Денис штанько тренер в контакте: «Ростов» выступил с заявлением по обвинению Обухова в употреблении допинга

Мария Штанько ВКонтакте, Санкт-Петербург, Россия, id6558590

Читающие
Слова – это лишь тени того бесчисленного множества мыслей, что пребывают у меня в голове.

Верую † Православие
Дорогие друзья! Мы от всей души благодарим всех участников и Администраторов других православных групп, которые делают перепост наших новостей на своих страницах и в пабликах. Спасибо, что цените наш труд, спасибо, что бескорыстно помогаете в развитии группы «Верую † Православие», спасибо за тёплые слова поддержки, которые часто оставляете в комментариях. Пусть ваше добро вернётся к вам сторицей. Лучшая благодарность за нашу работу – «рассказать друзьям» о сообщениях, которые вам понравились. Мира вам, радости, и помощи Божией во всех начинаниях.

AdMe.ru
AdMe.ru — создан людьми, искренне увлеченными миром творчества. Присоединяйтесь!

Пешком по Питеру
✅Интересные и красивые места Петербурга, в которых стоит побывать! 📸Делитесь вашими снимками города! Подписывайтесь!

Nordic Design
Сообщество, посвященное северному и скандинавскому дизайну

Español.Todo el mundo hispanohablante.

Языкастые новости

¡Aprendemos! Испанский язык в Москве и ОНЛАЙН

ЯРКАЯ ЖИЗНЬ благотворительный фонд
Благотворительный фонд «ЯРКАЯ ЖИЗНЬ» основан в Петербурге в 2011 году. — помогаем одиноким пожилым людям — сопровождаем детей в детских домах — помогаем детям с тяжёлыми заболеваниями — поддерживаем другие благотворительные фонды через приложение «Хочу помочь» Проекты фонда: — Ежегодный «Петербургский Благотворительный Марафон» https://vk.com/spbmarafon — Конференция Life Talks www.mylifetalks.ru — «На Помощь Дальнему Востоку» — отправлено 10 тонн гуманитарного груза. . Как можно помочь фонду? 1. Сделать пожертвование на сайте фонда 2. Отправить СМС пожертвование на номер 3116 с текстом: pomog сумма. Например: pomog 250 на номер 3116 3. Стать волонтером фонда 4. Стать партнером фонда

Источник знаний

Питер Online – Хорошие новости Петербурга онлайн

Современный театр

Дмитрий Штанько ВКонтакте, Краснодар, Россия, id5310688

Scale Records
Scale Records — это лейбл, который готов сотрудничать с любым талантливым музыкантом. Каждый артист хочет, чтобы его работа была услышана. Мы самый открытый и прозрачный лейбл. Scale Records станет вашей стартовой точкой в музыкальной индустрии.

Кино | ИГРА ПРЕСТОЛОВ
Проводишь много времени, прочесывая интернет в поисках чего-нибудь интересного? Не знаешь, где посмотреть любимый сериал или фильм? Добро пожаловать в лучший онлайн кинотеатр! Смотрите онлайн, бесплатно, в хорошем качестве и в любое время суток.

АНТИКВАРИАТ | МОНЕТЫ
Здесь Вы можете приобрести и продать предметы старины,монеты-а также получить советы по их правильному хранению,оценке.Мы расскажем вам о наиболее удачных и выгодных инвестициях в предметы старины,с целью получения максимальной прибыли. Советы новичкам http://vk.com/topic-30480318_32030774 Какая выгода при покупке монет ожидает Вас http://vk.com/topic-30480318_32030762 Правила нашего сообщества http://vk.com/topic-30480318_31939781

BRAINSOFF
BRAINSOFF как ярко выраженный симптом…

Семейная психология 18+
Семья — ее изучают психологи и врачи, экономисты и юристы. Понятие ее менялось от столетия к столетию и от культуры к культуре. Она же — отражение представления человека о себе и своем месте в жизни. Семья, семей, семье, брак, муж, жена, дети, родители, братья и сестры, брат, сестра, многодетная семья, мать одиночка, отец, мама, папа, бабушка, дедушка, будущая мама, планирование семьи, молодая семья, семейное фото, год семьи, род, жизнь, поколение, любовь, ЗАГС, младенец, романтика.

САМ СЕБЕ ТРЕНЕР

Музыка для души™

Одежда для собак
Одежда для собак и кошек в наличии. Доставка по России с оплатой при получении (Почта России, CDEK). Одежда и аксессуары: — для собак мелких пород — для собак средних пород — для собак крупных пород — для кошек Мы работаем напрямую с фабриками, расположенными в Корее и Китае. По всем вопросам — обращаться в ЛС сообщества! Остерегайтесь мошенников. Работаем с сентября 2010 года. Адрес шоу рума: г.Белгород Народный бульвар д.79А Бизнес центр «Версаль» 8 этаж офис 803 Вход справа, под вывеской «Паб Декабрист». instagram: pinkscotch

A.Che |Apple Accessories| Iphone, Ipad.
Интернет- магазин аксессуаров для техники Apple. У нас вы найдете самые лучшие аксессуары для вашего iPhone и iPad. Доставка по Москве курьером(стоимость 200р.) А также по всей территории РФ, наложенным платежом(3-10 дней), стоимость примерно 200р. Работаем без предоплаты, оплата производится по факту получения.

«UP» universal Place
Sometimes you go where you have never been, but you feel that this is exactly where you should be.

Фотограф Тихомиров Николай
Art inside me by Tikhomirov Nikolay

Азия | Asian Guide| Туризм
Эта страница для тех, кто любит путешествия. Здесь Вы откроете для себя все красоты стран Азии, найдете лучшие туристические агенства, попутчиков и просто интересных собеседников и единомышленников. Наши обсуждения не дадут Вам скучать и откроют Азию с другой стороны. Если Вы любите путешествовать и познавать величие азиатских стран, то будьте с нами! Мы постоянно развиваемся и открыты для предложений. Наша цель создать самый огромный и качественный портал для любителей Азии и путешествий. ▬Другие наши проекты: ▬ [club34057432|Animals guide] || [public31352326|European Guide]

EksaMarket
*Мы являемся поставляем продукции Apple на всей территории Российской Федерации —————————————————— *Вся продукция сертифицирована ————————————————————— *Мы предоставляем лучшие цены и следим за изменениями на рынке ————————————————————— *Мы работаем только по 50% предоплате ————————————————————— *Срок доставки составляет 2-3 недели со дня фактической оплаты ————————————————————— *Вся продукция изготовлена у официальных производителей —————————————————————

Работа в Зеленограде — ZelRabota.ru
Зеленоградская биржа труда. Здесь вы найдете очень много новый вакансий и резюме. Здесь же вы сможете прочитать статьи о работе. Запрещается: ✖ Оскорбление других участников группы ✖ Мат ✖ Говноссылки ✖ Спам ✖ Предоставление недостоверной информации и агитация ✖ Отсутствие совести и уважения к труду администраторам сообщества

Фотограф Челябинск
Добрый день! Рада видеть Вас на моей страничке. Меня зовут Анна Копылова. Я детский и семейный фотограф Уже более 5 лет фотографирую: истории из вашей жизни, неповторимые моменты детства, трогательное ожидание чуда, новорожденных малышей, а также первый праздник вашего малыша. Дорожу дружескими отношениями с постоянными клиентами, очень люблю наблюдать, как растут мои детки, которых я когда — то снимала. Верю, что все взрослые это просто большие дети:) Наверное поэтому я легко нахожу общий язык с детьми. А ещё я мама самого шустрого в мире мальчика, который каждый день вдохновляет меня на новые свершения. Несколько лет назад я стала одной из создательниц первой фотостудии для самых маленьких в Челябинске Gnezdo, которая многим успела полюбиться в нашем городе. Я прошла обучение у лучших фотографов России, в направлении новорожденной, детской и семейной съемки. Моя задача сделать вашу фотосессию максимально индивидуальной, комфортной для вас и малыша, и конечно, сохранить лучшие моменты памяти на долгие годы… Не забывайте приходить на фотосъёмки, ведь они станут самыми тёплыми воспоминаниями, станут вашей семейной историей Условия моей работы вы всегда найдете на моем сайте https://vk.link/annakopylovaphoto Отзывы и фото за кадров в моем профиле инстаграм anna_kopylova74

Тюнинг
Добро пожаловать на страницу Top-Tuning Russia! Наша группа для всех кому интересны красивые и мощные автомобили. Мы расскажем Вам о современных автомобилях, концепт карах, мировых тюнинг ателье и их лучших проектах. Наши авторы работают для Вас. С нами интересно. Drag Racing, Drift, Суперкары, Новинки автосалонов и автошоу. Все это и многое другое, на страницах Top-Tuning Rus. Наша группа основана благодаря команде и поддержке интернет портала Top-Tuning.ru Предприятие основано в 2001 году. За годы успешного развития стала ведущим производителем тюнинга и стайлинга автомобилей.

Медицинская одежда | Обувь
Добро пожаловать в нашу группу! Полный каталог https://vk.com/albums-41399220 Честность и порядочность гарантируем!!! Мы планируем работать долго и нам дороже репутация! Для нас важнее то, что вы вернетесь и останетесь довольными! 🌺Приятных вам покупок )) ВНИМАНИЕ. Заказы принимает только администратор данной группы https://vk.com/id420206755! Если вам пишет кто-то другой, то это мошенники! Полный каталог https://vk.com/albums-41399220 ЖЕНСКИЕ МОДЕЛИ ОТШИВАЕМ НА 164 — 170 см, МУЖСКИЕ НА 180 СМ 🔴 Нам доверяют уже более 2000 клиентов

«Pro.Ставки» — Прогнозы CS:GO | ФУТБОЛ | DOTA 2
Доброго времени суток. Я бесплатно анализирую и прогнозирую матчи. Все мои ставки вы можете увидеть в группе, так же обсудить их с другими подписчиками в комментариях. P.s. если вам понравился ход моих мыслей и мои ставки, вы можете купить у меня приватную группу НАВСЕГДА. #Ставки #Прогнозы #Dota2 #CS.GO #Футбол #CSGO #The International 2020 #TI10

Юля Штанько, Санкт-Петербург, Россия, ВКонтакте, id1822971

Психология отношений

ИДЕИ
Вместе с группой ИДЕИ вы найдете оригинальные лайфхаки, интересные идеи по декору, простые мастер-классы, дельные советы и многое другое.

Оптимист
Интересные новости, приколы, анекдоты.

Шедевры рукоделия

Just Fitness | Фитнес Блог
Ну вот и все, путник, твое бесконечное путешествие в поисках фитнесс-сообщества окончено. Можно переложить беляш в другую руку и тыцнуть на кнопочку «Подписаться». Это простое действие автоматически снижает вес, делает тело гибким и прибавляет +5 к карме привлекательности. У нас в ассортименте: • Уникальные методики тренировок для домашнего пользования людям даже с нулевым уровнем подготовки. • Комплексные упражнения для профессионалов, желающим еще чуть-чуть улучшить тело. • Динамичный юмор, смех от которого укрепляет пресс и косые мышцы живота. • Мотивационные ролики от ведущих тренеров, один только просмотр которых укрепляет тело и дух, а если еще и присоединишься к онлайн тренировкам, то вообще цены тебе не будет. • Много фотографий красивых женских и мужских тел. Кто мы? • Секта ЗОЖников новообрядцев, проповедующая силу, выносливость и дух. • Место, где нашли себя актеры, политики, официанты, студенты и все любители зыркнуть на свое тело в отражении витрин и зеркал. • Любители вкусной еды, укрепляющей наши «булочки» и улучшающей тургор кожи. Ах, дочитали до этой строчки? Виртуально гордимся тобой! Добро пожаловать друг или подруга в эпицентр фитнеса! И пусть бывшие рыдают от зависти, при взгляде на то что потеряли!

Тупокайф!
С нами веселей!

FASHION
Все о моде и стиле.

Женская психология

Всегда говори Да | Мотивация и вдохновение
Сообщество объединяет в себе людей, которые берут от жизни всё и знают, как добиваться успеха! Мотивация, истории успешных людей, советы для развития — это всё в сообществе Всегда говори «ДА» .

VK Travel — горящие туры
Это сообщество — агрегатор лучших горящих туров и интересных предложений от ведущих туроператоров и проверенных агентств.

Путевка! Распродажа туров
🔥 Путевка! — крутое онлайн-турагентство с историей by [id20299180|Юлия Кольчатова]

FASHIONY
Каждый день избранные картинки о красивом. Подписывайся!

Идеи Handmade
Сообщество для тех, кто любит творить своими руками!

Школа ремонта
Окунитесь в мир ремонта. Наше сообщество посвящено ремонту, дизайну интерьера, лайфхакам в ремонте. Присылайте свои работы в предложенные новости группы — мы их опубликуем и оценим по достоинству! А также не забывайте делиться нашими записями с друзьями 😉

Загадки Эйнштейна
Тренируй свои мозги

ЮМОР — Игра Слов

Уютный декор для дома. Handmade и рукоделие
В нашем сообществе собраны идеи декора, рукоделия, handmade и мастер-классов, иллюстрации для вдохновения и творчества, лайфхаки, детские идеи и множество авторских работ талантливых мастеров со всего мира. Вдохновляйся, бери и делай!

Лавка Edoque
Находим и доставляем лучшие продукты вам домой и в офис. Отбираем всё вручную. Работаем в Москве и Санкт-Петербурге с 2014. Бесплатная доставка по городу от 1500₽. Основатель лавки — [id2324|Юля Бондарчук].

Interior and Decor — Дизайн интерьера. Декор
Лучшие идеи декора и дизайна интерьера. Уют в доме. Читайте нас каждый день! Нами вдохновляется уже более 1.600.000 человек.

Самоукина Наталья Васильевна, тренер MBS

«Ростов»: Егорову лучше следить за арбитрами, а не за ногами Норманна

https://rsport.ria.ru/20190723/1556807613.html

«Ростов»: Егорову лучше следить за арбитрами, а не за ногами Норманна

«Ростов»: Егорову лучше следить за арбитрами, а не за ногами Норманна — Спорт РИА Новости, 23.07.2019

«Ростов»: Егорову лучше следить за арбитрами, а не за ногами Норманна

Футбольный клуб «Ростов» предложил главе департамента судейства и инспектирования Российского футбольного союза (РФС) Александру Егорову следить за слабой… Спорт РИА Новости, 23.07.2019

2019-07-23T16:56

2019-07-23T16:56

2019-07-23T16:56

ростов

александр егоров

футбол

/html/head/meta[@name=’og:title’]/@content

/html/head/meta[@name=’og:description’]/@content

https://cdn23.img.ria.ru/images/155649/71/1556497132_1393:212:2881:1049_1920x0_80_0_0_ca86f816a087601da018f857efaa3f88.jpg

МОСКВА, 23 июл — РИА Новости. Футбольный клуб «Ростов» предложил главе департамента судейства и инспектирования Российского футбольного союза (РФС) Александру Егорову следить за слабой работой арбитров, а не ногами футболиста Маттиаса Норманна.»Ростов» в субботу на своем поле сыграл вничью с московским «Спартаком» (2:2) в матче второго тура Российской премьер-лиги. После игры ростовчане обратились к Егорову и президенту РФС Александру Дюкову с просьбой отстранить от работы арбитра Кирилла Левникова, который, по мнению клуба, допустил ряд ключевых ошибок, в том числе не назначив пенальти за фол на Норманне. Егоров, в свою очередь, заявил, что Левников трактовал эпизод правильно, а Норманн упал из-за того, что у него «слабые ножки».»Что касается слабых ножек Норманна, то давайте так – пусть каждый занимается своей работой. Физическое состояние игроков «Ростова» будет оценивать главный тренер команды. Александру Егорову, наверное, стоит обратить внимание не на слабые ножки Норманна, а на слабое судейство в нашем чемпионате в новом сезоне. Потому что есть ощущение, что за первые два тура скандалов в части судейства произошло уже больше, чем за весь прошлый футбольный сезон», — добавил Штанько.

Спорт РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

2019

Спорт РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

Новости

ru-RU

https://rsport.ria.ru/docs/about/copyright.html

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/

Спорт РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

Спорт РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

Спорт РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

ростов, александр егоров, футбол

МОСКВА, 23 июл — РИА Новости. Футбольный клуб «Ростов» предложил главе департамента судейства и инспектирования Российского футбольного союза (РФС) Александру Егорову следить за слабой работой арбитров, а не ногами футболиста Маттиаса Норманна.

«Ростов» в субботу на своем поле сыграл вничью с московским «Спартаком» (2:2) в матче второго тура Российской премьер-лиги. После игры ростовчане обратились к Егорову и президенту РФС Александру Дюкову с просьбой отстранить от работы арбитра Кирилла Левникова, который, по мнению клуба, допустил ряд ключевых ошибок, в том числе не назначив пенальти за фол на Норманне. Егоров, в свою очередь, заявил, что Левников трактовал эпизод правильно, а Норманн упал из-за того, что у него «слабые ножки».

«Вчера Александр Анатольевич Егоров дал большую пресс-конференцию, на которой не ответил на главные вопросы о качестве судейства матча «Ростов» — «Спартак», среди которых главный спорный эпизод. И в итоге о фоле на Чистякове и о неназначенном пенальти в ворота «Спартака» мы узнали только благодаря журналисту, которой уже после пресс-конференции обратил внимание на этот момент. Если бы ответ Егорова прозвучал во время пресс-конференции, акценты и мнения о судействе этой игры поменялись бы кардинально», — заявил PR-директор «Ростова» Денис Штанько, слова которого приводятся на официальном сайте клуба.

«Что касается слабых ножек Норманна, то давайте так – пусть каждый занимается своей работой. Физическое состояние игроков «Ростова» будет оценивать главный тренер команды. Александру Егорову, наверное, стоит обратить внимание не на слабые ножки Норманна, а на слабое судейство в нашем чемпионате в новом сезоне. Потому что есть ощущение, что за первые два тура скандалов в части судейства произошло уже больше, чем за весь прошлый футбольный сезон», — добавил Штанько.

