Снайдер Д.С., Макинтош Т.Дж. (2000) Липополисахаридный бар-

    риер: корреляция чувствительности к антибиотикам с восприимчивостью к антибиотикам

    и кинетикой связывания флуоресцентных зондов.Биохимия

    39: 11777–11787

    50. Хан Н.Х., Пандья Н., Куреши Р.И., Абди ШР, Агравал С., Баджадж

    HC, Пандия Дж., Гупте А. (2009) Синтез, характеристика, ДНК

    связывание и расщепление исследования хиральных комплексов Ru (II) салена.

    Spectrochim Acta Part A Mol Biomol Spectrosc 74: 113–119

    51. Bolhuis A, Hand L, Marshall JE, Richards AD, Rodger A,

    Aldrich-Wright J (2011) Антимикробная активность рутения —

    на основе

    интеркаляторы.Eur J Pharm Sci 42: 313–317

    52. Smith NA, Zhang P, Greenough SE, Horbury MD, Clarkson

    GJ, McFeely D, Habtemariam A, Salassa L, Stavros VG, Dow-

    сын CG, Sadler PJ (2017) Борьба с УПП: фотоактивируемый комплекс рутений (ii) -изониазид

    обладает быстрой селективной антимикробной активностью. Chem Sci 8 (1): 395–404

    53. Carvalho JMS, Batista AHM, Nogueira NAP, Holanda AKM,

    Sousa JR, Zampieri D, Bezerra MJB, Barreto FS, Moraes MO,

    Batista AA, Gondim ACS , Paulo TF, Lopes LGF, Sousa EHS

    (2017) Бифосфиновый рутениевый комплекс с сильной антибактериальной и противораковой активностью.New J Chem 41: 13085–13095

    Примечание издателя Springer Nature остается нейтральным в отношении юрисдикционных претензий

    в опубликованных картах и ​​институциональных связях.

    Голодный рак с ограничением метионина

    Ниже приводится приблизительное аудиосодержание этого видео. Чтобы увидеть любые графики, диаграммы, графики, изображения и цитаты, на которые может ссылаться доктор Грегер, посмотрите видео выше.

    При разработке антибиотика нельзя было создать лекарство, которое разрушало бы ДНК, например, потому что это нечто общее и у людей, и у бактерий.Хорошо, это убьет бактерии, но может убить и нас. Итак, многие антибиотики действуют, поражая стенки бактериальных клеток — то, что есть у бактерий, чего нет у нас.

    Противогрибковые средства могут атаковать уникальные клеточные стенки грибов. Пестициды могут действовать, нападая на особый экзоскелет насекомых. Но бороться с раком труднее, потому что раковые клетки — это наши собственные клетки. Итак, борьба с раком сводится к попыткам найти и использовать различия между раковыми и нормальными клетками.

    Сорок лет назад была опубликована знаменательная статья, в которой впервые было показано, что многие виды рака человека имеют так называемую абсолютную зависимость от метионина, то есть вы можете выращивать нормальные клетки в чашке Петри, не давая им аминокислоту метионин.«Нормальные клетки процветают». Но без метионина раковые клетки умирают. Например, нормальные клетки груди растут независимо от того, что есть — с или без. Но вот лейкозные клетки, им нужно дополнительное добавление метионина для роста, иначе они просто выровняются.

    Что делает рак с метионином? Опухоли генерируют с ним «газообразные серосодержащие соединения», которые могут улавливать специально обученные собаки-диагносты. Существуют собаки, вынюхивающие кротов, которые могут определить рак кожи. Есть собаки, которые нюхают дыхание, которые могут выявлять людей с раком легких.Собаки, которые нюхают мочу, могут диагностировать рак мочевого пузыря. И, да, как вы уже догадались, собаки, которые нюхают пердение, от колоректального рака. Теперь врачи могут принести свою лабораторию в лабораторию. Придает совершенно новое значение термину «сканирование домашних животных».

    В любом случае, зависимость от метионина присутствует не только в линиях раковых клеток в чашке Петри. Свежие опухоли, взятые у пациентов, показывают, что многие виды рака имеют биохимические дефекты, которые делают их метионин-зависимыми, включая [некоторые] опухоли толстой кишки, груди, яичников, простаты и [кожи].”