Новости — Управление по физической культуре и спорту — Отраслевые органы Администрации — Администрация города

 • В первенстве России по футболу среди юношей 1999 г.р. принимают участие 28 команд разбитых на пять групп. В первом туре встретились в гостевом матче «СДЮСШОР 2 — Митос» и СКА Ростов. Героем матча стал нападающий  «СДЮСШОР 2 — Митос» Денис Тунаев, на его счету 4 забитых  мяча. Еще один мяч — пятый по счету — в ворота СКА забил Кирилл Козьменко. 5:0 — с таким счетом футболисты  «СДЮСШОР 2 — Митос» победили армейцев. Впереди повторная встреча этих команд, но уже в Новочеркасске. 

• В Кубке Российского Футбольного Союза среди команд  1998-1999 г.р. «СДЮСШОР 2 — Митос» встретился также со СКА Ростов. В равной игре  в первом тайме наши футболисты пропустили мяч в свои ворота. Во втором тайме всей командой атаковали ворота армейцев, пытаясь восстановить счет в игре. Но в контратаке, пропустили в свои ворота второй мяч. После этого ростовчане всей командой ушли в оборону. В последние 10 минут наши могли отыграться, но дважды после ударов Максима Войнова мяч попадал в перекладину. После этого поражения «Митос» занимает 4 место в своей группе и выбывает из борьбы за Кубок. 

• В Казани завершился чемпионат Мира по синхронному плаванию. Отлично выступили синхронисты сборной России, они завоевали 8 золотых медалей и были вне конкуренции. Благодаря им сборная России в медальном зачете стала третей, пропустив вперед себя только Китай и США. На Всероссийских соревнованиях по синхронному плаванию в июне заслуженный тренер России, тренер сборной России Татьяна Данченко внимательно смотрела за выступлением Ульяны и Анны Бородиных. Она пригласила их на просмотр в Москву на сбор представительниц синхронного плавания. Это огромный успех новочеркасского синхронного плавания СДЮСШОР №1 и тренера мастера спорта Светланы Штанько. Среди учениц Татьяны Данченко много Олимпийских чемпионов, чемпионов Мира, Европы. У наших сестер Бородиных есть возможность продолжить этот список.

• В чемпионате города по футболу во втором туре второго круга на футбольном поле НЭВЗа встретились хозяева «Энергия-НЭВЗ» и «Лицей – 7». Начало встречи проходило при преимуществе хозяев. И уже на 8 минуте Александр Царевский открывает счет – 1:0 «Энергия» впереди. После забитого мяча все изменилось: мяч больше на половине поле «Энергии». 6 угловых, 3 штанги, 1 перекладина, 2 удара по вратарю и не одного забитого мяча. Первый тайм 1:0 в пользу «Энергии». Во втором тайме устали «лицеисты». Сергей Еременко увеличивает разрыв в счете 2:0. «Лицей – 7», несмотря на забитый мяч, продолжал сопротивляться, но после того как Сергей Воронин забил третий мяч в ворота «Лицея-7», футболисты «Лицея-7» прекратили борьбу. В конце второго тайма Андрей Царевский делает дубль, забив четвертый мяч. 4:0 победа «Энергии». После этой победы «Энергия» становится явным претендентом на 3 место. В предыдущем туре «Энергия» нанесла поражение «Локомотиву», со счетом 3:2, который после третьего круга уверенно занимал 3 место. А что же «Лицей»? Дружная команда пока очков не имеет, но в любой игре от этой команды можно ожидать сюрприза.

• С 21 по 26 августа в Кемерово пройдет первенство России среди молодежи в возрасте 19 – 23 года по боксу. В составе сборной Ростовской области право выступать на этих соревнованиях получили 4 боксера. 2 из Новочеркасска, 2 из Ростова-на-Дону. Новочеркасск представляют: мастер спорта, студент НИМИ – Шагит Рамазанов и студент ЮРГПУ(НПИ), кандидат в мастера спорта – Шамиль Магомедов. Оба проходят подготовку в Кемерово, под руководством мастера спорта Артура Баева.

Просмотров: 55

Как экс-форвард «Динамо» освобождал пленных в Афганистане :: Хоккей :: РБК Спорт

Денис Романцов поговорил с Михаилом Титовым, хоккеистом захватывающей судьбы

Читайте нас в

Фото: Агентство ТАСС

В семидесятые Титов играл за «Динамо» в одном звене с Мальцевым, восьмидесятые посвятил работе в КГБ, потом стал начальником и президентом «Динамо», а последние пять лет работает в «Динамо» же директором школы. Михаил Федорович ютится в небольшом кабинете, в помещении аккредитационного центра арены «Мегаспорт». В десятке метров от него пылит и громыхает стройка. 31 мая у школы «Динамо» заканчивается аренда ходынского дворца и вместе со взрослой командой она переезжает на «Арену Легенд».

— Уже пять лет вы возглавляете школу «Динамо». Правда, что год назад активно переманивать у вас игроков начал ЦСКА?

— Да, и это удивительно. ЦСКА всегда был флагманом детского хоккея Москвы — сначала родители ведут детей к ним, только потом к нам, то есть они и так получали всех лучших. В том году мы впервые в истории обыграли школу ЦСКА, думали, что будем теперь всерьез с ними конкурировать, а они поступили по-другому — тупо скупили лучших, пользуясь регламентом (там все расписано — за какой год сколько платить), уговорили ребят, сыграли на том, что у «Динамо» нет своей школы.

— Как это?

— Нас тогда с Петровского Парка выселили и мы не знали, куда придем, то ли сюда, на Ходынку, то ли вообще раздадим команды по московским школам. В ЦСКА воспользовались этим и купили у нас пять человек разных возрастов (кажется, 1998 год, 2000-й, 2001-й и даже самый маленький — 2004-й — там мальчик способный, выделялся у тренера Димы Старостенко). Боюсь, что сейчас, когда будем переезжать на ЗИЛ, ЦСКА опять этим воспользуется — там уже впрямую говорят нашим игрокам: «Вам придется далеко ездить на «Арену Легенд». Оставайтесь на севере Москвы».

— Получается — раз все по регламенту — у «Динамо» просто нет средств, чтобы аналогично действовать?

— Средства есть. Но мы ориентируемся на своих воспитанников, хотя тоже, конечно, приглашаем ребят из других школ — смотрим, кто подходит нам по характеру. Но дело в том, что в ЦСКА всегда идут с большим желанием.

— Ваше отношения к тому, что сборная 1998 года будет играть в чемпионате МХЛ?

— Мне кажется, если они соберут всех лучших в одну команду, то выделится несколько лидеров, а остальные, которые были лидерами в своих командах, будут в этой сборной прозябать. А что нам делать, если у нас сейчас заберут лучших ребят 1999 года? Планируют-то взять не только игроков 1998 года, но уже и 1999-го. Это, может, и неплохо, но я считаю, что мы в «Динамо» и сами можем воспитать хоккеиста. Вопросов много, но радует то, что они хоть что-то предпринимают. Может, это и тупиковый путь, но его все равно надо пройти. Кто знает, вдруг у Прохорова получится. Он хотя бы попытается.

— Вылет юниорской сборной в четвертьфинале ЧМ сильно шокировал?

— За всю сборную не скажу, а вот в «Динамо» в 1997 году была очень сильная пятерка, но тренер сборной их разбил по разным сочетаниям. Никто из них даже в системе «Динамо» не остался.

— А как попали в хоккей вы?

— На мое счастье, в нашей школе оказался игрок молодежной команды «Спартака» — вокруг которого крутились хоккейные баталии. Мы с моим соседом по двору Сергеем Сахаровым выделялись по своему возрасту и нас взяли в команду. Играли со школой, которая располагалась на Кирпичной улице, где завод «Серп и Молот». Там был такой Михаил Карпов — он обратил на нас внимание: «Ребята, вы где занимаетесь?» — «Да нигде, в обычной школе». Пригласил он нас в «Серп и Молот» — Серега не пошел, а я взял рюкзак и поехал. Приехал в «Серп и Молот», спустился в подвал, где у них кладовка с хоккейными вещами. Увидел Николая Поставнина, старшего тренера «Серпа и Молота», чемпиона-1947 в составе «Динамо». Он мне так любезно: «Ты кто такой? Чего пришел?» — «Хочу в хоккей играть!» — «О, молодец. А какого ты года?» — «Сорок девятого». — «Твой год берем в следующем сезоне. Приходи через год». Я пошел домой в слезах. Обидно. Встретил Карпова, который меня туда приглашал — он пошептался с Поставниным и тот сказал: «Ладно, пусть выходит на лед».

Я и вышел: а там занимались Саша Смолин, он в молодежке ЦСКА один обыгрывал весь Союз, его сначала брали в основу вместо Харламова, но что-то не сложилось, Вадим Никонов, будущий футболист и тренер, Боря Штанько, воспитавший потом Буре и Зубова, погиб в 2006-м, на него напал кто-то в подъезде.

Поначалу я скромничал: Никонов со Смолиным как корифеи стали меня цеплять, подъехал Штанько: «А чего ты такой скромный?» Ну, я тоже начал рубиться, я вообще любил потолкаться, дошло чуть ли не до драки, но нас разняли. Поставнину понравилась моя силовая игра и он оставил меня в команде.

— Первая серьезная травма?

— Первенство Москвы. Разогнался за ворота с виража, спартач Женя Кухарж  догнал меня, стал подбивать клюшку, а я руки убрал и получил клюшкой в лицо. Кровь. Испугался — думал, глаз выбили. Но ничего — умылся и пошел домой. Мать как увидела — в слезы. Отец: «Не пущу больше на хоккей, а то инвалидом станешь». Всыпали мне. В субботу мать отняла у меня рюкзак с формой, наступил понедельник, назавтра — тренировка. Я к маме — она: «Ну ладно, иди». Так получилось, что в нашей семье она командовала.

— Как в основу Динамо» попали?

— Два года тренировался у Бориса Афанасьева в молодежке «Динамо», а потом Виктор Тихонов, помогавший в «Динамо» Чернышеву, пригласил молодых ребят тренироваться с теми, кого не вызвали в сборные. Основа «Динамо» тренировалась с одиннадцати до половины первого — под восточной трибуной динамовского стадиона. Тихонов собирал нас в половине десятого, мы чистили лед, он с нами занимался, потом мы опять зачищали лед, приходили игроки основы, мы и с ними играли — и так каждый день. Тихонов обожал работать с молодыми, но, увы, в 1968 году он уехал в Ригу — хотел взять меня с собой, но Чернышев не отпустил.

— Помните первую игру за «Динамо»?

— С ярославским «Торпедо», 1968 год. Я забил гол, про меня написали в «Советском спорте», матери на работу принесли эту газету: «Валь, а это что за Титов?» — «А я не знаю». Родители много времени проводили на работе и были не в курсе, что я попал в основу «Динамо». Только из газеты и узнали. Отец потом так ни разу на хоккей и не пришел — он старшина милиции, все хозяйство на нем, уходил рано утром и возвращался поздно вечером, а мама с сестрой иногда приезжали на игры.

— Чернышев был мягким тренером?

— Мягонький, не скрою. Когда я попал в команду мастеров, хотел играть почаще, но для этого нужно было превосходить опытных игроков в физике, а нагрузок нам давали маловато. После выходных ребята приходили немножко помятые, вялые — в тренировочном процессе с нами можно было и пожестче. Мы, молодые, носились по льду, чтобы показать себя, получить шанс в основе, а ветераны могли двинуть по лицу: «Чего ты бегаешь — и так голова кружится после выходных». Вот с приходом Юрзинова интенсивность тренировок увеличилась в разы.

— Самым суровым из ветеранов был Виталий Давыдов?

— Это великий человек — и притягивал к себе таких же великих. Виталий Семенович Давыдов водил нас в Театр Вахтангова, часто приглашал в Новогорск своего товарища Евгения Леонова, который говорил с нами голосом Доцента из «Джентльменов удачи».

Опытные игроки немножко обособленно держались. После тренировки ныряли в машины и уезжали, а мы — на автобусе. Когда я пришел в команду, Виталий Семенович купил двадцать первую «Волгу», мыл ее, прогревал. Меня тянуло к технике, хотелось посмотреть, но Давыдов к машине никого не подпускал. Устроил мне как-то экзамен: «Знаешь, почему синий выхлопной газ идет?» — «Потому что неполное сгорание топлива». — «Молодец!». Я первую машину приобрел только в 1975-м — «Жигули», третью модель.

— Много помните веселых случаев, с Чернышевым связанных?

— Да конечно. Тренируемся в «Лужниках» после выходного. Володя Девятов пришел не совсем в форме. Мы с ребятами, как всегда, скооперировались, наводим суету, чтоб прикрыть его от Чернышева. Вдруг команда тренера: «Молодые, надеть жилетки!» Мы с Котловым оделись, а Девятов — никак. Натягивал, натягивал и упал. Чернышев удалил его с тренировки. Девятов снял форму, помылся, а в это время Аркадий Иванович пошел в туалет. И так они удачно разминулись, что Девятов вышел из душа и закрыл раздевалку на ключ, не зная, что туда Чернышев только что зашел. Девятов спокойно исчез, а на тренировку прибежал администратор: «Ребята, там из раздевалки кто-то ногой стучит». Прибегаем, оттуда бушующий Чернышев: «Где этот алкоголик Девятов?!» В итоге Вовке больше попало не из-за того, что он пришел на тренировку несвежий, а из-за того, что Чернышева в раздевалке запер.

Еще? На летнем сборе в Отепя выходим на зарядку. Пасмурно. А Чернышев уже идет в дождевике с рыбой: «Вы спите, а я уже вон сколько рыбы наловил». Потом на сборе в Германии я как-то взял билеты на карусель, позвал Женю Котлова, партнера по звену, но он не захотел, а Аркадий Иванович — наоборот: «О, пойдем». Сели, нас как закачало в разные стороны. Чернышева начало мутить: «Куда ты меня привел?! Останови карусель!»

Раз тренировались в той же Германии. Пришли местные мальчишки. Чернышев посадил одного из них на плечи, побежал, споткнулся о шайбу и шлепнулся на лед вместе с тем мальчиком — тот только чудом не разбился.

А еще был случай. Отдыхаем перед игрой в Новогорске. Подъезжает Аркадий Иванович, а за ним гаишник гонится на мотоцикле. Чернышев машину бросил, мимо нас проскочил и крикнул: «А мотоциклиста на базу не пускайте!» Опытные ребята, Васильев и Петухов, подошли к гаишнику: «Ты что, не знаешь, за кем гонишься? Это же Чернышев». — «Ну и что, а чего он не останавливается?»

Или вот. Переезжали как-то в «Лужниках» из одной раздевалки в другую. А кепка, которую Чернышев всегда носил, завалилась за гардероб. Пора уходить, а кепки нет. Он ее ищет-ищет — не найдет. Тогда он запер раздевалку и сказал: «Пока кепку не найдете, никто отсюда не выйдет». Стали всей командой двигать гардероб.

— На сборах в Германии вы первый раз оказались за границей?

— Да, 1967 год. Стоим перед вылетом в аэропорту, диктор по-немецки приглашает нас на посадку, и я говорю Тихонову: «Наша посадка начинается!» — «Да ладно, кто тебе сказал?» Не поверил. Потом посадку объявили по-русски. Тихонов изумился: «Ты чего, немецкий знаешь?» А дело в том, что моя учительница иностранных языков была очень жесткой — на уроках требовала говорить только по-немецки и я более-менее, на тройку с минусом знал язык.

— Ваше первое впечатление от Мальцева?

— Помню, как Сашка появился в «Динамо» в 1967 году. Я тренировался в звене с Киселевым и Орчаковым. Чернышев мне сказал: «Тихонов привез игрока — ты пока посиди, Михаил». Мальцев на первой же тренировке начал всех обыгрывать. Даже ветераны говорили: «Вот это зверька привели!» Мы с Мальцевым одногодки, но по уровню — небо и земля: я, бывало, стеснялся, старался пораньше шайбу отдать, а Сашка все умел — отдать, забить, обвести. Мальцев — тот редкий случай, когда есть и талант, и упорство.

Среди игроков нашего возраста было много талантов, которые не смогли раскрыться: Саша Смолин в ЦСКА, Женя Кухарж в «Спартаке», Женя Сысоев в «Крыльях», со мной в тройке играл Серега Юдин — у одного интерес к хоккею пропадал, другой не к тому тренеру попадал, третьему терпения не хватило.

— Как вы с Мальцевым проводили в молодости свободное время?

— Раньше неделю держали на сборах, а потом выпускали на один день. Естественно, наш выходной начинался с Оружейной бани — парилка, массаж. Иногда и Тихонов с нами парился — но редко. Потом обедали. В основном все женатые — разъезжались по домам, а мы с Мальцевым, холостые, отправлялись вниз по улице Горького. Кафе «Лира», «Пекин», «Седьмое небо». Но чем хорош Саша — как бы ни гуляли в выходной, с утра он пахал на тренировке как зверь. С Мальцевым мы и отпуска вместе проводили — в Ялте, Одессе — пляски, музыка, купание. В Одессе он и с Сюзанной, супругой будущей, познакомился.

— В 1972 вы ездили со второй сборной в Канаду.

— Да, помню свой первый выход на канадский лед. Шайба оказалась в углу, я спешу к ней и краем глаза замечаю, что за мной летит защитник. Думаю, ну, сейчас врежется в меня. Тренеры — Тихонов и Майоров — говорили нам, что силовые приемы надо упреждать, у меня сработал рефлекс и я ка-а-ак дал тому защитнику первый, не дожидаясь пока он врежется. Меня и удалили. Я к судье: «А за что?» Потом на пятаке мне канадец пару раз двинул по лицу, я глаза поднял, а он улыбается. Ну, я ему и дал в ответ краем клюшки — у него кровь, на меня налетели, начали долбить. Зато потом внаглую ко мне не лезли.

Еще был случай — за мной Горди Хоу по площадке бегал. Он играл в команде с сыновьями. Средний сын за воротами разогнался, я за ним. Я почувствовал, что он будет останавливаться, и врезал ему. Он бах — и отключился. Его отец выскочил, стал за мной гоняться. Пришлось и его успокаивать.

— «Динамо» при вас и Мальцеве так и не смогло стать чемпионом — а когда были особенно близки?