    Компании, занимающиеся химиотерапией, борются за то, чтобы первыми выпустить «препараты, истощающие метионин», но, поскольку «метионин поступает в основном из пищи», лучшей стратегией может быть снижение уровня метионина путем снижения потребления метионина — отказ от продуктов с высоким содержанием метионина. для контроля роста рака.

    Вот мысли; Смотреть. «Отказ от курения, соблюдение диеты, богатой [растениями],… и другие меры, связанные с образом жизни, могут предотвратить большинство видов рака». К сожалению, люди этого не делают, и «в результате каждый год у сотен тысяч американцев развивается метастатический рак.Химиотерапия излечивает только несколько типов метастатического рака … К сожалению, подавляющее большинство распространенных метастатических видов рака … [например, груди, простаты, толстой кишки и легких] смертельны. Поэтому нам отчаянно нужны новые стратегии лечения метастатического рака. Ограничение диетического метионина может быть одной из таких стратегий ».

    Итак, где находится метионин? Особенно курицу и рыбу. В молоке, красном мясе и яйцах их меньше. Но, если вы действительно хотите придерживаться продуктов с низким содержанием метионина, используйте фрукты, орехи, овощи, зерновые и бобы.Другими словами, «ограничение метионина может быть достигнуто с использованием преимущественно веганской диеты».

    Итак, почему не все онкологи этим занимаются? «Несмотря на множество многообещающих доклинических и клинических исследований, проведенных в последние годы, диетическое ограничение метионина и другие диетические подходы к лечению рака еще не получили широкого [распространения] клинического применения. Большинство врачей и исследователей, вероятно, не знакомы с диетическими подходами к лечению рака. [Ах, это преуменьшение.] Многие другие могут рассматривать ограничение аминокислот как «старую идею», поскольку она изучалась в течение нескольких десятилетий.Однако многие хорошие идеи остаются скрытыми в течение десятилетий, если не столетий, прежде чем они окажутся ценными в клинике … При правильном развитии ограничение метионина в пище, как отдельно, так и в сочетании с другими методами лечения, может [также] оказать серьезное влияние на пациентов. с раком ».

    Пожалуйста, рассмотрите возможность участия в качестве волонтера , чтобы помочь на сайте.

    Ограничение метионина и долголетие — стоит ли придерживаться диеты с ограничением метионина и есть меньше белка?

    Возможно, вы слышали, что ограничение метионина продлевает продолжительность жизни.Это правда? Или есть лучшие способы сделать это? Ознакомьтесь с этой статьей о ограничение метионина и долголетие.

    Метионин — это аминокислота, необходимая для жизни человека. Это субстрат других важных аминокислот, таких как таурин, цистеин и глутатион.

    Роль метионина заключается в отдавать метильные группы и регулировать экспрессию генов, поддерживающих рост пути в организме . Он не может быть синтезирован и поэтому должен быть получен. из диетических источников.

    Вместе с цистеином метионин является одной из двух серосодержащих протеиногенных аминокислот (создающих белок). Они участвуют в биосинтезе белков и трансляции мРНК [i].

    Считается, что ограничение метионина увеличивает продолжительность жизни и замедляет старение [ii]. Возможно даже, что эти эффекты могут произойти без ограничения калорийности, что до сих пор является единственным известным способом продления жизни у многих видов.

    Считается, что увеличение продолжительности жизни при MR вызвано подавлением анаболических путей, таких как IGF-1, mTOR и инсулин [iii].Слишком большое их количество может ускорить старение и способствовать развитию болезней.

    SAM (S-аденозил-метионин) — второй по распространенности кофактор в ферментах. после АТФ, который определяет присутствие связанных с метионином питательных веществ в тело. Один из сенсоров метионина SAMTOR (S-аденозилметионин перед mTORC1) подавляет передачу сигналов mTORC1.

    Ограничение метионина снижает SAM и увеличивает SAMTOR, что улучшает гомеостаз глюкозы и может способствовать долголетию по линии калорийности ограничение.Одна из причин, по которой считается, что ограничение калорий и метионина продлевает жизнь, заключается в том, что снижения mTOR и инсулина.

    Я думаю, что главный вопрос, который следует задать, — как ограничение метионина повлияют на вашу жизнь и благополучие в долгосрочной перспективе.

    • 16 недель MR у мужчин с ожирением повышенное окисление жиров и улучшенный метаболический синдром [iv]. Однако эти изменения, вероятно, были связаны с потерей жира и ограничением калорийности. не метионин как таковой.
    • 8 недель MR у рыб показали увеличение жира накопление в печени, клиренс глюкозы и уменьшение жира в мышцах [v].
    • Ограничение пищевого белка снижает производство митохондриальные активные формы кислорода и увеличивают компоненты жирных кислот больше устойчив к окислительному повреждению [vi].
    • Потеря метионина способствует поседению волос и потеря цвета [vii].
    • Неправильная конверсия метионина может привести к атеросклерозу из-за накопления гомоцистеина [viii].
    • Метионин может иметь важное значение для восстановления повреждений рецепторы метилирования, вызванные хроническим стрессом [ix]

    Однако метионин является незаменимой аминокислотой и не может быть удален полностью.У крыс, получавших диету без метионина и холина, развивается ожирение печени и анемия [x]. Эти проблемы решаются с помощью введения метионина.

    Ограничение метионина (MR) также является потенциальной стратегией лечения и подавления рака [xi]. Раковые клетки нуждаются в метионине, чтобы выжить, как и все другие клетки.

    Однако длительные диеты с ограничением метионина непрактичны и не имеют смысла. это потому, что они могут привести к потере мышечной массы и саркопении, что ускоряет износ [xii].

    Считается, что ограничение метионина помогает при раке: опять же из-за низкого уровня IGF-1, подавления mTOR и инсулина, которые вызывают в организме более катаболическое состояние, а не рост.

    Низкое потребление белка снижает уровень IGF-1 и заболеваемость раком у лиц 65 лет и младше но не пожилые люди [xiii] . Однако…

    Как высокий, так и низкий уровни IGF-1 связаны со смертностью от рака у пожилых мужчин [xiv] . То же самое относится к риску смерти от всех причин [xv] .

    Фактически, метаанализ 12 исследований с более чем 14 000 участников. обнаружили, что люди с низким IGF-1 имеют риск смерти в 1,27 раза, а люди с более высокие уровни были с риском в 1,18 раза. Более низкие уровни IGF-1 на самом деле могут быть больше пагубно с возрастом, так как вы будете более предрасположены к потере мышечной массы и костей переломы. Исследования показывают связь с низким уровнем IGF-1 и саркопенией у пожилых людей. люди [xvi] [xvii] .

    Важно отметить, что ограничение метионина не означает белок. ограничение. Кроме того, преимущества ограничения калорийности и голодания не имеют значения. вызвано MR тоже.

    Есть исследования на плодовых мушках, которые показывают, как ограничение метионина продлевает продолжительность жизни только в условиях низкого аминокислотного статуса [xviii]. MR не работает в присутствии большого количества аминокислот. Однако исследования MR у других видов ограничивают метионин практически нулевым значением, что по существу недостижимо для людей, потому что почти все продукты питания содержат некоторое количество метионина.

    Считается, что ограничение только белка может дать такой же эффект на продление жизни, как ограничение калорийности (CR), без необходимости ограничения калорий. Ссылка — низший метионин.

    Однако большой 2016 г. метаанализ показал, что CR в сочетании с PR оказывает идентичный эффект на продление жизни как просто CR без ограничения белка [xix] . Итак, есть меньше белка не самая важная часть увеличения продолжительности жизни, когда дело доходит до калорийности ограничение.

    Есть также много исследований, в которых грызунов с CR кормят более высокий процент белка, включая метионин, чтобы поддерживать его на прежнем уровне уровень как у тех, кто ест без ограничения калорийности [xx] [xxi]. При сопоставлении белков грызуны, находящиеся под CR, по-прежнему получают преимущества CR. и делать лучше, чем те, кто ест без ограничений.

    По сравнению с ограничением калорийности ограничение белка (PR) не способствует положительным эффектам ограничения калорийности. Преимущества снижения потребления белка вызваны, прежде всего, уменьшением потребления калорий.