— В начале семидесятых, когда Тарасова убрали из ЦСКА. Мы опережали их на двенадцать очков, но Мальцев получил травму, въехал на тренировке в Мишку Алексеенко, неудачно упал, кость надломилась, мы забарахлили — Мальцев же был идеологом всех наших побед, он обычно открывал счет, дальше уже мы, а когда он лечился, лидерское бремя никто на себя взять не смог, даже Толя Мотовилов. Короче, ЦСКА нас догнал и перегнал. Игроки ЦСКА были мощнее, где не хватало техники и тактики, брали наглостью. А мы, как мне кажется, были слюнтяйчиками — наглости нам не хватало. Впервые она у нас появилась с приходом Сашки Билялетдинова. Он первый, кто начал драться с Михайловым и другими авторитетами.

— Билялетдинов с первых игр был таким смелым?

— Сначала он два года только тренировался с основой, но и тогда ни перед кем не робел — очень жесткий был. Мне один раз даже обидно стало — играли с ЦСКА, Билялетдинов врезал Михайлову, к нему подбежали разбираться Петров с Харламовым, а наши авторитеты, тот же Валера Васильев, заступились вяло.

— Почему Билялетдинова сначала называли Александром?

— А он пришел и представился: «Саша». Так и звали его, хотя чаще Биллом, конечно. Это потом, когда он окреп, стал лидером обороны «Динамо», незаменимым игроком сборной, выяснилось, что он Зинэтула. Мы удивились, конечно — необычно звучало.

— Какие клички были в «Динамо»?

— Меня звали Дохлый или Хилый. Еще у нас были Гнус, Сопливый, Медведь, Бурлак, Пятак — ребята прочитают, вспомнят в этих кличках себя.

— Юрзинова вы застали игроком?

— Я с ним даже несколько игр в тройке провел, когда Игорь Самочернов травмировался. В одном из матчей Юрзинов забросил три шайбы — одну из них с моей передачи. Когда нас отпустили домой, Юрзинов сказал: «Молодой человек, ты можешь сегодня выпить бокал белого вина и сходить с девушкой в кино». Заканчивая играть, он уже относился к молодым как тренер.

Мне повезло, что Юрзинов доверял мне подбирать ему клюшки. Он любил тяжелые, дубовые, а я, наоборот, легкие. Администратор «Динамо» Замберг давал молодым первые попавшиеся клюшки, мог мне и тяжелую всучить, а, когда Замберг узнал, что Юрзинову подбираю клюшку я, я смог выбирать себе легкую.

Щелчок у Юрзинова был очень хороший. «Спартаку» как-то от синей линии такой гол забил! Их вратарь Зингер даже не дернулся. Но Самочернов раньше времени въехал в зону, и шайбу не засчитали. Самочернов, конечно, получил от Владимира Владимировича.

Еще Юрзинов очень не любил кроссы бегать. Мы, молодые, с Юрой Репсом и Сашей Билялетдиновым, зарубимся и бежим, кто быстрее, а Юрзинов нам: «Куда вы рванули-то? Не спешите». Вот Виктор Тихонов — он наоборот, в охотку бегал вместе с командой, даже когда тренером стал. И в футбол с нами играл.

В «Динамо» много кто в футбол любил гонять — Шилов, Мотовилов, Васильев, Мальцев, я мог подыграть. Однажды играли в ГДР с командой футболистов второй лиги — 3:1 победили. Доходило даже до такого — Чернышев говорил утром на сборе: «Сегодня фартлек». А мы ему: «Аркадий Иванович, ну, пожалуйста, можно в футбол поиграем?» — «Нет, надо бегать. А в футболе вы стоять будете». — «Не будем!» Тогда Чернышев сказал Валере Назарову: «Кувырок назад, кувырок вперед». Тот выполнил. Чернышев нам: «Ну ладно, играйте в футбол».

— Какие развлечения были в Новогорске?

— Когда я начал жить с командой мастеров, у нас процветали картишки. Борис Михайлович Зайцев, Репс, Чичурин и я играли в буру. Мы Зайцева даже увели от преферанса — у них была своя компания, с Давыдовым, Чиновым и Волковым. А Зайцев же еще курил страшно — Чернышев зайдет, все в дыму и мы в карты режемся на деньги. Доставалось нам от Аркадия Ивановича.

— Вы чаще в плюсе оставались?

— Не скрою, чаще выигрывал. Мы с Юрой Чичуриным считали побыстрее, а Репс с Зайцевым в основном проигрывали. Но мы и ставили-то по рублику — это баловство. Потом Толя Мотовилов стал меня в преферанс подтягивать — вот там мне трудно было, по ползарплаты проигрывал, но все-таки научился.

— Почему у Чичурина не сложилось со сборной?

— У Юры была великолепная связка с Мальцевым. Одно время их звено с Толей Белоножкиным было самым результативным. Мы думали, что всю тройку в сборную возьмут, а взяли только Сашу Мальцева. Я считаю, несправедливо с Белоножкиным и Чичуриным поступили. Их взяли на сбор сборной, они обыгрывали звено Моисеева, а потом Тарасов дал тренировку на сорок минут с отягощениями, с блинами, и после таких нагрузок начал игру. Белоножкин рассказывал: «Мы и так непривычные к таким нагрузкам, а тут еще и ноги загудели». Тарасов сказал Чернышеву: «Видишь, твои не готовы». И Юру с Толей отцепили.

— Вы тоже с Мальцевым в одном звене играли?

— Да, когда Чичурин немножко потерялся, меня поставили к Мальцеву. Я в тот год 18 шайб забил. У нас с Белоножкиным было правило: дать Мальцеву забить первую шайбу, тогда он раскрепощался, много пасовал. А если не забивал — нервничал. Один раз я Мальцеву не отдал на синей линии, решил спекульнуть, так он мне потом так напихал, что до конца карьеры хватило.

— Запомнили момент, когда Чернышев ушел из «Динамо»?

— 1974 год. Меня вызвали в первую сборную для подготовки к серии с ВХА — лигой, которая тогда конкурировала с НХЛ. Вручили майку сборной, сфотографировали, а потом у меня защемило нерв, нога стала отниматься и я лег в госпиталь на Курском вокзале. Приехал Чернышев, привез груши. Пролежал я там дней сорок, а потом приехал Юрзинов — с шоколадкой. Смена тренера случилась, когда я был в госпитале. Нога все никак не приходила в норму, я продолжал хромать, но я закачал ее, стал играть, Юрзинов поставил меня к Мальцеву. Мне стало неловко, подъехал к Юрзинову: «Нога еще не зажила — тяжело с Мальцевым в звене». — «Нет, это пусть ребятам будет стыдно, что ты и хромой с Сашкой играешь».

— Чем тренировки Юрзинова отличались от тех, что были у Чернышева?

— Он ввел психологические тренировки. Заканчивается занятие, все расслабляются, а потом Юрзинов гонит всех на кросс. Наконец-то серьезно занялись атлетизмом, смогли огрызаться в играх с ЦСКА, иногда и обыгрывали их.

— Самый нелюбимый выезд в чемпионате?

— Новосибирск. 1968-й. Из двенадцати команд образовали пульку из шести команд. С «Сибирью» нам нужно было взять три очка из четырех, а там мороз сорок градусов. Отморозили себе все, что можно, но три очка взяли. Потом ребята из «Сибири» говорили: «Хотели показать Чернышеву, какая погода в стране зимой — чтоб такой календарь больше не утверждали».

«Динамо» со всеми было трудно играть — против нас все выходили с удвоенной энергией. Все знали, что ЦСКА не обыграть, а «Динамо» может позволить себе сыграть не в полную силу и нас можно на этом подловить. За победу над «Динамо» и премиальные обещали больше, чем обычно. Мы были такой командой, что и проиграть могли любому, и обыграть кого угодно. Не было той стабильности, что у ЦСКА, которые топтали всех.

— Какая игра с ЦСКА — самая драматичная?

— Две запомнилось. Однажды повели в первом периоде 4:0, четвертую шайбу я забил, выйдя один на один с Третьяком. Во втором периоде пропустили три шайбы и в третьем бодались до упора, но удержали 4:3. А еще был случай — проигрывали 2:7, Малец завелся и закончили 7:7. Тарасов бегал по лавке и кричал: «Держите Мальцева!» Сашка четыре шайбы тогда забил.

— Ваш самый курьезный гол?

— В игре со «Спартаком» так сильно ударил, что шайбой порвал сетку ворот. Судья отказался засчитывать гол, потому что шайба валялась за воротами. Я ему: «Да вот же дырка в сетке!» Короче, шайбу засчитали, а главному инженеру «Лужников» сделали выговор.

— Что за история у вас произошла с Викуловым, когда он напоил вас перед тренировкой?

— Прилетели утром из Сибири. Часов в двенадцать звонит Володя: «Мы тут в «Саянах» сидим. Подъезжай». — «Да у меня вечером тренировка». — «Да чуть-чуть посидим. Приезжай». Ну, я, дурак, поехал. Потихонечку, потихонечку, потом уже шампанское пошло. На тренировку вышел, но тренер Киселев (Юрзинов отлучился в сборную) быстро меня выгнал. Наказали деньгами, отстранили от игр. Я извинился, меня вернули, но через какое-то время я все равно ушел из хоккея.

— С Викуловым общались в последние годы его жизни?

— Да, я его даже приглашал тренером в школу, когда работал президентом «Динамо», но он отказался. Потом он приболел, и Володина супруга Алла ограничила его контакты с самыми близкими — со мной и даже с его двоюродным братом Володей Собировым. Получалось, что как Викулов пообщается с кем-то из друзей, так ему плохо становится.

— А как вы познакомились с Викуловым?

— С Володей Собировым мы играли за «Серп и Молот» — после одного из матчей году в 1965-м он позвал меня к Викулову. Потом играли с Викуловым в футбол за «Серп и Молот». Новый год часто вместе встречали. Викулов — культурнейший человек, но после карьеры игрока немножко потерялся. Тренировал мальчиков в ЦСКА, не заладилось. Обидно, что так рано ушел. Сейчас прихожу к нему на кладбище цветочки положить — рядом Валера Васильев лежит, Борис Михайлович Зайцев.

— Как вышло, что после хоккея вы занялись розыском госпреступников?

— Председатель ЦС «Динамо» Сысоев познакомил с секретарем парткома КГБ Агеевым. После «Динамо» меня приглашали все московские команды, кроме ЦСКА, звали и в высшую лигу, в Саратов, Воронеж, где платили в два раза больше — я мог продолжить играть. Долго колебался, но мой друг Володя Алешин сказал: «Поиграешь ты в высшей лиге года три — а дальше что? Тебя ж все забудут». А вокруг КГБ из-за книг и кино был ореол таинственности. В общем, решил я идти в комитет. Коллектив там был спортивный, часто играли в футбол, через эти игры я стал в комитете своим и попал в службу внешней разведки. Работал с Крючковым, Примаковым. Шесть раз ездил в Афганистан. А перед этим занимался контрразведывательным сопровождением «Мосфильма».

— Интересно.

— Директором «Мосфильма» был Сизов, бывший милиционер. У нас появилась информация, что актер Видов недоволен Советской властью и может остаться в США, куда он собирался ехать на съемки. Ему не давали выездную визу. Ко мне приехал Сизов: «Почему не отпускаете Видова?» Я объяснил. Сизов продолжал: «Да вечно вы что-то придумываете, перестраховщики!» В итоге он взял и написал письмо, в котором гарантировал, что Видов вернется из США. Я сказал: «Ваше право. Но, по-моему, вы делаете ошибку». Отношения с Сизовым у меня были натянутые — чего скрывать, мы выкапывали из «Мосфильма» весь негатив, а какому руководителю это понравится. Тем не менее Сизов написал гарантийное письмо, вроде как утер нам нос, а Видов уехал в Америку и остался там. Поехал я к Сизову — обычно меня выдерживали в приемной, а тут, как только ему доложили, что приехал Титов, он сам вышел и первым делом спросил: «Вы что, за мной?»

— А вы?

— Сказал: «Да нет, хочу просто согласовать наши мнения. Нам же вместе теперь за это отвечать». Еще я работал с ансамблем Игоря Моисеева. Меня там долго не принимали — знали, что человек комитета, ищет негатив. В итоге мы помогли с выездом одному танцору — на него были не очень серьезные компрометирующие материалы, но мы все уладили и он смог поехать на гастроли. Провели с ансамблем три месяца во Франции. В аэропорту Лиона была задержка, и мы с Моисеевым разговорились: он меня пытал, откуда я, рассказал о себе. С тех пор коллектив стал относиться ко мне гораздо лучше. Ансамбль Моисеева был единственным, где никто не остался за границей. Во всех остальных коллективах были беглецы — бежали из Большого театра, Ленинградского оркестра. Был еще такой оркестр русских народных инструментов, где был только один русский, а остальные — представители других союзных республик. И надо ж такому случиться, что во время гастролей во Франции именно этот единственный русский попросил политического убежища.

— Когда вы в Афганистане впервые оказались?

— В 1988 году, в составе делегации, которую возглавлял Шеварднадзе, министр иностранных дел. Договаривались с полевыми командирами, чтобы прекратить боевые действия на время приезда Шеварднадзе, чтоб, не дай бог, стингерами нас не сбили. Ездили туда один-два раза в год.

Однажды в посольстве в Кабуле попали под обстрел — там «Градом» все смело. Как шарахнуло, хорошо успели под столами спрятаться — все стекла вынесло. С нами работали девчонки-машинистки — они потом отказывались заходить в помещения, где были окна.

Потом поехали на машинах в провинцию Герат. Пришло сообщение: «Вашу делегацию попытаются захватить». Наше руководство не очень-то поверило. Поехали. Нас начали обстреливать. Хорошо с нами танк ехал — смогли отбиться. Руководители делегации Шебаршин и Матросов сели в бронемашину — и по газам, а мы с документами — в покрытый брезентом «газик» — и за ними. Добрались до самолета и полетели в Кабул.

Был случай, когда на взлетной полосе чуть не подорвались. Собрались взлетать, а моджахеды начали наступление, взорвали склад, на взлетной полосе начали рваться снаряды. Летчик говорит: «Мы не взлетим». Кричу ему: «А чего делать-то? Если моджахеды сюда ворвутся — всем хана. Поворачивай в другую сторону». В итоге развернулись и взлетели. Но и дальше была опасность — взлетали между гор и с гор нас могли прошивать и пулеметами, и стингерами (раньше-то на сопках сидели наши солдаты и контролировали территорию, а когда их вывели, моджахеды начали грохать по всем подряд). Когда ввинтились в небо, под нами было столько взрывов — не скрою, страшно было. Вроде война уже закончилась, а тут такое.

Когда мы вывели войска, оказалось, что много солдат осталось в плену — пришлось еще несколько раз ездить. Советской власти нет, Мохаммада Наджибуллы нет, договариваться не с кем. Выходили на полевых командиров — советские солдаты были для них разменной монетой, они хотели на них заработать. Кого-то удалось вызволить, кого-то, к сожалению, нет.

— Август 1991-го — тоже стрессовый для вас эпизод?

— Да уж. Резидентура начала присылать информацию — какая обстановка за рубежом, какие планы у американцев. Мне дали указание в разгар путча доставить эту информацию на Лубянку. Подъезжаю, а там танки — как-то договорились, танк отъехал, я смог проехать, пришлось и оружие доставать, чтоб показать, что дело серьезное. Передал документы на Лубянку.

Потом мне дали указание организовать встречу руководителей ГКЧП. Премьер-министру Павлову стало плохо, ему пришлось медицинскую помощь оказывать. Когда ГКЧП свергли и всех арестовали, мой шеф Шебаршин сказал: «Выполняй указания следователей». Я поехал со следователями в лес в Ясенево, в гнездо службы внешней разведки, вскрыл сейфы Крючкова.

На службе меня обозвали гэкачепистом, поставили в угол, нового звания не давали. Я понял, что перспектив никаких, а Виталий Семенович Давыдов позвал в «Динамо». Поехал сначала на сбор в Финляндию как ветеран хоккея, а потом Давыдов уехал работать в Швейцарию, а на свое место порекомендовал меня. Стеблин спросил: «А что, тебя отпустят оттуда?» — «Это уж мои сложности». Так я вернулся и в «Динамо».

— Быстро освоились в позиции начальника команды?

— Если я нашел общий язык с Моисеевым, Светлановым и Сизовым, то чего ж мне теряться в хоккее? Сложность была только в том, чтобы найти деньги, но нам всегда Шанцев помогал. А в 2002 году Шанцев стал искать нового президента и выбрал меня.

— Появление Овечкина в основе «Динамо» запомнили?

— Татьяна Николаевна спросила: «Можно Сашка в уголке где-нибудь на сборах покатается?» Тренером тогда Билялетдинов был. Я говорю: «Тань, вокруг взрослые мужики — не дай бог, что случится с пацаном». Я думал, что и Билялетдинов будет против, но Саша все-таки вышел в уголок — я его тогда впервые увидел. Он мне сразу юного Мальцева напомнил.

— Вы ожидали, что он подпишет контракт с «Авангардом»?

— Он коренной динамовец и мне было неожиданно, что он решил поехать в Омск, но потом стало понятно — это маркетинговый трюк, чтобы уехать в НХЛ.

— При вас в «Динамо» поехали иностранцы — два шведа в первый сезон, несколько чехов во второй. Как они к вам попали?

— Спонтанно получилось. Мы ориентировались на своих ребят, но в начале нулевых в суперлигу повалили иностранные игроки — в тот же «Авангард». На каком-то совещании Шанцев говорит: «А почему у нас легионеров нет?» Кое-какие наметки у нас уже были, позвали Соутокорву и Линдстрема — они ничего не портили, но это, конечно, было неправильно — нужно было брать реально мощных игроков, которые нас бы ощутимо усилили. Правда, с деньгами было не то чтобы очень хорошо — «Динамо» сохранилось во многом благодаря Шанцеву, он был вице-мэр, у него было много возможностей.

— При вашем президентстве одну игру за «Динамо» провел Александр Радулов.

— Он был хулиганистый парень. Мне звонили из Ярославля: «Что вы такого берете — он вам команду разложит?» Не скрою, у меня тоже были сомнения насчет Саши, когда он не совсем нормально себя вел.

— Как именно?

— Шебутной, задиристый, энергии море, не знал, куда ее девать. Пару раз вызывал Радулова к себе в кабинет, у него был сложный период в жизни, если б мы его не поддержали, мне кажется, он мог заблудиться и не состояться как хоккеист. Он отправился в Тверь, чтобы опыта набраться, начал забивать, на него народ стал ходить. А после того сезона Саша уехал в Квебек.