    Некоторые исследования показывают, что ограничение белка может быть более эффективным при снижение уровня IGF-1, чем ограничение калорийности. Уменьшение протеина с 1,67 г / кг до 0,95 г / кг массы тела в день в течение 3 недель у шести добровольцев снизился уровень IGF-1 в сыворотке от 194 нг / мл до 152 нг / мл [xxii].

    В здоровом индивидуумов, экспрессия IGF-1 будет уравновешена связывающим IGF-1 белком (IGFBP), который блокирует эффекты IGF-1. Вот почему IGF-1 плох, только если у вас слишком много свободного сывороточного IGF-1 в крови.

    Вещи, которые удерживают IGF-1 в кровь дольше — это высокая частота приема пищи, высокий уровень инсулина, сочетание углеводы с жирами и белками, а также отсутствие физической активности. Упражнение прерывистое голодание и ограничение углеводов или белков выводит IGF-1 из крови Быстрее.

    Причина почему выше уровни IGF-1 связаны с раком, а сокращение продолжительности жизни связано с тем, что достичь такого высокого уровня IGF-1, что вы должны придерживаться плохой диеты, сохраняющей ваш инсулин постоянно повышается при сочетании углеводов с жирами и белок.

    В примере с ограничением калорийности при частом приеме пищи вы не наблюдается снижения IGF-1, потому что вы все еще слишком часто едите и, вероятно, слишком много белка для этого. Благодаря диете с низким содержанием белка вы сможете есть больше часто при снижении уровня IGF-1, но это не значит, что это полезно для вас в долгосрочной перспективе.

    Исследование 2008 года показало, что диета с низким содержанием белка более эффективна для увеличения продолжительность жизни плодовых мушек, чем ограничение калорийности [xxiii]. Однако исследователи обнаружили, что соотношение углеводов и белков также было довольно важно.Продолжительность жизни плодовых мушек была самой длинной на диетах с соотношением 1:16. соотношение белков и углеводов. По мере того, как это соотношение уменьшалось, продолжительность жизни также увеличивалась. короче.

    Protein — не единственный вещь, которая поднимает IGF-1 и mTOR. Инсулин, который может стимулироваться углеводами также повышает уровень IGF-1 и включает mTOR.

    Большинство исследований, связывающих потребление белка с более высокий IGF-1 и более короткая продолжительность жизни достигается на диетах, сочетающих высокое содержание углеводов и белок вместе . Конечно, IGF-1 будет увеличиваться, потому что вокруг есть инсулин и углеводы.Почему вы думаете, что белок повышает уровень инсулина, но примерно вдвое меньше, чем углеводы? Потому что белок может частично замедлить рост инсулина от есть эти углеводы… То же самое и с жирами. Удалите клетчатку, белки или жиры и углеводы. могут повысить уровень инсулина, как обычно.

    В состоянии с низким содержанием углеводов белок практически не повышает уровень инсулина, потому что в нем нет углеводов. Позвольте мне повторить: белок сам по себе почти не повышает уровень инсулина. Причина кроется в более низком соотношении инсулина и глюкагона.

    Если глюкагон выше чем инсулин, который возникает во время голодания, низкоуглеводной диеты или уровень сахара в крови, тогда потребление чистого протеина не приведет к резкому скачку инсулина, а на самом деле повысит глюкагон. Это меняет идею о том, что ограничение белка сокращает продолжительность жизни. полностью вверх ногами.

    Одним из наиболее изученных путей долголетия является сигнальный путь инсулина / IGF-1 (IIS).

    Снижение передачи сигналов инсулина было обнаружено, что увеличивает продолжительность жизни плодовых мух, нематод и грызунов [xxiv] .

    • В 1993 году было обнаружено, что мутация инсулиноподобный рецептор, называемый DAF-2, подавляя его у нематод, удваивал их продолжительность жизни [xxv].
    • Мутации рецептора инсулина / IGF-1 могут увеличить продолжительность жизни плодовых мух на 80% [xxvi]!
    • Нокаут рецептора IGF-1 у мышей заставляет их живут на 30% дольше [xxvii]. мышей люди, у которых отсутствует рецептор инсулина в жировой ткани, живут на 18% дольше [xxviii].
    • В дрожжах мутация ортолога инсулинозависимого AKT SCH9 продлевает срок их службы [xxix].
    • Введение метформина в кишечную палочку приводит к изменению метионина метаболизм и вызывает ограничение метионина [xxx]. Метформин действует за счет снижения уровня сахара в крови и подавления инсулина.

    Инсулин — мощный анаболический гормон, который способствует росту, анаболизму, хранение и восстановление питательных веществ.

    В контексте употребления белка с углеводами инсулин по-прежнему будет повышен, таким образом, повышая IGF-1. Удалите один из этих компонентов либо переходите на диету с низким содержанием углеводов или диету с низким содержанием белка и высоким содержанием углеводов, и вы увидите снижение в IGF-1.

    Если обе диеты могут привести к снижению уровня IGF-1, тогда Следовательно, определяющим фактором долголетия будет инсулин. Белок в отсутствие углеводов не способствует увеличению инсулина, и жир тоже. Высокий гликемические углеводы могут повысить уровень инсулина, поэтому это еще более важно обращать внимание на уровень сахара в крови и количество углеводов, которые вы едите на животных с низким содержанием белковая диета.

    Еще один важный компонент увеличения продолжительности жизни, наблюдаемый в MR и калориях. ограничение — это аутофагия, которая представляет собой процесс клеточного очищения.

    Ограничение содержания метионина в пекарских дрожжах увеличивает их продолжительность жизни, что сопровождалось усилением аутофагии [xxxi]. Однако, когда гены аутофагии были удалены, увеличение продолжительности жизни также было предотвращено.

    Аутофагия также занимает центральное место в увеличение продолжительности жизни ограничение калорийности . Когда аутофагия генетически мутировавшие и заблокированные у мышей, они не живут дольше, несмотря на то, что кормили меньше калорий, тогда как при нормальной аутофагии они живут дольше [xxxii].

    Аутофагия больше всего регулируется mTOR и AMPK. Вещи, которые останавливают аутофагию инсулин, глюкоза и аминокислоты. Вещи, которые повышают аутофагию, — это голодание, ограничение калорий, ограничение белка, упражнения и диеты с низким содержанием углеводов.

    Итак, даже если вы ограничиваете белок и калории, но не активируете аутофагию, тогда вы, вероятно, не получите преимущества продления продолжительности жизни от ограничение метионина.

    По сравнению с ограничением калорийности или диетами с низким содержанием белка, прерывистое голодание, вероятно, является наиболее действенной стратегией снижения уровня IGF-1 и увеличения продолжительности жизни.

    В моем собственном примере я ем только один раз в день и получаю значительно больше белка, чем средний человек.

    Несмотря на то, что ест около 2,0-2,5 г / кг белка, мои уровни IGF-1 в сыворотке были на нижнем пределе и составляли 103 нг / мл с референсный диапазон составляет 90-357 нг / мл. Это ниже любого человек, придерживающийся диеты с ограничением белка, или кто не ест животных белок.

    Причина, по которой я могу есть более чем достаточно белка, сохраняя при этом IGF-1 низкий из-за периодического голодания, тренировок с отягощениями и недостаточного питания карб.Мое тело просто использует этот белок и IGF-1 для поддержки роста сухой мышечной массы. и техническое обслуживание.

    Неважно, какую диету или сколько белка вы едите, если ваш энергетические пути не вызывают средний или низкий уровень IGF-1 и низкие уровни инсулин.

    Аргумент, который я пытаюсь сделать, состоит в том, что не следует винить во всем белок. Вы должны понимать, что инсулин и углеводы играют огромную роль в уровнях IGF-1, и то, как метионин повлияет на продолжительность жизни, зависит от этого конкретного контекста.