Одногибридная система дрожжей, совместимая со шлюзом

Abstract

С появлением микроматриц были получены огромные объемы данных по экспрессии генов. Однако эти данные микроматрицы не могут выявить механизмы регуляции транскрипции, которые лежат в основе дифференциальной экспрессии генов, потому что идентичность ответственных факторов транскрипции (TF) часто не может быть напрямую выведена из таких наборов данных. Регуляторные TF активируют или репрессируют транскрипцию своих генов-мишеней путем связывания с цис- -регуляторными элементами, которые часто находятся в промоторе гена.Чтобы понять механизмы, лежащие в основе дифференциальной экспрессии генов, необходимо идентифицировать физические взаимодействия между регуляторными TF и ​​их генами-мишенями. Мы разработали шлюз-совместимую дрожжевую одногибридную (Y1H) систему, которая позволяет быстро и в крупном масштабе идентифицировать взаимодействия белок-ДНК с использованием как небольших (т. Е. Представляющих интерес элементов ДНК), так и больших (т. Е. Промоторов генов) фрагментов ДНК. Мы использовали четыре хорошо охарактеризованных промотора Caenorhabditis elegans в качестве ДНК-приманок для тестирования функциональности этой системы Y1H.Мы смогли обнаружить около 40% ранее описанных взаимодействий TF-промотор. Выполняя скрининг с использованием двух дополнительных библиотек, мы обнаружили новые потенциально взаимодействующие TF для каждого промотора. Мы повторили некоторые из взаимодействий белок-ДНК на основе Y1H, используя анализы репортера люциферазы в клетках млекопитающих. Взятые вместе, Gateway-совместимая система Y1H позволит с высокой пропускной способностью идентифицировать взаимодействия белок-ДНК и может быть ценным инструментом для расшифровки сетей регуляции транскрипции.

Дифференциальная экспрессия генов — главный детерминант развития. Каждый ген демонстрирует определенный временной и пространственный паттерн и уровень экспрессии, и в результате каждая клетка / ткань экспрессирует уникальное подмножество белков. Дифференциальную экспрессию генов можно регулировать на разных этапах, включая синтез белка, а также деградацию белка и мРНК. Однако широко признано, что паттерны экспрессии генов развития преимущественно устанавливаются на уровне регуляции транскрипции (Lee and Young 2000).В частности, дифференциальная экспрессия гена контролируется регуляторными факторами транскрипции (TF), которые связываются с цис--регуляторными элементами ДНК (сайтами связывания), которые часто расположены в промоторе гена или рядом с ним. От 5% до 10% генов многоклеточных животных кодируют предполагаемые TF (Levine and Tjian 2003). При примерно 14 000–30 000 генов, предсказанных в геномах многоклеточных животных (Консорциум по секвенированию C. elegans , 1998; Адамс и др., 2000; Ландер и др., 2001; Вентер и др., 2001), это соответствует сотням или тысячам предсказанных ТФ.

Наличие полных последовательностей генома и развитие функциональных геномных технологий позволяет оценивать вопросы, касающиеся дифференциальной экспрессии генов, в масштабе всего генома. Например, использование микроматриц позволяет профилировать геномную экспрессию в различных экспериментальных условиях (Schena et al. 1995). Последующее использование алгоритмов кластеризации позволяет идентифицировать гены со схожими профилями экспрессии, которые могут быть вовлечены в аналогичные биологические процессы (Eisen et al.1998). После выравнивания промоторных последовательностей таких генов можно обнаружить цис- -регуляторных элементов, которые могут быть ответственны за их коэкспрессию (Tavazoie et al. 1999). Хотя данные микроматрицы информативны для обеспечения «сигнатур» экспрессии генов для тканей и / или организмов в различных экспериментальных условиях, эти данные не могут выявить механизмы регуляции транскрипции, которые контролируют дифференциальную экспрессию генов. Это связано с тем, что не все функциональные элементы могут быть обнаружены выравниванием промоторов.Кроме того, TF, которые связываются с элементами, которые могут быть идентифицированы, возможно, еще не были экспериментально охарактеризованы. Более того, многие TF принадлежат к более крупным семействам TF, члены которых имеют сходные ДНК-связывающие домены и потенциально перекрывающиеся элементы распознавания ДНК. В результате, даже если семейство TF иногда может быть выведено из выровненных промоторных последовательностей, точный член TF, ответственный за коэкспрессию, может оставаться неуловимым. Дополнительным объяснением отсутствия вывода о механизмах транскрипции из данных профилирования экспрессии является то, что невозможно различить прямые и косвенные эффекты транскрипции, которые приводят к различиям в уровнях мРНК.Наконец, уровни мРНК, измеренные с помощью микрочипов, являются не только результатом транскрипции, но также результатом баланса между синтезом и деградацией мРНК. Таким образом, чтобы получить представление о механизмах транскрипции, которые приводят к дифференциальной экспрессии генов, гены должны быть экспериментально «сопоставлены» с TF, которые регулируют их экспрессию. Один из способов сделать это — выявить взаимодействия белок-ДНК между регуляторными ТФ и регуляторными элементами ДНК (например, регуляторными элементами цис- или промоторами генов).

Было разработано несколько биохимических методов для идентификации взаимодействий белок-ДНК, включая сдвиг геля, отпечаток ДНКазы I и анализы иммунопреципитации хроматина (ChIP) (Latchman 1998; Orlando 2000). ChIP-анализы особенно эффективны, поскольку они позволяют идентифицировать взаимодействия белок-ДНК, которые происходят in vivo. Этот подход включает осаждение ДНК-связывающего белка вместе с связанной с ним ДНК и использовался для проверки связывания целевого гена несколькими ТФ (Shang et al.2000; Wells et al. 2002; Конкрайт и др. 2003). Первоначально этот метод использовался для характеристики взаимодействия отдельных ТФ с одним или несколькими их генами-мишенями. Чтобы увеличить производительность анализа и обеспечить беспристрастную идентификацию взаимодействий TF-ДНК по всему геному, эксперименты ChIP недавно были объединены с технологиями микроматриц (Ren et al. 2000; Iyer et al. 2001). Этот комбинированный метод был использован для картирования взаимодействий белок-ДНК для 106 из 141 предсказанных регуляторных ТФ в Saccharomyces cerevisiae (Lee et al.2002). Полученные данные были использованы для моделирования дрожжевых регуляторных сетей транскрипции. Выполнение ChIP-анализов в больших масштабах с использованием интактных модельных организмов многоклеточных животных является сложной задачей. Это связано с тем, что для каждого TF должны быть созданы антитела или, альтернативно, необходимо получить трансгенные штаммы, экспрессирующие TF, меченные эпитопами. И то, и другое отнимает много времени и, следовательно, выполнимо только для одного или нескольких TF. Кроме того, трудно обнаружить взаимодействия с ТФ многоклеточных животных, которые экспрессируются на низких уровнях, в небольшом количестве клеток или в течение узкого временного интервала развития.Кроме того, с ChIP обычно невозможно различить разные изоформы TF. Кроме того, анализ ChIP с помощью микроматриц требует создания всеобъемлющих массивов, содержащих регуляторные геномные последовательности (например, промоторы). Наконец, хотя эксперименты с ChIP ценны для ответа на вопрос «С какими фрагментами ДНК связывается представляющий интерес ТФ?», Они менее подходят для ответа на обратный вопрос: «Какие ТФ связываются с фрагментом ДНК (например, промотором) интерес?»

Одногибридная дрожжевая система (Y1H) является подходящим методом для ответа на второй вопрос, поскольку она позволяет идентифицировать белки, которые могут связываться с интересующими элементами ДНК, включая регулирующие элементы цис , источники репликации ДНК и теломеры (Li, Herskowitz, 1993; Lehming et al.1994; Kim et al. 2003). Система Y1H концептуально аналогична дрожжевой двугибридной системе (Y2H), которая используется для обнаружения белок-белковых взаимодействий (Fields and Song 1989). В системе Y2H используются два гибридных белка. Белок-приманка (X) слит с ДНК-связывающим доменом (DB), а белок жертвы (Y) слит с доменом активации транскрипции (AD). Когда X и Y физически взаимодействуют друг с другом, функциональный TF восстанавливается, и экспрессия репортерного гена активируется. В системе Y1H используется единственный гибридный белок, AD-Y, и экспрессия репортерного гена активируется, когда Y взаимодействует с ДНК-приманкой.Хотя многие предсказанные регуляторные TF содержат внутреннюю AD, некоторые TF имеют репрессорный домен или вообще не содержат активационный / репрессорный домен. Кроме того, ДНК-связывающие белки, которые не участвуют в транскрипции (например, белки репликации и репарации ДНК), не содержат AD. Чтобы сделать возможным идентификацию множества ДНК-связывающих белков, к белку жертвы добавляют сильную гетерологичную AD. До сих пор система Y1H в основном использовалась с множественными копиями коротких элементов ДНК (до 30 п.н.) в качестве приманок для ДНК.Чтобы облегчить высокопроизводительную и беспристрастную идентификацию взаимодействий белок-ДНК, мы разработали систему Y1H, совместимую со шлюзом. Эта система может использоваться как с маленькими (например, цис- -регуляторные элементы), так и с одиночными копиями больших фрагментов ДНК (например, промоторов генов). Это важно, поскольку использование промоторов позволяет обойтись без идентификации функциональных регулирующих элементов цис для интересующего гена.

Система клонирования Gateway облегчает точное и высокоэффективное клонирование множества фрагментов ДНК в различные векторы in vitro, поскольку она основана на рекомбинации и не требует использования рестрикционных ферментов (Hartley et al.2000; Walhout et al. 2000а). Ранее мы разработали систему Y2H, совместимую с системой клонирования Gateway (Walhout and Vidal 2001). Сочетание Gateway с Y2H значительно повысило производительность идентификации и анализа межбелковых взаимодействий. Действительно, с помощью этой системы было идентифицировано уже> 5500 белок-белковых взаимодействий (Walhout et al. 2000a, 2002; Davy et al. 2001; Boulton et al. 2002; Li et al. 2004). Следовательно, ожидается, что одновременное клонирование нескольких ДНК-приманок в векторы Y1H с помощью клонирования шлюза также значительно повысит производительность метода Y1H.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Одногибридная система дрожжей, совместимая со шлюзом

Для проведения анализа Y1H интересующая последовательность ДНК («ДНК-приманка») сначала клонируется перед репортерным геном для создания ДНК-приманки: репортерная конструкция. Здесь мы используем репортерные гены HIS3 и lacZ . Впоследствии DNAbait :: reporter интегрируется в геном дрожжевого штамма Y1H посредством сайт-специфической рекомбинации в мутантный маркерный локус. Поскольку конструкции DNAbait :: reporter содержат маркерный ген дикого типа, колонии дрожжей, содержащие приманку, могут быть эффективно отобраны.Чтобы создать Gateway-совместимую версию системы Y1H, которая совместима с «промотеромом» Caenorhabditis elegans (Dupuy et al. 2004), мы сначала клонировали открытые рамки считывания (ORF), кодирующие репортеры His3 и β-галактозидазу (β -Gal) в донорский вектор (pDONR201;) посредством реакции шлюзового BP. В результате были получены клоны HIS3 и lacZ Entry. Мы включили минимальные промоторы HIS3 и CYC1 в репортерные конструкции HIS3 и lacZ соответственно.Репортерные клоны Entry можно использовать с клонами промотора Entry (Dupuy et al. 2004) в многосайтовых реакциях Gateway LR (Cheo et al. 2004) для создания клонов DNAbait :: reporter Destination (). Общий мультисайтовый целевой вектор (pDEST6; Invitrogen) использовали для создания слитых конструкций DNAbait :: HIS3 . DNAbait :: HIS3 Конструкции были интегрированы в локус his3-200 дрожжевого штамма Y1H. Минимальный промотор HIS3 обеспечивает достаточные уровни экспрессии His3 для отбора на минимальной среде без гистидина (Sc-His).Интеграция конструкции DNAbait :: reporter имеет важное значение для получения воспроизводимых результатов и снижения уровней фоновой экспрессии (Wang and Reed 1993; данные не показаны). Дополнительный вектор, pDESTMW # 1, был создан для многоузлового клонирования ДНК-приманок Gateway вместе с репортером lacZ (). Эта плазмида содержит копию гена URA3 дикого типа, которая облегчает интеграцию конструкций DNAbait :: lacZ в локус ura3-52 штамма дрожжей Y1H и селекцию на минимальной среде без урацила (Sc-Ura ).Каждая использованная ДНК-приманка была слита как с HIS3 , так и с lacZ , и конструкции DNAbait :: reporter были последовательно интегрированы в геном дрожжевого штамма Y1H и сохранены на среде Sc-His, -Ura. Два репортера Y1H используются в одном штамме дрожжевых приманок для ДНК, чтобы снизить уровень ложноположительных результатов (Vidal 1997; см. Ниже).

Создание конструкций DNAbait :: reporter путем клонирования LR на нескольких участках. ( A ) Клонированные шлюзами ORF, кодирующие репортеры Y1H His3 и β-галактозидазу (β-Gal), были клонированы в pDONR201 для создания HIS3 и lacZ Entry клонов.ДНК-приманки были клонированы в pDONR-P4-P1R для создания клонов для входа в ДНК-приманки. ( B ) ДНК-приманки были слиты с HIS3 и lacZ посредством многосайтовой реакции Gateway LR с использованием клонов входа ДНК-приманки, репортерных клонов входа Y1H и векторов назначения Y1H для создания ДНК-приманки: HIS3 и DNAbait :: lacZ Целевые клоны.

Сайты AttB шлюза не влияют на показания Y1H

В системе клонирования шлюза любой фрагмент ДНК, клонированный в вектор-адресат, будет фланкирован сайтами рекомбинации Gateway AttB (Hartley et al.2000; Walhout et al. 2000b). Здесь ДНК-приманки, слитые с HIS3 или lacZ , фланкированы сайтами AttB4 и AttB1 (). Мы проверили, влияют ли сайты рекомбинации Gateway AttB на считывание системы Y1H, например, путем связывания эндогенного дрожжевого TF. Мы сравнили нашу систему с коммерчески доступной системой Clontech Y1H (BD Biosciences). В качестве положительного контроля мы использовали взаимодействие между TF p53 и его консенсусным участком связывания ДНК. Шесть сайтов связывания p53 (p53BS) были слиты с HIS3 и lacZ либо с фланкирующими сайтами рекомбинации шлюза AttB, либо без них ().В качестве добычи мы использовали ДНК-связывающий домен мышиного p53, слитый с Gal4 AD (AD-p53DB). Индукцию экспрессии His3 с помощью AD-p53DB исследовали на средах, содержащих возрастающие концентрации 3-аминотриазола (3AT). 3AT является конкурентным ингибитором фермента His3. Таким образом, в присутствии возрастающих количеств 3AT необходимо экспрессировать больше His3 для обеспечения роста. Мы обнаружили, что для обеих ДНК-приманок (т.е. Gateway по сравнению с «не-Gateway») уровень фоновой экспрессии His3 был низким, и экспрессия His3 была эффективно индуцирована экспрессией AD-p53DB ().Аналогичные результаты были получены с сайтами связывания p53, слитыми с lacZ (данные не показаны; см. Также ниже). Эти данные демонстрируют, что сайты рекомбинации Gateway AttB, фланкирующие ДНК-приманку, не влияют на обнаружение взаимодействий белок-ДНК в контексте системы Y1H.

Система Y1H, совместимая со шлюзом. ( A ) Контрольный анализ Y1H без шлюза. В качестве приманки для ДНК использовали шесть копий мышиного консенсусного сайта связывания p53 (p53BS), слитых с репортерным геном HIS3 , только с Gal4 AD (-) или с AD-p53DB в качестве добычи.( B ) В качестве приманки для ДНК использовали шесть копий мышиного консенсусного сайта связывания p53 (p53BS), слитых в результате многосайтовой реакции шлюза с репортерным геном HIS3 , только с Gal4 AD (-) или с AD-p53DB. . Здесь приманка p53BS фланкирована сайтами рекомбинации AttB4 и AttB1 Gateway. Клетки высевали на среду Sc-His, -Ura с 0, 20 или 40 мМ 3AT, как указано.

Взаимодействия TF-промотора, обнаруженные системой Y1H, совместимой со шлюзом. Штаммы DNAbait :: репортер трансформировали плазмидами Gateway Destination, содержащими либо полноразмерные ORF, кодирующие TF, либо часть этих ORF, которая, как предполагается, кодирует DB, слитую с Gal4 AD.Пустой вектор Gateway, содержащий только Gal4 AD, использовали в качестве отрицательного контроля (-). Полученные трансформанты дрожжей выращивали на средах Sc-His, -Ura, -Trp ( верхний ряд ), Sc-His, -Ura, -Trp, содержащих 40 мМ 3AT ( средний ряд ), или наносили на планшеты YEPD. содержащий нитроцеллюлозный фильтр для анализов β-Gal ( нижний ряд ).

Самоактивация

Чтобы понять регуляторные механизмы, которые контролируют дифференциальную экспрессию генов, TF необходимо «сопоставить» с их генами-мишенями.До сих пор система Y1H в основном использовалась с множеством копий малых элементов в качестве приманок для ДНК, включая цис--регулирующих элементов. Однако элементы ДНК, регулирующие цис , которые отвечают за регулируемую транскрипцию, не были идентифицированы для подавляющего большинства предсказанных генов. Чтобы облегчить сопоставление TF с их предполагаемыми генами-мишенями без предварительного знания регулирующих элементов cis , которые несут эти гены, мы проверили, можно ли использовать промоторы генов с одной копией в качестве приманок для ДНК в системе Y1H, совместимой со шлюзом.Для обнаружения взаимодействий белок-ДНК с помощью анализа Y1H необходимо использовать ДНК-приманки, которые при слиянии с HIS3 обеспечивают низкий уровень роста на средах, содержащих 3AT, а при слиянии с lacZ дают белые колонии. . Одна потенциальная трудность с использованием больших фрагментов промотора в качестве ДНК-приманок заключается в том, что промоторы имеют более сложный базовый состав, чем цис- -регуляторных элементов и, таким образом, могут с большей вероятностью активировать экспрессию репортерного гена в отсутствие белка жертвы AD-Y (e .g. путем связывания эндогенного дрожжевого ТФ). Это фоновое выражение называется самоактивацией. Мы проанализировали уровень самоактивации промоторами четырех генов C. elegans ( P _myo-2 , P _mab-3 , P _fog-3 и P _гл-8 ). Эти гены были выбраны потому, что ранее сообщалось о транс--действующих ТФ, регулирующих их экспрессию (). ORF, кодирующие эти TF, доступны как входные клоны в ORFeome (Reboul et al.2003) и были перенесены реакцией клонирования Gateway LR в вектор AD-Destination, pDEST _AD . Этот вектор обычно используется для скрининга Y2H (Walhout et al. 2000a), а также совместим с анализами Y1H.

Таблица 1.

Протестированные взаимодействия ТФ-промотора

Сайты начала транскрипции не были картированы для большинства генов C. elegans . Однако 5′-нетранслируемые области обычно короткие.Таким образом, мы определяем «промоторы» как межгенные последовательности выше предсказанного начала каждой ORF с максимальной длиной 2,5 т.п.н. Это должно включать проксимальный промотор, который, вероятно, имеет самую высокую плотность цис- -регуляторных элементов. Четыре промотора были клонированы Gateway в рамках проекта клонирования промотеромов (Dupuy et al. 2004). Каждую ДНК-приманку сливали с репортерными генами HIS3 и lacZ с помощью многосайтовой реакции Gateway LR (; Cheo et al. 2004).Успешное клонирование конструкций DNAbait :: reporter проверяли с помощью ПЦР (данные не показаны), после чего конструкции использовали для создания штаммов-приманок дрожжевой ДНК. Для каждого штамма ДНК-приманки 24 независимых дрожжевых колонии исследовали на самоактивацию с помощью анализа β-Gal и роста на среде Sc-His, -Ura, содержащей возрастающие концентрации 3AT. Самоактивацию четырьмя промоторами сравнивали с самоактивацией p53BS (; P _fog-3 и P _hlh-8 показаны в качестве примеров).Как и в случае с белковыми приманками в системе Y2H (Walhout and Vidal 2001), наблюдалась различная степень самоактивации для отдельных ДНК-приманок и между разными ДНК-приманками. Различия в самоактивации для отдельных ДНК-приманок вызваны различиями в количестве событий интеграции каждой конструкции промотор :: репортер, поскольку наблюдаемый уровень самоактивации выше, когда объединены несколько копий, по сравнению с одним событием интеграции (данные не показаны). Интересно, что отдельные колонии, содержащие p53BS :: репортер, также демонстрируют различные уровни самоактивации на 3AT-содержащих селективных средах ().Это указывает на то, что самоактивация не ограничивается крупными промоторными приманками.

Самоактивация промоторами C. elegans . ( A ) Плазмиды Y1H Destination, содержащие клонированные Gateway промоторы P _fog-3 или P _hlh-8 , были интегрированы в геном дрожжей YM4271. Двадцать четыре колонии двойных интегрантов были отобраны и нанесены либо на (1) среду Sc-His, -Ura плюс увеличивающиеся количества 3AT для определения самоактивации репортера HIS3 , либо на (2) планшеты YEPD, содержащие нитроцеллюлозный фильтр. для анализа β-Gal.Кружками обозначены колонии, которые были отобраны для последующих экспериментов с Y1H. ( B ) Чтобы определить, проявляют ли отдельные колонии фенотипические вариации после клональной экспансии, три колонии P _fog-3 , различающиеся по степени самоактивации (низкая = 1, средняя = 2 и высокая = 3) , были собраны и повторно внесены в среду Sc-His, -Ura, после чего их реплики высевали на селективную 20 мМ 3AT-содержащую среду.

Мы выбрали колонии с минимальными уровнями самоактивации с обоими репортерами для P _mab-3 и P _fog-3 и с низкой самоактивацией HIS3 для P _hlh-8 ().Поскольку все колонии, содержащие P _myo-2 , проявляли высокие уровни самоактивации с обоими репортерами (данные не показаны), для последующих экспериментов с Y1H случайным образом выбирали одну колонию. Затем мы определили, являются ли фенотипы самоактивации колоний стабильными, то есть проявляют ли они фенотипические вариации после нескольких клональных экспансий. Три P _fog-3 :: репортер-содержащие колонии, которые различаются по степени самоактивации HIS3 (низкая, умеренная и высокая;), были отобраны, пересеяны и репликированы на селективные 3AT-содержащие СМИ.Фенотипические вариации в размножающихся колониях не наблюдались, что указывает на то, что дрожжевые штаммы, содержащие DNAbait :: репортер, которые не проявляют самоактивации, относительно стабильны (). Наконец, мы проверили, может ли пропуск минимального промотора, управляющего экспрессией HIS3 , снизить степень самоактивации. Мы обнаружили, что дрожжевые клетки, трансформированные конструкцией DNAbait :: HIS3 без минимального промотора HIS3 , не могли расти на среде Sc-His (данные не показаны).Это указывает на то, что промоторы C. elegans не могут управлять базовыми уровнями экспрессии генов у дрожжей. Мы предполагаем, что это происходит из-за различных архитектурных требований к промоторам многоклеточных и дрожжевых организмов, таких как различия в требованиях расстояния между сайтом начала транскрипции и другими элементами базального промотора (например, блоком TATA). Взятые вместе, хотя некоторые промоторные приманки могут самоактивировать экспрессию репортерного гена, колония дрожжей, которая демонстрирует минимальные уровни самоактивации, обычно может быть выбрана для последующего использования в анализах Y1H.

Взаимодействия TF-промотора на основе Y1H

Описано лишь небольшое количество из взаимодействий TF-промотора C. elegans . Мы проверили, можно ли обнаружить некоторые из них с помощью системы Y1H, совместимой со шлюзом. Штаммы DNAbait :: reporter были созданы для каждого промотора и трансформированы соответствующими целевыми клонами, кодирующими AD-TF. Впоследствии взаимодействия белок-ДНК исследовали на чашках Sc-His, -Ura, -Trp + 3AT и с помощью анализов β-Gal. Для трех из четырех промоторов мы смогли подтвердить ранее описанные взаимодействия (см. Также ниже).Мы обнаружили связывание TRA-1 как с P _mab-3 , так и с P _fog-3 , но индукция роста на селективных средах 3AT, а также экспрессия β-Gal были умеренными по сравнению с положительный контроль (связывание p53DB с p53BS;). Одним из объяснений этого различия является тот факт, что количество консенсусных сайтов связывания для TRA-1 в пределах P _mab-3 и P _fog-3 относительно невелико (три и один, соответственно, vs.шесть консенсусных сайтов p53 в контроле p53BS). Другие возможности включают необходимость димеризации TRA-1 с конкретным партнером для прочного связывания ДНК или вмешательство домена белка TRA-1 в активацию транскрипции. Поскольку TRA-1 функционирует как репрессор транскрипции in vivo, он, вероятно, содержит репрессорный домен (Chen and Ellis 2000). Поэтому мы проверили, улучшает ли удаление последовательностей вне базы данных TRA-1 считывание Y1H. Кодирующая DB часть tra-1 была клонирована и слита с Gal4 AD с использованием клонирования Gateway BP и LR и преобразована в P _mab-3 — и P _fog-3 -содержащие штаммы дрожжей .Как показано на фиг. P _mab-3 или P _fog-3 штаммы-приманки, экспрессирующие AD-TRA-1DB, лучше растут на селективных средах, чем штаммы, экспрессирующие полноразмерный AD-TRA-1. Повышенная индукция экспрессии β-Gal с помощью AD-TRA-1DB подтверждает эти наблюдения (2). Эти данные предполагают, что регуляторный белковый домен TRA-1 может препятствовать активации репортера AD.

Графическое изображение обнаруженных взаимодействий белок-промотор. Белки зеленого цвета были обнаружены с помощью целевых экспериментов с Y1H, белки красного цвета были идентифицированы с помощью скрининга библиотеки AD-кДНК, а белки синего цвета — с помощью миниатюрного скрининга AD-TF.Семейство TF указано в скобках под соответствующим именем ORF. Homeo = гомеодомен, Myb = Myb-подобное связывание ДНК, ZF = цинковый палец, NHR = цинковый палец типа рецептора ядерного гормона, RPEL = повтор RPEL.

LIN-39 и MAB-5, как ранее было показано, связывают P _hlh-8 in vivo; однако существует неясность, связываются ли эти TFs по отдельности или они нуждаются в ассоциации с кофактором CEH-20 (Liu and Fire 2000). Наш анализ Y1H показывает, что LIN-39 способен связывать P _hlh-8 без присутствия CEH-20 ().Однако мы не смогли обнаружить взаимодействие между P _hlh-8 и MAB-5 (данные не показаны). Поскольку TRA-1DB обеспечивает более сильное считывание Y1H, чем полноразмерный TRA-1, мы исследовали, проявляет ли LIN-39 также более сильное связывание со своей мишенью, когда только его DB была слита с Gal4 AD. Интересно, что взаимодействие LIN-39- P _hlh-8 больше не обнаруживалось с LIN-39 DB (). Этому наблюдению есть несколько объяснений. Во-первых, удаление белковых последовательностей за пределами LIN-39 DB могло помешать правильной укладке усеченного слитого белка, что привело к неспособности слитого белка связывать ДНК.Во-вторых, последовательности вне DB могут быть необходимы для LIN-39 для гомодимеризации или связывания с эндогенным партнером по димеризации дрожжей, что может быть важным для адекватного связывания ДНК.

P _myo-2 демонстрирует высокие уровни самоактивации в контексте системы Y1H, то есть P _myo-2 вызывает достаточную экспрессию His3 для обеспечения роста Sc-His, -Ura среды, содержащие до 80 мМ 3АТ (данные не показаны). Следовательно, известные взаимодействия белок-ДНК с участием P _myo-2 было трудно обнаружить.Однако мы смогли идентифицировать новые потенциальные взаимодействия с этим промотором, используя подход скрининга Y1H (см. Ниже).

Идентификация новых взаимодействий белок-промотор

Чтобы проверить, можем ли мы идентифицировать взаимодействия белок-ДНК с помощью метода скрининга, мы выполнили скрининг Y1H с четырьмя промоторными приманками C. elegans и двумя библиотеками добычи: библиотекой AD-кДНК. и мини-весы AD-TF (см. ниже). Библиотека AD-кДНК уже использовалась для создания нескольких карт белок-белковых взаимодействий с системой Y2H, совместимой со шлюзом (Walhout et al.2000a; Дэви и др. 2001; Boulton et al. 2002; Ли и др. 2004 г.). Реакции трансформации дрожжей проводили, как описано (Walhout and Vidal, 2001), и высевали на среды Sc-His, -Ura, -Trp, содержащие 3AT. Количество используемого 3AT варьировалось в зависимости от уровня самоактивации, проявляемой каждой приманкой для ДНК. После инкубации в течение 7 дней при 30 ° C собирали колонии. Впоследствии рост на среде, содержащей 3AT, был повторно протестирован, и, кроме того, была проверена экспрессия β-Gal. ORF, кодирующие интеракторы, присутствующие в колониях, положительных для обоих репортеров, были амплифицированы k; 1 из дрожжей с помощью ПЦР и секвенированы, как описано (Walhout and Vidal 2001).Было идентифицировано несколько предполагаемых взаимодействий белок-промотор, которые кратко описаны ниже. Используя P _mab-3 в качестве приманки, мы обнаружили единственный предполагаемый интерактор DPY-22. Этот белок гомологичен человеческому медиатору транскрипции TRAP230 и содержит предсказанный домен связывания нуклеиновой кислоты (Harris et al. 2003). DPY-22 ингибирует WNT-зависимое образование лучей в хвосте самцов C. elegans , и его экспрессия частично перекрывается с экспрессией MAB-3 (Zhang and Emmons 2000).MAB-3 представляет собой TF, который способствует дифференцировке лучей (Shen and Hodgkin 1988), что предполагает, что взаимодействие между P _mab-3 и DPY-22 может иметь значение in vivo.

Репортерные штаммы, содержащие P _myo-2 и P _hlh-8 , демонстрируют высокие уровни фоновой экспрессии β-Gal (данные не показаны). Таким образом, активация lacZ не может использоваться в качестве вторичного анализа с этими промоторами. Однако мы повторно протестировали 3AT-положительные взаимодействия обоих промоторов с помощью ПЦР / восстановления разрывов (; Walhout and Vidal 2001; данные не показаны).Семь из 67 P _myo-2 положительных результатов были протестированы повторно, четыре из которых являются потенциально биологически значимыми (т.е. они содержат предсказанную БД или были обнаружены несколько раз; см. Ниже). Один потенциальный интерактор P _myo-2 , F26H9.2, содержит предсказанный ДНК-связывающий домен RPEL (Bateman et al. 2004). Все три других положительных результата принадлежат семейству из трех генов, которые кодируют белки с обширной гомологией: H02I12.5, Y62E10A.14 и Y17G9B.9. Два срабатывания соответствуют H02I12.5 и один — Y62E10A.14. Для этих белков нет функциональной аннотации. Интересно, что H02I12.5 самоактивируется как DB-приманка в контексте системы Y2H, это указывает на то, что H02I12.5 может участвовать в регуляции транскрипции (Walhout et al. 2002). Интересно, что H02I12.5 также был идентифицирован как взаимодействующий с P _hlh-8 (). hlh-8 кодирует TF, содержащий домен спираль-петля-спираль, который участвует в развитии мышц (Corsi et al. 2000), а MYO-2 представляет собой изоформу тяжелой цепи миозина, экспрессируемую в мышцах глотки (Jantsch-Plunger и Огонь 1994 г.).Это означает, что H02I12.5 также может функционировать в развитии мышц. Чтобы проверить специфичность взаимодействий H02I12.5 с обоими промоторами, мы трансформировали плазмиду AD-H02I12.5 в другие штаммы DNAbait :: reporter и исследовали фенотипы взаимодействия Y1H. Связывание H02I12.5 с P _fog-3 , P _mab-3 или p53BS не может быть обнаружено, что указывает на взаимодействие этого белка с P _myo-2 и P _hlh-8 относительно специфичны (данные не показаны).Другой предполагаемый идентифицированный интерактор P _hlh-8 представляет собой гомеодомен-содержащий TF PHP-3. Поскольку php-3 и hlh-8 демонстрируют схожие профили экспрессии в 553 экспериментах с микрочипами (Kim et al. 2001), взаимодействие между PHP-3 и P _hlh-8 может иметь значение in vivo. Таким образом, используя библиотеку AD-кДНК, мы смогли идентифицировать новые потенциальные взаимодействия белок-ДНК с тремя из четырех промоторных приманок. Важно отметить, что два из четырех промоторов демонстрируют относительно высокие уровни самоактивации, но тем не менее могут быть использованы для идентификации предполагаемых белковых партнеров.

Примеры ретестов P _hlh-8 и P _fog-3 положительных результатов. ( A ) P _hlh-8 повторно. ( B ) P _fog-3 retest. Двойные интегрирующие дрожжевые клетки трансформировали пустым вектором (содержащим Gal4 AD) и продуктами ПЦР, содержащими последовательности, которые кодируют потенциальных партнеров по взаимодействию, как описано ранее (Walhout and Vidal 2001). Трансформанты выращивали на чашках Sc-His, Ura, -Trp с 40 мМ 3AT или наносили на чашки YEPD, содержащие нитроцеллюлозный фильтр, для анализов β-Gal.Контроли: 1 = отсутствие ДНК, 2 = круговой (неразрезанный) пустой вектор AD, 3 = линейный (разрезанный) вектор AD.

При случайном поиске с использованием ~ 50 TF мы обнаружили, что большинство генов, кодирующих TF, покрываются относительно небольшим количеством EST (т.е. <5). Поскольку библиотека AD-кДНК не нормализована, многие колонии должны быть подвергнуты скринингу для выявления таких недостаточно представленных TF. Ранее мы создали мини-весовую схему AD-ORF для идентификации белок-белковых взаимодействий с белками, кодируемыми генами, обогащенными зародышевой линией (Walhout et al.2002). Для увеличения вероятности извлечения TF, которые присутствуют в низких пропорциях в библиотеке AD-cDNA, мы создали мини-вес C. elegans AD-TF. Входные клоны, содержащие предсказанные ORF, кодирующие TF (B. Deplancke и A.J.M. Walhout, в стадии подготовки), были получены из ORFeome (Reboul et al. 2003). Кодирующие TF ORF были слиты с Gal4 AD посредством высокопроизводительной реакции шлюза LR. Миниатюрный AD-TF содержит ~ 65% всех предсказанных полноразмерных ORF, кодирующих TF, в правильной ориентации и рамке и примерно в эквимолярных количествах.Поскольку эта мини-шкала имеет значительно меньшую сложность по сравнению с библиотекой AD-кДНК, необходимо подвергать скринингу меньшее количество колоний. Мы скринировали каждую промоторную приманку по сравнению с миниатюрным AD-TF, и каждый двойной положительный результат был повторно протестирован с помощью ПЦР / восстановления пробелов (;). Интересно, что хотя для P _fog-3 с библиотекой AD-кДНК не было обнаружено положительных результатов, с помощью мини-весовой системы AD-TF () было обнаружено пять двойных положительных результатов. Первый интерактор P _fog-3 , B0261.1, представляет собой новый белок с предсказанным Myb-подобным ДНК-связывающим доменом.Второй интерактор, ODR-7, является обонятельным членом суперсемейства ядерных гормональных рецепторов (Sengupta et al. 1994). Остальные интеракторы соответствуют CEH-17, гомеодомен-содержащему TF, который участвует в развитии аксонов (Pujol et al. 2000). Скрининг Y1H с миниатюрным AD-TF выявил два дополнительных предполагаемых P _myo-2 взаимодействующих. F22D6.2 представляет собой белок, содержащий цинковые пальцы, с неназначенной функцией или анатомическим паттерном экспрессии. NHR-123 — новый рецептор ядерного гормона, который не изучался в C.elegans . Однако NHR-123 проявляет значительную гомологию с рецептором витамина D3 человека (VDR). Интересно, что VDR регулирует экспрессию нескольких генов, участвующих в развитии мышц, включая гены тяжелых цепей миозина (Endo et al. 2003). Поскольку myo-2 кодирует тяжелую цепь миозина, взаимодействие NHR-123- P _myo-2 может составлять «интеролог», то есть эволюционно законсервированное взаимодействие (Walhout et al. 2000a). Полезность мини-весов AD-TF иллюстрируется наблюдением, что не было идентифицировано EST для ceh-17 , четырех для nhr-123 и двух для odr-7 .Идентификация неперекрывающихся интеракторов () указывает на то, что обе библиотеки следует использовать в будущих экранах Y1H.

Таблица 2.

Ложноотрицательные и ложные срабатывания

Как и в любой другой системе, наш подход не идентифицирует все возможные взаимодействия (т. е. ложноотрицательные). Мы можем обнаружить три из семи описанных взаимодействий белок-ДНК с однокопийными промоторными приманками (~ 40%).Хотя набор образцов невелик, это говорит о том, что частота ложноотрицательных результатов (т.е. пропущенных взаимодействий белок-ДНК) аналогична таковой в системе Y2H, совместимой со шлюзом (Walhout et al. 2000a). Есть несколько объяснений пропущенных взаимодействий белок-ДНК. Во-первых, будут упущены ORF для AD-TF, которые недостаточно представлены или отсутствуют в библиотеке AD-cDNA. Во-вторых, мини-вес AD-TF не подходит для идентификации ДНК-связывающих белков, которые могут обеспечивать только положительное считывание Y1H в усеченной форме.В-третьих, мини-вес AD-TF состоит из ~ 65% всех предсказанных TF червей. Таким образом, оставшиеся 35% ТФ будут упущены. Недавно более 2000 ORF из C. elegans были клонированы Gateway и добавлены в ресурс ORFeome (Lamesch et al. 2004). В будущем должна появиться возможность извлекать предполагаемые ORF, кодирующие TF, из этого набора и включать их в мини-список AD-TF. В-четвертых, элементы, которые расположены на 5′-конце промоторов, могут быть упущены, потому что дрожжевой транскрипционный аппарат не может опосредовать дальнодействующие взаимодействия.Наконец, будут упущены TF, которые требуют гетеродимеризации или посттрансляционных модификаций для связывания их ДНК. Однако важно отметить, что в дополнение к обнаружению известных взаимодействий мы могли обнаруживать TF из разных семейств TF, что указывает на то, что система Y1H, совместимая со шлюзом, может использоваться для идентификации различных классов взаимодействий белок-ДНК ().

Помимо отсутствующих взаимодействий, мы также можем идентифицировать нерелевантные белки (т. Е. Ложные срабатывания). Мы стремимся ограничить количество ложноположительных результатов, рассматривая только клоны, получившие положительную оценку в обоих репортерных анализах, и / или путем повторного тестирования взаимодействий с использованием восстановления разрыва (; Walhout and Vidal 2001).Хотя сложно оценить остаточный уровень ложных срабатываний, относительно просто различить взаимодействующие с высокой вероятностью релевантности в системе Y1H по сравнению с белок-белковыми взаимодействиями Y2H. Это связано с тем, что нас особенно интересуют предполагаемые регуляторные ТФ и другие предсказанные ДНК-связывающие белки. Поэтому для каждой жертвы, полученной с помощью библиотеки AD-кДНК, мы проверяли, содержит ли она предсказанный ДНК-связывающий домен, используя Pfam (Bateman et al.2004) и Interpro (Mulder et al. 2003). Поскольку не все БД могли быть правильно предсказаны, клоны, которые были обнаружены несколько раз и были положительными с обоими репортерами (если возможно), также считались потенциально релевантными. Все взаимодействия, изображенные в, соответствуют этим критериям.

Проверка взаимодействий Y1H

Для проверки взаимодействий белок-ДНК на основе Y1H мы выполнили временные котрансфекции и анализы репортера люциферазы в клетках 3T3 мыши. Мы сосредоточились на взаимодействиях, обнаруженных с P _fog-3 , поскольку все соответствующие ORF, кодирующие TF, доступны как входные клоны в C.elegans ORFeome (Reboul et al. 2003). P _fog-3 был клонирован в совместимый со шлюзом репортерный вектор люциферазы, который содержит минимальный промотор SV40 (любезный подарок от Glenn Maston, Медицинская школа UMass). ORF, кодирующие предполагаемые взаимодействия P _fog-3 , были субклонированы в вектор, содержащий N-концевой GST-тег, который обеспечивает экспрессию белка на высоком уровне в клетках млекопитающих. Каждую трансфекцию проводили трижды и независимо повторяли три раза.Результаты репрезентативного эксперимента показаны на. И ODR-7, и CEH-17 значительно индуцировали экспрессию люциферазы по сравнению с отрицательными контролями, подтверждая, что эти TF могут связываться с P _fog-3 . Для B0261.1, TRA-1 и TRA-1DB значительной индукции не наблюдалось. Отсутствие индукции с помощью TRA-1 может быть связано с тем, что TRA-1 функционирует как репрессор у C. elegans (Chen and Ellis 2000). Важно отметить, что для этого анализа к TF не добавляли гетерологичный домен активации транскрипции.Таким образом, полученные данные позволяют предположить, что как ODR-7, так и CEH-17 могут действовать как активаторы транскрипции in vivo.

Подтверждение взаимодействий белок-ДНК на основе Y1H. Показаны результаты репрезентативного эксперимента, подтверждающего взаимодействия Y1H TF- P _fog-3 с помощью временных трансфекций и люциферазных анализов. Отрицательные контроли включают пустой вектор, содержащий GST-тег, и GST- php-3 . Значения представляют собой средние значения ± стандартная ошибка среднего для трех повторов. ( ^* ) P <0.05 по сравнению с отрицательными контролями.

Таким образом, мы разработали систему Y1H, совместимую со шлюзом, которая позволяет идентифицировать взаимодействия белок-ДНК с использованием не только множественных копий малых (т. Е. Повторов интересующих элементов ДНК), но и одиночных копий больших (т. Е. промоторы генов) фрагменты ДНК. Система совместима с новым ресурсом промотерома C. elegans (Dupuy et al. 2004) и допускает настройку высокой пропускной способности. Система Y1H, совместимая со шлюзом, может быть ценным инструментом для анализа сетей регуляции транскрипции в C.elegans и, возможно, других многоклеточных организмов.

МЕТОДЫ

Клонирование и получение вектора

ORF, кодирующие репортеры Y1H His3 и β-галактозидазу (β-Gal), получали с помощью ПЦР с использованием векторов pHISi-1 и pLacZi (BD Biosciences) в качестве ДНК-матрицы соответственно. Праймеры pHISiFW: 5′-GAATTCCCGGGGAGCTCA-3 ‘и pHISiRV: 5′-CTCGGGGACACCAAATATGG-3’ были использованы для амплификации ORF HIS3 и pLacZiFW: 5′-AAGCTTGATGATTCGAG: 5′-AAGCTTGATGATTCGAG -3 ′ для усиления ORF lacZ .Для облегчения клонирования ORF в Gateway BP в вектор входа pDONR201, хвосты AttB1 и AttB2 добавляли к 5′-концу праймеров FW и RV, соответственно. Продукты ПЦР B1- HIS3 -B2 и B1- lacZ -B2 клонировали в pDONR201, как описано (Walhout et al. 2000b; Reboul et al. 2001). Индивидуальные клоны входа L1- HIS3 -L2 секвенировали с использованием праймеров pDONR201 FW и RV для извлечения клона входа HIS3 дикого типа. lacZ ORF слишком велик (3.3 kb) для секвенирования за один проход. Следовательно, клон lacZ Entry был выбран на основе его функциональности в эксперименте с положительным контролем Y1H (см. Ниже). Репортерные клоны с входом могут быть использованы в реакции LR с несколькими участками (Cheo et al. 2004) вместе с клонами с входом L4-DNAbait-R1 и векторами-адресатами, содержащими кассету R4- ccdB -R2, для создания B4-DNAbait-B1-репортер- B2 Y1H Целевые клоны. L4-DNAbait-R1 Входные клоны были созданы путем проведения реакции ПЦР со специфическими праймерами для каждой ДНК-мишени, то есть P _fog-3 , P _mab-3 , P _myo-2 и P _hlh-8 и геномная C.elegans в качестве матрицы (Dupuy et al. 2004). Впоследствии полученные продукты ПЦР клонировали в вектор входа pDONR-P4-P1R, как описано (Dupuy et al. 2004). Для создания клона L4-DNAbait-R1 Entry, содержащего консенсусный сайт связывания мышиного p53 (p53BS), были сконструированы праймеры FW и RV, содержащие шесть повторов консенсусного сайта связывания p53 с хвостами AttB4 и AttB1R, соответственно. Эти праймеры были отожжены, и 5′-концы двухцепочечного продукта были заполнены реакцией ПЦР.Полученные продукты ПЦР клонировали в pDONR-P4-P1R с помощью реакции Gateway BP.

Два разных вектора-адресата были использованы для создания слитых ДНК-приманка: репортер. Сначала для создания слитых конструкций DNAbait :: HIS3 использовали общий целевой вектор R4- ccdB -R2, содержащий кассету (pDEST6; Invitrogen). DNAbait :: Конструкции HIS3 были проверены с помощью ПЦР с использованием праймеров M13 FW и RV. Мы создали новый целевой вектор Y1H, pDEST-MW # 1, для многосайтового LR-клонирования ДНК-приманок вместе с репортером lacZ путем клонирования кассеты R4- ccdB -R2 в сайты HindIII и AfeI URA3 . -генсодержащая плазмида pLacZi, тем самым разрушая эндогенный ген lacZ (BD Biosciences).Ген URA3 используется в качестве маркера для выбора интеграции конструкций bait :: lacZ . Целостность конструкций DNAbait :: lacZ была подтверждена с помощью ПЦР с использованием праймеров FW (5′-GTTCGGAGATTACCGAATCAA-3 ‘) и RV (5′-GCCCGGATAAACGGAACTGGAA-3’) pDEST-MW # 1 на 100 п.н. 100 п.н. ниже по потоку от кассеты R4- ccdB -R2, соответственно. Поскольку ORF lacZ имеет длину 3,3 т.п.н., ампликоны DNAbait :: lacZ часто имеют размер более 4 т.п.н., что снижает общую эффективность ПЦР.Поэтому был разработан новый праймер RV (5′-ATGCGCTCAGGTCAAATTCAGA-3 ‘), который отжигает 592 п.н. ниже по ходу транскрипции от β-Gal ATG.

Входные клоны, содержащие ORF, кодирующие TF, которые, как сообщалось, связывают P _fog-3 , P _mab-3 , P _myo-2 или P _hlh-8 были извлечены из ORFeome (Reboul et al. 2003) и использованы вместе с pDEST _AD для слияния ORF с Gal4 AD посредством обычной реакции Gateway LR, как описано (Walhout and Vidal 2001).Для определения успеха клонирования LR была проведена реакция ПЦР с целевыми клонами AD-TF в качестве матрицы и с праймерами AD и TERM (Walhout and Vidal 2001). Для создания положительного контроля Y1H, совместимого со шлюзом, последовательность, кодирующая DB фактора транскрипции p53 мыши (p53DB), была получена с помощью ПЦР с использованием pGAD53m (BD Biosciences) в качестве ДНК-матрицы и с AttB1-хвостовым Mp53BDFW 5′-TCCCTGTCACCGAGAC CCCTG- 3 ‘и AttB2-хвостовые праймеры Mp53BDRV: 5′-TCAGTCTGAGT CAGGCCCCA-3’. Затем продукт ПЦР клонировали с помощью реакции Gateway BP в pDONR201.Полученный в результате клон входа p53DB использовали в реакции Gateway LR вместе с pDEST _AD для генерации pAD-p53DB.

ДНК-связывающие домены соответствующих TF были предсказаны с использованием Pfam (Bateman et al. 2004). Соответствующие последовательности ДНК были получены с помощью ПЦР с использованием праймеров FW 5′-TTACGAATCAAACAGCACCAAA-3 ‘с хвостом B1: 5′-CGATCCCGATCCACCGAATCCTCCA-3’ для tra-1 и FW 5′- CACGCGGCGAGAAGCGACAACGA-3 ‘и B2-хвостовые праймеры RV 5′-AGAATTGATTGAAAAGTGGGAACCGGA-3’ для lin-39 , после чего продукты ПЦР были клонированы Gateway BP в pDONR201.Полученные векторы Entry использовали в реакции клонирования Gateway LR вместе с pDEST _AD для слияния DB с Gal4 AD, как описано.

Генерация мини-весов AD-TF

Для создания мини-весов AD-TF мы сначала определили, какие из ~ 1000 предсказанных ORF, кодирующих TF (B. Deplancke и AJM Walhout, в стадии подготовки), доступны в ORFeome с использованием база данных Worfdb (Vaglio et al. 2003). Всего 675 TF-ORF-содержащих клонов Entry трансформировали в бактерии DH5α и очищали автоматическим способом с использованием Biorobot 8000 (QIAGEN).Впоследствии все TF-ORF были субклонированы путем клонирования LR шлюза с высокой пропускной способностью в pDEST _AD для создания слияния AD-TF. Эти слияния можно использовать как в экспериментах с Y1H, так и с Y2H. Целевые клоны анализировали с помощью ПЦР, чтобы проверить, содержат ли они вставку ожидаемого размера (данные не показаны). Минимальное равновесие AD-TF получали путем смешивания исходных растворов глицерина AD-TF в равных количествах и очистки смешанной плазмидной ДНК из объединенных клонов с использованием очистки плазмиды на основе CsCl ₂ .

Манипуляции с дрожжами

Штамм Y1H YM4271 был получен от BD Biosciences. Для интеграции репортерных векторов в геном YM4271 конструкции DNAbait :: reporter были линеаризованы. DNAbait :: HIS3 Конструкции были разрезаны с использованием AflII или XhoI. Впоследствии слияния DNAbait :: HIS3 были интегрированы в локус his3-200 , и интегранты были отобраны на среде Sc-His. Для создания двойных дрожжевых интегрантов конструкции DNAbait :: lacZ были линеаризованы с помощью NcoI или ApaI и интегрированы в локус ura3-52 штаммов, содержащих DNAbait :: HIS3 .Двойные интегранты отбирали на средах Sc-His, -Ura. Для каждого переваривания и последующей трансформации использовали ~ 300 нг репортерной плазмиды. Протокол высокопроизводительной трансформации выполняли, как описано в Walhout и Vidal (2001), за исключением того, что клетки выращивали до тех пор, пока они не достигли OD ₆₀₀ 0,7 вместо 0,6, и что время теплового шока при 42 ° C было продлен до 20 мин. Планшеты инкубировали 2-3 дня при 30 ° C. Каждая интеграция репортера давала от 20 до 200 колоний.Интеграцию подтверждали с помощью ПЦР на геномной ДНК дрожжей с использованием праймеров, специфичных для pDEST (данные не показаны).

Для каждой ДНК-приманки были отобраны 24 колонии с двойным интегратором и нанесены (1) на среду Sc-His, -Ura с возрастающими концентрациями 3AT (0, 20, 40, 60 и 80 мМ) для тестирования на HIS3 самоактивация репортера и (2) на планшетах YEPD, содержащих нитроцеллюлозный фильтр, для анализа самоактивации репортера lacZ с использованием анализа β-Gal. Для каждой ДНК-приманки была выбрана колония, которая проявляла минимальную самоактивацию с обоими репортерами для использования в последующих экспериментах с Y1H.Скрининг Y1H проводили с использованием самой низкой зависящей от приманки концентрации 3AT, от которой HIS3 самоактивация репортера подавлялась в достаточной степени и варьировалась от 40 до 100 мМ 3AT.

Для индивидуальных трансформаций AD-TF 100 нг ДНК целевого клона AD-TF трансформировали в соответствующий штамм DNAbait :: репортер. Трансформанты были обнаружены на носителе Sc-His, -Ura, -Trp для создания мастер-планшета. После инкубации в течение 2 дней при 30 ° C колонии реплицировали, как описано (Vidal 1997), на чашки Sc-His, -Ura, -Trp с возрастающими концентрациями 3AT (20-100 мМ) и на YEPD для β-Gal. анализы.Планшеты контролировали ежедневно и инкубировали в течение 7-8 дней.

Для скрининга приманок по сравнению с библиотекой AD-кДНК червя (Walhout et al. 2000b) на каждую приманку использовали 25 мкг библиотеки ДНК. Реакции трансформации высевали непосредственно на среду Sc-His, -Ura, -Trp с соответствующей концентрацией 3AT (см. Выше). Для каждого скрининга 100- и 1000-кратное разведение наносили на Sc-His, -Ura, -Trp для оценки эффективности трансформации. Потенциальные положительные результаты отбирали через 6-8 дней инкубации при 30 ° C, наносили как на мастер-планшет Sc-His, -Ura, -Trp, так и на планшет Sc-His, -Ura, -Trp + 3AT для повторного анализа потенциальных положительные.Последний планшет инкубировали в течение 4-5 дней при 30 ° C, тогда как мастер-планшет через 2 дня реплицировали на планшет YEPD, содержащий нитроцеллюлозный фильтр для анализа β-Gal. Для скрининга ДНК-приманок по сравнению с мини-весовой AD-TF червя соблюдали протокол трансформации, который использовали для скрининга библиотеки AD-кДНК, за исключением того, что использовали 5 мкг библиотечной ДНК.

Для секвенирования ORF, кодирующих потенциальные интеракторы, или для фенотипического повторного тестирования на основе восстановления пробелов проводили ПЦР дрожжевых колоний, как описано ранее (Walhout and Vidal 2001).Восстановление зазора также выполнялось, как описано (Walhout and Vidal 2001). Для целей секвенирования продукты ПЦР очищали с использованием наборов для очистки Millipore (Millipore), адаптированных для использования на Qiagen Biorobot 8000 (QIAGEN). Секвенирование и сравнение BLAST для идентификации последовательности, кодирующей потенциальный интерактор, выполняли, как описано ранее (Reboul et al. 2001).

Переходная трансфекция и анализ люциферазы

P _fog-3 клонировали с помощью реакции Gateway BP в pDONR201, как описано (Walhout et al.2000b) и был субклонирован путем клонирования Gateway LR в репортерный вектор люциферазы, совместимый с Gateway, содержащий минимальный промотор SV40 (подарок от Glenn Maston, Медицинская школа UMass). ORF, кодирующие P _fog-3 интеракторов были извлечены из ORFeome (Reboul et al. 2003) и субклонированы путем клонирования Gateway LR в pDEST27 (Invitrogen), который содержит N-концевой тег GST и обеспечивает экспрессию белка на высоком уровне. в клетках млекопитающих. Мышиные фибробласты 3T3 временно трансфицировали клонами, содержащими промотор и интерактор, вместе с репортерным вектором Renilla (pRL-SV40) для нормализации эффективности трансфекции, следуя инструкциям, прилагаемым к набору для трансфекции Effectene (QIAGEN).Каждую трансфекцию проводили в трех экземплярах. Пустой вектор pDEST27 и GST- php-3 были включены в качестве отрицательных контролей. Затем, через 48 часов после трансфекции, клеточные лизаты получали с использованием набора для анализа люциферазы Dual-Glo (Promega) и активность люциферазы Renilla измеряли с помощью счетчика люминесценции Victor Light (Perkin-Elmer). Активность люциферазы светлячков была нормализована до активности люциферазы Renilla . Каждый эксперимент повторяли трижды.Результаты по люциферазе выражаются как среднее значение ± стандартная ошибка среднего для трех повторов. Различия в степени индукции люциферазы анализировали с использованием парного теста Стьюдента t Microsoft Excel. Статистическая значимость была установлена ​​на уровне P <0,05.

Эксперименты с нейросетевой системой обнаружения объектов YOLO на малых наборах обучающих данных для интеллектуальной робототехники

Современные криминалисты не разделяют единого мнения относительно выбора параметров, которые можно использовать для разработки системы характеристик, чтобы отличить маньяка-убийцу от маньяка-убийцы. обыкновенный человек.Это препятствует разработке эффективного программного обеспечения для исследовательских целей. В статье описывается опыт разработки нейронной сети, которая может обучаться с использованием данных об известных серийных убийцах, включая их биологические, социальные и психологические параметры. Авторы также оценивают ошибки математической модели этой нейронной сети, доказывают ее адекватность и представляют исследование, которое позволило провести сравнительную оценку влияния различных параметров на результат моделирования, т.е.е. предрасположенность человека к насилию. Они доказывают, что наиболее важными параметрами являются: психическое расстройство, родители-алкоголики, взросление с родителями, семейный статус, социальный статус. Влияние некоторых параметров на предрасположенность к серийным убийствам показано на данных реальных людей в экспериментах на виртуальных компьютерах. Их результаты выявили интересные закономерности. Например, было показано, что если бы у некоторых маньяков-убийц были дети, это уменьшило бы их предрасположенность к насилию, тогда как у некоторых других — нет.То же самое наблюдалось при исследовании влияния других параметров, таких как тяжесть психического расстройства, социальный и семейный статус и т. Д. Чтобы определить, насколько предрасположен конкретный человек к серийным преступлениям, необходимо провести комплексный анализ всех параметры в математической модели. Компьютерное программное обеспечение, основанное на этой математической модели, было адаптировано для специалистов по раскрытию преступлений. Он находится в открытом доступе на сайте Пермского отделения Исследовательского совета по методологии искусственного интеллекта РАН.Это программное обеспечение может использоваться следователями серийных преступлений на начальных этапах расследования, когда необходимо обработать большие объемы данных о потенциальных подозреваемых. © 2015, Байкальский национальный университет экономики и права. Все права защищены.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

| Новости главной улицы Лонг-Айленда, 30 марта 2020 г., VISION LONG ISLAND

В это время неопределенности мы начинаем видеть, как некоторые районы города закрываются ставнями, так как бары, рестораны и любое место, где собирается несколько человек, сталкиваются с опасениями и осторожностью при распространении коронавируса.Хотя это социально ответственное действие, которое поможет спасти жизни, в краткосрочной перспективе эти действия имеют ряд неблагоприятных последствий для наших местных сообществ.

Vision Long Island собрал ряд примеров из местных ресторанов и предприятий сферы обслуживания, но прежде чем мы перейдем к этому, мы хотели бы призвать всех, кто читает это, найти способ ответственно покровительствовать местным заведениям. Многие магазины предлагают самовывоз или онлайн-покупки, чтобы помочь им пережить это трудное время.И ваши любимые рестораны в настоящее время также открыты для бизнеса с возможностью еды на вынос. Мы также настоятельно рекомендуем вам подумать о подарочных картах, чтобы приобрести что-то для себя позже или, возможно, подарить.

Местные магазины могут предоставить вам то, что вам нужно в краткосрочной перспективе. Многие также будут готовы помочь вам, если вы заранее свяжетесь с ними с просьбами, которые сведут к минимуму контакты и помогут снизить распространение этого вируса.

Vision подключился к более чем 300 малым предприятиям в более чем 40 городах, переживающих экономический шторм из-за коронавируса.Мы призываем людей ответственно относиться к этим и другим открытым заведениям, которым нужна ваша помощь в это кризисное время. Многие из них были там для местных организаций и благотворителей — теперь они нуждаются в нашей поддержке.

А пока вот подборка новостей из даунтаунов Лонг-Айленда, за ними еще есть…

Деревня Хемпстед

В прошлое воскресенье, 29 марта, был 14-й день остановки экономики из-за коронавируса. Тогда мы рассказали о Деревне Хемпстед, которая представляет собой невероятно разнообразное сообщество, которое в течение последних нескольких лет планировало проекты по возрождению.Их центр города имеет невероятную транспортную доступность с автобусным узлом, железнодорожным вокзалом и сильной сеткой улиц для пеших и велосипедных прогулок.

У них есть сеть общественных, религиозных и деловых организаций, которые работают вместе с правительством своей деревни, чтобы поддерживать управление своим центром. Их 400 000 квадратных футов независимой розничной торговли включают более 50 ресторанов, которые все еще открыты для еды на вынос или доставки.

Вот список ресторанов, которые пытаются заставить его работать в этот тяжелый экономический период.(Особая благодарность Кларионе Гриффит из палаты Хемпстед за то, что она передала нам этот «открытый» листинг.)

Американская кухня

Kennedy Chicken & Sandwiches (Grubhub, doordash)
Kennedy Chicken Grill Kabab Gyro 516-414-4888 (Grubhub, doordash)
be-bop Bagel 516-292-2326 (Take Out)
Stella’s Café 516-292-0764 (Доставка , На вынос)
BAO Gourmet Famous Food (на вынос)
Пекарня Real Taste Bakery 516-565-2020 (на вынос, доставка)
Fish & Chip 516-483-2334 (Doordash, Take Out)

Карибская кухня

Дровяной гриль 516-738-9228 (на вынос)
Попробуйте The Island Bakery 516-489-5925 (на вынос)

Китайская кухня

Young Lin Kitchen 516-538-6861 (Take Out)
No 1 China Kitchen 516-486-8713 (Take Out)
New Shing Wong 516-292-3833 (Take Out)
Golden House Restaurant 516-292-6900 ( Take Out)
Ресторан King Wah 516-483-7429 (Take Out)

Delis / Bodegas

Пекарня El Monte Sinai lll Deli (Take Out)
Bodega Hispania (Take Out)
In & Out Deli (Take Out)
Fantino Deli (Take Out)
Eternal Deli 516-565-5505 (Take Out)
Camoneno Deli 516 -385-2113 (Take Out)
Deli Quetzal 516-529-3833 (Take Out)
Deli Fontana 516-5297104 (Take Out)
Ramirez Food Center
Pino Real Grocery
KJB Deli 516-605-0700
Pepe’s Deli & Гриль 516-493-9002
Sabor Latino Deli 516-279-6803

Пиццерия / Итальянская

Tony’s Pizza 516-485-7050 (Take Out)
Pizzatini 516-280-8226 (Take Out, доставка)

Испанская / латиноамериканская кухня

Пекарня и кафе La Sevillana 516-538-9857 (Take Out)
Gusto Latino Bar & Restaurant 516-307-1818 (Uber East, Doordash)
Clinton Panaderia & Pupuseria 516-385-3233 (Uber Eats)
Ресторан Santana, Inc.516-539-6349 (Take Out)
Churrasqueria Genesis Restaurant 516-506-7447 (GrubHub, Doordash)
El AjicitoПеруанский ресторан 516-292-5724 (Take Out)
Miterrita Restaurant (Take Out)
El Nopal Restaurant 516-481 -3853 (Uber Eats)
El Chicanito Mexican Grill 516-280- 6000 (Take Out)
Jalapeno Grill 516-292-8030 (Grubhub, Doordash, Uber Eats)
El Porton 516-565-1234 (Take Out)
Pollos Марио 516-505-5200 (Take Out, Doordash, Grubhub)
Miranda River Café 516-292-2333 (Grubhub)
Ресторан El Paraiso 516-280-9134 (Grubhub)
La Union Oyster & Clam Bar 516-493-9624 (Take Out)
Ресторан Rincon Dominicano 516-280-9529 (Doordash, Take Out)

SoulFood

Brother Robinson & Genesis Soul Food Restaurant 516-280-4141 (Doordash, Grubhub, Take out)

Станция Хантингтон

День 13 из-за остановки экономики из-за коронавируса приводит нас к станции Хантингтон.Богатое разнообразие, активное участие сообщества и легкий доступ к действующей железнодорожной станции — все это преимущества усилий, направленных на возвращение этого исторического центра города.

В последние годы в Хантингтон-Стейшн было вложено много инвестиций, особенно к северу и югу от железнодорожного вокзала, с целью создания пешеходной зоны в центре города. Жители, бизнес и правительство на протяжении многих лет работали вместе над тем, чтобы создать многофункциональную застройку на станции Хантингтон.От проекта Northridge на Нью-Йорк-авеню до закладки первого камня на Columbus Terrace — наконец-то начали расти достижения.

В выпуске супервайзера Чада Лупиначчи о штате Хантингтон за январь 2020 года он заглянул в будущее, заявив, что «мы продолжим оживлять станцию ​​Хантингтон, включая прогресс в строительстве канализационной инфраструктуры к югу от железнодорожной станции, чтобы способствовать экономическому развитию, и мы ищем источники финансирования на всех уровнях правительства, включая отделения округа, штата и федерального округа (EPA).Мы рассчитываем продвинуться вперед во втором городском парке опрыскивания в Manor Field Park и заложить основу для общественного центра Джеймса Д. Конте, чтобы предлагать услуги для молодежи, пожилых людей и ветеранов ».

Экономическая катастрофа, с которой сталкиваются все районы Лонг-Айленда в результате вспышки COVID-19, наносит ущерб малому бизнесу, которому помогли эти усилия по возрождению.

«Дела сейчас плохи», — заявил давний житель Джим МакГолдрик, рассказывая о станции Хантингтон во время телефонной конференции, организованной LI Main Street Alliance.Джим выразил серьезную озабоченность по поводу незавершенных проектов по возрождению и положением местных предприятий. «Бизнес идет вяло, владельцы своей собственности чувствуют себя немного спокойнее, но у магазинов, сдающих в аренду, большие проблемы. Многим сложно удержаться на плаву. Местным предприятиям нужны семинары по программам, которые могут им помочь. Нам не нужны вакансии — нам нужно больше помощи города, штата и федерального правительства ».

Рестораны делают все возможное, чтобы оставаться открытыми и творческими.Мари Мишель Дестиль, владелица Gingerbites, показывает, насколько велики сердца на станции Хантингтон. «Мы не зарабатываем деньги, но остаемся открытыми как услуга нашему сообществу. Медсестры приходят сюда после долгих смен, и их обслуживание — меньшее, чем мы можем им помочь ».

Вот несколько местных ресторанов, пытающихся заставить его работать:

Cinque Terre Ristorante открыт для еды на вынос, доставки и тротуара.
872 E Jericho Turnpike, станция Хантингтон, (631) 923-1255

Gingerbites Гаитянская карибская кухня на вынос
730 E Jericho Tpke, Huntington Station, NY 11746, (631) 427-2483

Ресторан Giuseppes Pizza and Pasta открыт на вынос, доставку и тротуар.
1727 New York Ave, Huntington Station, (631) 351-6080

Пиццерия Joe’s открыта для еды на вынос, доставки и у обочины.
881 E Jericho Turnpike, станция Хантингтон, (631) 271-5159

Кохаку открыт для еды на вынос
2089 New York Ave, Huntington Station, (631) 423-9888

Пиццерия La Nonna’s открыта для еды на вынос, доставки и у обочины.
566 E Jericho Turnpike, Huntington Station, (631) 351-4700

Пиццерия Mama Lucia’s открыта для еды на вынос и доставки
1820 New York Ave, Huntington Station, (631) 423-4855

Marco’s открыт для еды на вынос, доставки и тротуара.
Pulaski Rd, Huntington Station, (631) 629-4935

Ресторан Melissa открыт для еды на вынос
1419 New York Ave # 1, Huntington Station, (631) 470-2264

Pancho Villa’s II открыт для еды на вынос, доставки и у тротуара.
107 E Jericho Turnpike, станция Хантингтон, (631) 923-2513

Pollo Campero открыт для еды на вынос
1805 New York Ave, Huntington Station, (631) 423-6600

Rincon Criollo открыт для еды на вынос, доставки и у обочины.
Тернпайк, 16 Вт Jericho, станция Хантингтон, (631) 271-2277

Станция Shah’s Halal Huntington открыта для выезда на вынос.
918 E Jericho Turnpike, Huntington Station, (631) 423-7768

Taqueria Mexico Lindo открыт для еды на вынос
1429 New York Ave, Huntington Station, (631) 423-5980

Болдуин

День 12 из-за остановки экономики из-за коронавируса привел нас в центр Болдуина.У Vision была возможность работать с людьми в этом сообществе в течение многих лет в рамках их постоянных усилий по возрождению.

Сообщество, бизнес и правительство в городе Болдуин неустанно работали, чтобы реализовать развитие, ориентированное на развитие общественного транспорта, и помочь городу привлечь новые предприятия. Они также работали над созданием жилья, которое привлекает молодых людей, пустующих ночлегов и членов сообщества, которым нужен легкий доступ в Нью-Йорк. Болдуин, как и многие другие города, начал добиваться реальных успехов в достижении этой цели — создать реальное ощущение места.

Городское управление Хемпстеда проголосовало 21 января за принятие наложенного района зонирования Болдуина, в разработке которого компания Vision была рада помочь. Это был процесс, инициированный сообществом, с консенсусом и сотрудничеством сообщества благодаря совместной работе всех уровней правительства. Это был важный шаг в расчистке пути для государственного гранта в размере 10 миллионов долларов, который город получил на реконструкцию центра города Болдуин, проложив путь для проектов благоустройства и стимулировал рост многофункциональной застройки вдоль Гранд-авеню.

Экономическая остановка из-за коронавируса, к сожалению, помешала осуществлению этого проекта. Городское правительство, Палата и Гражданская ассоциация Болдуина сосредоточены не только на здоровье и безопасности жителей, но и на экономическом здоровье и безопасности центра города.

Палата Болдуина указывает на то, что мы можем извлечь уроки из этой вспышки болезни: небольшие местные магазины имеют жизненно важное значение для нашего сообщества. В то время как крупные сетевые магазины работают с пустыми полками и большими толпами, местные малые предприятия могут быстро и из многих источников сделать повторный заказ, чтобы полки оставались заполненными.

Как и в любом центре города, местные предприятия вносят свой вклад, и поддержка жителей очень важна. Карен Монтальбано из Baldwin Civic Association заявила, что для достижения этой цели предпринимаются усилия на низовом уровне по распространению информации, особенно через социальные сети, об открытых предприятиях.

Вот несколько местных ресторанов, в которых он работает:

A Touch Of Italy открыт для еды на вынос, доставки и у обочины
1187 Grand Ave, Baldwin, (516) 483-5119

Ayhan’s открыт для еды на вынос, доставки и у обочины.
550 Sunrise Hwy, Болдуин, (516) 223-1414

Benny B’S открыт для еды на вынос и доставки
2092 Grand Ave, Baldwin, (516) 632-5528

Caribbean Cove Roti & Grill открыт для еды на вынос, доставки и у обочины
1929 Grand Ave, Baldwin, (516) 208-8951

Coach Diner открыт для еды на вынос, доставки и у тротуара.
790 Sunrise Hwy, Болдуин, (516) 223-2161

Coal House Grill открыт для еды на вынос и доставки
844 Merrick Rd, Болдуин, (516) 442-7063

DeFrancisco’s Pizzeria & Ristorante открыта для еды на вынос, доставки и у тротуара.
97 Merrick Rd, Baldwin, (516) 442-3561

Delicious Moments Caterers открыт для еды на вынос и доставки
792 Merrick Rd, Болдуин, (516) 594-1349

Gino’s Pizza открыта для еды на вынос, доставки и у обочины.
919 Atlantic Ave, Baldwin, (516) 546-8800

Кухня Мими открыта для еды на вынос
1293 Гранд Авеню, Болдуин, (516) 377-8506

No Good Burger Joint открыт для еды на вынос, доставки и у обочины.
930 Atlantic Ave, Baldwin, (516) 442-5434

Нови — New Old Venice Inn открыт для еды на вынос, доставки и проезда.
99 Merrick Rd, Болдуин, (516) 442-4500

Раагини открыт для еды на вынос, доставки и у обочины.
924 Atlantic Ave, Болдуин, (516) 608-5578

Sweet & Savory Café открыто на вынос
821 Merrick Rd, Baldwin, NY 11510, (516) 543-4900

Tropical Jerk открыт для еды на вынос
1321 Grand Ave, Baldwin, NY 11510, (516) 442-2900

Ирландский паб открыт для еды на вынос
834 Merrick Rd, Болдуин, (516) 208-5940

На 11-й день остановки экономики из-за коронавируса мы попадаем в деревню Валли-Стрим.Деревня одобрила и построила ряд ориентированных на общественный транспорт за последние годы и была готова к всплеску активности в центре города в 2020 году.

Прошлый вторник должен был стать большим днем ​​для местных баров и ресторанов, поскольку День Святого Патрика обычно является одним из самых загруженных дней в году. Но после того, как исполнительный указ губернатора Куомо вступил в силу в полной мере, он стал довольно суровым для предприятий Valley Stream, которые начали страдать от закрытия из-за коронавируса.

Это настроение ощущалось во многих местных заведениях, в том числе в ресторане и баре Buckley’s, 51-летнем заведении в центре долины Вэлли-Стрим, которое было заменено на еду на вынос.Даже с учетом временного изменения в законах штата о спиртных напитках, разрешающего продажу алкоголя за пределами предприятия, бизнес ожидает значительного ущерба для нормального патронажа.

«Никто не хочет закрываться, но это правильно», — сказал бармен Бакли Кенни Коллинз. «Вы не хотите, чтобы люди болели, поэтому делайте то, что должны».

Другое местное заведение, ресторан Mitchell’s Restaurant, уже вынуждено было отправлять домашних работников, поскольку бизнес пришел в упадок, и в настоящее время разрабатывает план, позволяющий полностью переключиться на услуги по доставке и доставке еды на вынос.Хотя владельцы и менеджеры осознают необходимость этих внезапных изменений, все еще существует большая озабоченность по поводу того, как это сделать и каковы будут долгосрочные последствия.

Но г-н Нотарбартоло также отметил, что в его бизнесе уже наблюдался резкий спад в бизнесе, поскольку в последние недели клиенты стали избегать людных мест. Это уже ставило его заведение в такое место, где им приходилось сокращать часы работы персонала. К счастью для него, часть его сотрудников — это старшеклассники или студенты колледжей, которые искали немного дополнительных денег, но есть ряд работников, которые полагаются на это как на основной источник дохода, и именно они занимаются бизнесом. в данный момент являются приоритетными.

Престижность мэру деревни долины реки Эду Фэру и его команде за то, что деревня хорошо управляема во время этого кризиса.

Вот некоторые из ресторанов, которые открыты для еды на вынос и доставки.

Big Guys Burger & Grill открыт для еды на вынос и доставки
1682 Central Ct, Valley Stream, (516) 887-1839

Biryani House открыт для еды на вынос
60 Central Ct, Valley Stream, (516) 596-2525

Бостонский рынок открыт для еды на вынос, доставки и тротуара.
168 W Merrick Rd, Valley Stream, (516) 561-5539

Buckley’s открыт для еды на вынос
159 S Franklin Ave, Valley Stream, (516) 825-4344

Charlie Meaney’s открыт для еды на вынос, доставки и тротуара.
52 Central Ct, Valley Stream, (516) 596-2337

Курятник открыт для еды на вынос
159 Rockaway Ave, Valley Stream, (516) 568-2667

Dawat E Khaas открыт для выезда на вынос
324 N Central Ave, Valley Stream, (516) 837-0555

Пиццерия Genovese открыта для еды на вынос, доставки и у обочины
20 Central Ct, Valley Stream, (516) 825-6605

IHOP открыт для вывоза и доставки
180 E Sunrise Hwy, Valley Stream, (516) 825-9388

Inatome Japanese Steak + Sushi открыт на вынос, доставку и у тротуара.
6 5th St, Valley Stream, (516) 872-0419

Пиццерия John Anthony’s открыта для еды на вынос и доставки
1056 Franklin Ave, Valley Stream, (516) 256-3300

La familia Deli & Grill открыт для еды на вынос
161 E Merrick Rd, Valley Stream, (516) 341-0067

Пиццерия Valley Stream Mamma Gina открыта для еды на вынос и доставки.
104 E Merrick Rd, Valley Stream, (516) 568-1333

Mary’s открыт для еды на вынос открыт для еды на вынос и доставки
867 W Merrick Rd, Valley Stream, (516) 612-3559

Mia’s открыт для еды на вынос, доставки и тротуара.
31 Rockaway Ave, Valley Stream, (516) 825-2117

Ресторан Mitchell’s открыт на вынос, доставку и тротуар.
191 Rockaway Ave, Valley Stream, (516) 825-9708

Pizza Amore открыта для еды на вынос
Дюбуа 171 Ave, Valley Stream, (516) 872-9229

Pomodorino Rosso открыт для еды на вынос и доставки
47 Franklin Ave, Valley Stream, (516) 812-6171

Кафе Pretty Toni’s открыто для еды на вынос
759 W Merrick Rd, Valley Stream, (516) 285-8664

RoRo ‘s Gyro Place открыт для еды на вынос и доставки
32 Roosevelt Ave, Valley Stream, (516) 341-0585

Rosas Pizza открыта для еды на вынос
178 W Merrick Rd, Valley Stream, (516) 872-5200

Sam’s Steak & Grill открыт для еды на вынос и доставки
58 Rockaway Ave, Valley Stream, (516) 837-0007

Ресторан и бар TRUFFLE открыт на вынос, доставку и тротуар.
410 Rockaway Ave, Valley Stream, (516) 887-3373

Грейт Нек Плаза

На 10-й день остановки экономики, связанной с коронавирусом, мы попадаем на площадь Грейт-Нек.

На фоне опасений по поводу коронавируса Village of Great Neck Plaza ставит на первое место жителей. Согласно указу губернатора Куомо от 16 марта, выборы в деревнях были перенесены на день первичных выборов, 28 апреля 2020 года. Таким образом, мэр Джин Селендер отложила свой выход на пенсию до начала мая.

По словам мэра, «Наша группа по обеспечению готовности собирается ежедневно, чтобы гарантировать, что мы учитываем самую последнюю информацию от агентств общественного здравоохранения и государственных органов, делимся ключевыми данными и передовым опытом с нашими сотрудниками и обеспечиваем принятие необходимых мер. для защиты здоровья и безопасности всех наших людей, продолжая удовлетворять потребности наших жителей и предприятий на Мэйн-стрит.”

Деревня Грейт-Нек Плаза, возглавляемая мэром Селендером, процветала на протяжении многих лет. От пропаганды безопасных улиц и инициатив по уменьшению дорожного движения до требований доступного жилья в районе с высоким уровнем достатка, управления и продвижения фестивалей, мероприятий, искусства, культуры, музыки и обеспечения 5 миллионов долларов для ряда капитальных проектов и услуг, Village of Great Нек Плаза процветает.

Совсем недавно Village работала с Vision над изменением кодов, чтобы помочь продвинуть / сохранить розничную торговлю на Мэйн-стрит и получить более доступные по цене единицы в центре города.Последствия пандемии теперь угрожают прервать эту замечательную траекторию.

«Мы — город-призрак», — описал мэр Селендер. «Наши закусочные переживают настоящие трудности. Рестораны делают работу йомена. Им нужна вся рекламная помощь, которую мы можем им оказать, особенно с помощью социальных сетей ».

Район улучшения бизнеса Great Neck Plaza во время кризиса, когда рестораны и посетители вносят свой вклад в сглаживание кривой, поощряет жителей посещать любимые местные закусочные и использовать варианты еды на вынос, у обочины или доставки.

Вот несколько местных ресторанов, в которых он работает:

Bareburger открыт для еды на вынос, у обочины и доставки
66 Мидл-Нек-Роуд, Грейт-Нек, (516) 441-5711

Пиццерия и ресторан Francesca’s открыта для еды на вынос и доставки.
29 N. Station Plaza, Great Neck, (516) 466-5842

Пиццерия и ресторан Gino’s of Great Neck открыта для еды на вынос и доставки
60 Мидл-Нек-Роуд, Грейт-Нек, (516) 487-1122

Ресторан «Грейт-Нек» открыт на вынос и доставку.
14 Грейс-авеню, Грейт-Нек, (516) 466-0678

La Rotonda Ristorante открыт для еды на вынос и доставки
8 Bond St, Great Neck, (516) 439-4870

Лола доступна для еды на вынос
113A Middle Neck Road, Great Neck, (516) 466-5666

S&D Crab House открыт для еды на вынос и доставки
105 Мидл-Нек-Роуд, Грейт-Нек, (516) 498-8088

Линбрук

День 9 экономического спада из-за Коронавируса переносит нас в центр города Линбрук, где сообщество объединилось на нескольких уровнях.

От мониторинга мнений и предложений экспертов, предоставления образования по COVID-19, закрытия библиотеки и спонсируемых деревней развлекательных мероприятий до партнерства с Key Food Supermarket для доставки еды пожилым людям, которые добираются до рынка на автобусах, — Village of Lynbrook — это работают сверхурочно, чтобы обеспечить безопасность жителей. Наряду с преодолением этого кризиса в области здравоохранения, Деревня борется с экономическим кризисом, с которым сейчас сталкиваются все города.

Благодаря отличным школам и дружелюбным жителям, многие из которых выросли там, Линбрук смог сохранить свой местный колорит.Приняв участие в нескольких недавних проектах, Village начал опускать весло в сторону развития, ориентированного на транзит, используя свои уникальные возможности железной дороги. Теперь все наготове, чтобы попытаться свести к минимуму экономический ущерб, причиненный последствиями коронавируса.

Джо Карузон, владелец Vincent’s, воплощает дух Линбрука: «Мы там держимся. Мы сделаем все, что удобно нашим клиентам. Мы доставим вас до дверей, постучим или нет, доставим к тротуару или встретим вас в ресторане на вынос.Все разные, и мы понимаем ».

Торговая палата Линбрука обратилась к жителям с призывом: «В период между закрытыми ресторанами и супермаркетами вы можете поддерживать рестораны-члены, которые открыты для еды на вынос и доставки. Вы окажете себе и им большую услугу «.

Престижность мэру Алану Бичу и его команде за управление Деревней во время этого кризиса.

Вот несколько местных ресторанов, в которых он работает:

Пиццерия и ресторан Angelinas открыта для еды на вынос, у обочины и доставки
33 Atlantic Avenue, Lynbrook, (516) 872-3477

Burger Shack открыт для еды на вынос и доставки
97 Broadway, Lynbrook, (516) 218-2777

Craft Kitchen & Tap House открыт для еды на вынос, у обочины и доставки
44 Stauderman Ave, Lynbrook, (516) 341-0547

Lynbrook Eats открыт для еды на вынос и доставки
245 Merrick Rd, Lynbrook, (516) 887-4932

Maier’s Brick Café открыто для еды на вынос, у обочины и доставки.
157 Lakeview Ave, Lynbrook, (516) 599-9669

Santorini’s открыт для еды на вынос, у обочины и доставки.
165 Atlantic Avenue, Lynbrook, (516) 593-9600

Ресторан и винный бар SaVino открыт для еды на вынос, у обочины и доставки.
88 Atlantic Avenue, Lynbrook, (516) 596-1600

Вилла Formia открыта для еды на вынос и доставки
455 Merrick Rd, Lynbrook, (516) 599-4200

Vincent’s открыт для еды на вынос, у обочины и доставки
14 Atlantic Ave, Lynbrook, (516) 599-1204

Вавилонская деревня

День 8 из-за остановки экономики из-за коронавируса привел нас в графство Саффолк и деревню Вавилон.

Деревня Вавилон работает над проектами реконструкции, включая строительство театра в центре города, и поддерживает здоровый деловой район. The Village понимает, что деньги, потраченные на строительные магазины в центре города, остаются в общине, помогают платить местные налоги и сохраняют рабочие места и ресурсы по соседству. Появление коронавируса и шаги, которые города, деревни, округа и штаты обязательно предпринимают для защиты здоровья жителей, могут в конечном итоге нанести ущерб бизнесу в центре города.

Келли Пекхолдт, президент Торговой палаты Вавилонской деревни, видит важность сосредоточения внимания на экономических последствиях этого кризиса. «Наш бизнес здесь, в деревне, уже сильно пострадал», — сказала г-жа Пекхолдт. «На данный момент почти все предприятия закрываются или значительно изменили свои часы работы. Несколько розничных торговцев все еще открыты, но проводят только виртуальные покупки или частные встречи. По сути, мы ждем и ожидаем объявления о закрытии всех второстепенных предприятий.Есть много владельцев бизнеса и сотрудников этих предприятий, которые уже обеспокоены за свои средства к существованию, учитывая, что правительство не предоставило график этих закрытий. С другой стороны, мы уже наблюдаем волну поддержки со стороны сообщества.

«Как Палата, на этой неделе мы очень много работали над тем, чтобы постоянно публиковать информацию о компаниях, предлагающих еду на вынос, виртуальные покупки и т. Д., На наших страницах в социальных сетях, а также пытались поделиться как можно большим объемом информации от местных органов власти для владельцы бизнеса для справки.У нас также есть несколько более крупных маркетинговых проектов, так как мы стараемся как можно больше помочь нашим коллегам-владельцам бизнеса. Еще одним положительным моментом является то, что эта ситуация вынудила многие компании стать действительно творческими в том, что и как они продают — только время покажет, будут ли эти стратегии работать в мире после коронавируса, но я думаю, что эти инновационные стратегии будут что, как мы надеемся, позволит этому бизнесу выжить на данный момент ».

Ричард Кан, менеджер бара в Brixton, подводит итог.»Мы все в этом вместе. Мы пытаемся вернуть хоть какое-то чувство нормальной жизни, что сейчас так важно. Нам нужно заботиться друг о друге ».

Вот некоторые из местных ресторанов Вавилона, в которых они работают:

Del Fuego открыт для еды на вынос, обслуживания у обочины и доставки через Uber Eats & Doordash
117 Deer Park Avenue Babylon, (631) 620-3700

Publick House Горация и Сильвии
100 Deer Park Ave Babylon, (631) 587-5081

Кофейня Jack Jack’s открыта для еды на вынос
223 Deer Park Ave Babylon, (631) 526-9983

Паб Lily Flanagan’s открыт для еды на вынос и доставки
345 Deer Park Ave, Babylon, (631) 539-0816

Mary Carroll’s открыт для еды на вынос
121 Deer Park Ave, Babylon, (631) 587-6181

Mulberry Street Вавилон
30-32 E Main St.Вавилон, (631) 321-5980

Японская кухня Охайо открыта на вынос и доставку
233 E Main St, Babylon, (631) 669-1639

Post Office Café открыто для еды на вынос и доставки через Uber Eats & Door Dash & Grubhub
, 130 West Main Street Babylon, (631) 669-9224

Brixton открыт для самовывоза (доставка скоро)
111 Deer Park Ave Babylon, (631) 587-2000

Престижность мэру Вавилона Ральфу Скордино, который управляет Деревней во время этого кризиса.

Королевский парк

Недавно у нас была возможность поговорить с нашими друзьями, представителями малого бизнеса и руководителями правительства в Кингс-Парке, чтобы узнать, как они справляются с остановкой.

Kings Park делает медленные, но устойчивые шаги в направлении восстановления стареющего центра города. Благодаря совместной работе бизнеса, общества и правительства перспективы позитивного роста стали реальностью. Текущие ограничения, связанные с борьбой с коронавирусом, угрожают сорвать этот прогресс.Как и на любой местной главной улице, предприятия, особенно рестораны, борются за выживание.

Энтони Танци, президент Торговой палаты Кингс-Парк, предсказывает: «Мэйн-стрит и малый бизнес выдержат эту бурю! Однако от наших местных сообществ потребуется обязательство помочь им, если мы хотим, чтобы они были там, когда все закончится ».

Кевин Денис, владелец Professor’s Café, соглашается: «Мы заботимся о сообществе в течение 33 лет и надеемся, что сообщество будет рядом с нами.Денис объясняет: «Трудно понять, что делать, — закрыть на несколько недель или остаться открытым. Мы делаем все возможное, чтобы остаться там и выжить ».

Майкл Гримаудо, владелец Gino’s Kings Park, согласен с тем, что компании терпят убытки, но мы работаем, чтобы оставаться на плаву.

Правительство города Смиттаун понимает насущные проблемы, связанные с обеспечением баланса между личным здоровьем и экономическим здоровьем населения. «Эта пандемия поразила наши предприятия на Мэйн-стрит так, что многие из них задаются вопросом, как они выживут.Многие придумывают способы ведения бизнеса без ущерба для общества. Пекарни делают наборы для печенья своими руками, чтобы забрать их домой, рестораны увеличивают количество еды на вынос, риэлторы снимают доступные дома … каждый находит свой рецепт приготовления лимонада. И хотя общественность должна сохранять бдительность в социальном дистанцировании, мы все можем найти способ безопасно поддерживать наши местные магазины, будь то публикация их сообщений в социальных сетях или внесение пожертвований тем, кто вынужден закрыться… путь через это — вместе », — Эд Вехрхейм.

Линда Хеннингер, президент Kings Park Civic, призывает жителей также поддерживать местный бизнес в центре города.

У нас была возможность также увидеть, как Park Bake Shop настраивает окно заказа. Хозяйка Люси Штанко предложила с собой вкусные кроны.

Вот примеры ресторанов Kings Park, в которых он работает:

Café Red открыто с 12:00 до 20:00 для заказа и самовывоза.
107 Main Street, Kings Park, телефон (631) 544-4500.

Ciro’s Kings Park открыт с 14:00 до 20:00 для доставки, еды на вынос и пикапа у обочины.
74 Main Street, Kings Park, телефон: 631-269-2600.

Gino’s Kings Park открыт с 10:00 до 21:00 на вынос и доставку.
52 Indian Head Road, Kings Park, телефон (631) 269-2880.

Long River открыт с 11:00 до 18:00 на вынос и доставку.
4 Main Street, Kings Park, телефон (631) 544-4666.

Professor’s Café открыто пн, вт, сб с 8 до 19, чт, пт с 8 до 20, сб с 8 до 19, вс с 8 до 15 на вынос и доставку.
58 Indian Head Road, Kings Park, телефон (631) 269-4346.

Relish открыт с 11:00 до 19:00 на вынос и доставку.
2 Pulaski Road, Kings Park, телефон (631) 292-2740.

Simply Greek открыто с 11:00 до 21:00 на вынос и доставку.
12 Indian Head Road, Kings Park, телефон (631) 663-3652.

Park Bake Shop, 5: 00-18: 00, Еда на вынос через окно заказа.
112 Main St, Kings Park, 631-269-3825

Park Lounge, 16: 00-19: 00, семейные обеды на вынос.
605 E. Main Street, Kings Park, 631-979-1351

Kings Park Shipping была назначена важным бизнесом, чтобы оставаться открытым в качестве судна в судоходном канале для UPS, FEDEX, DHL и USPS.Они также могут обрабатывать печать