    Метионин — самая распространенная аминокислота в рационе человека, и он может быть содержится почти во всех продуктах питания [xxxiii]. Вот список самых высоких на 100 грамм:

    • Яичные белки 3,204 г
    • Мука из кунжутных семечек 1,656 г
    • Целые яйца 1,477 г
    • Сыр Пармезан 1,114 г
    • Бразильские орехи 1,008 г
    • Концентрат соевого белка 0,814 г
    • Рыба 0,14 г
    • Курица
    • Говядина 0,749 г
    • Бекон 0.593 гр. г
    • Коричневый рис 0,052 г

    Белки с низким содержанием метионина считаются неполными белки [xxxiv]. Белки растительного происхождения с высоким содержанием белка содержат меньше метионина, чем животные белки.

    Ограничение метионина связано с увеличением продолжительности жизни из-за сокращения IGF-1 и сигнализация mTOR [xxxv] [xxxvi] .

    Однако было обнаружено, что добавка глицина оказывает такое же влияние на продление жизни, как и ограничение метионина. [xxxvii] . Глицин содержится в мясных субстанциях, связках, голенях и во всех этих частях костного бульона. Если вы едите мясо, вам нужно меньше стейков и больше продуктов, богатых глицином.

    Самый большой отрицательный побочный эффект ограничения белка и метионина заключается в том, что это может привести к снижению мышечной массы и саркопении. Вот почему гораздо более разумная стратегия — не беспокоиться о белках и вместо этого практиковать прерывистое голодание.

    Кроме того, диета с низким содержанием белка не препятствует активации mTOR и IGF-1, которые являются основными причинами, по которым MR может продлить срок службы. Если ты собираетесь активировать mTOR с помощью диеты с низким содержанием белка и высоким содержанием углеводов, тогда это вероятно, не будет иметь эффекта продления жизни.

    Если аргумент заключается в том, что ограничение метионина способствует долголетию за счет подавления IGF-1, тогда вам следует вместо этого принять образ жизни, ориентированный на голодание, который включает очень низкую частоту приема пищи, тренировки с отягощениями и гибкий контроль углеводов.

    Все это можно узнать на моем мастер-классе по метаболической аутофагии, который включает более 12 часов содержания, лекций, пошаговых видео и более 70 рецептов, ориентированных на долголетие, а также на рост сухой мышечной массы.

    Оставайтесь на связи

    Siim


    [i] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22369087

    [ii] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5008916/

    [iii] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20519118/

    [iv] https://academic.oup.com/jcem/article/96/5/E836/2834121

    [v] https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1532045617301965

    [vi] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17452727/

    [vii] https: // www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19237503

    [viii] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9509248

    [ix] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16306417

    [x] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2271115

    [xi] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22342103

    [xii] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14585259

    [xiii] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24606898/

    [xiv] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23015658

    [xv] https: // www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21795450

    [xvi] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11549640/

    [xvii] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23148873

    [xviii] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24710037/

    [xix] Спикмен JR, Mitchell SE, Mazidi M. Калории или белок? Эффект диетического ограничение продолжительности жизни у грызунов объясняется только калориями. Exp Gerontol, 15 декабря 2016; 86: 28-38. DOI: 10.1016 / j.exger.2016.03.011. Epub 2016 19 марта. Review.PubMed PMID: 27006163.

    [xx] Пью Т.Д., Оберли Т.Д., Вайндрух Р. Диетическое вмешательство в среднем возрасте: калорийность ограничение, но не сульфат дегидроэпиандростерона, увеличивает продолжительность жизни и заболеваемость раком у мышей в течение жизни. Cancer Res. 1999 г., 1 апреля; 59 (7): 1642-8. PubMed PMID: 10197641.

    [xxi] Дэвис TA, Bales CW, Beauchene RE. Дифференциальные эффекты диетической калорийности и белка ограничение у стареющих крыс. Exp Gerontol. 1983; 18 (6): 427-35. PubMed PMID: 6673988.

    [xxii] https: //www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18843793/

    [xxiii] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18268352/

    [xxiv] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12610294?dopt=Abstract

    [xxv] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8247153?dopt=Abstract

    [xxvi] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11292875?dopt=Abstract

    [xxvii] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12483226?dopt=Abstract

    [xxviii] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12543978?dopt=Abstract

    [xxix] https: // www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12855292?dopt=Abstract

    [xxx] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23540700/

    [xxxi] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24785424/

    [xxxii] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3032517/

    [xxxiii] «Национальный База данных по питательным веществам для стандартной справки ».

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *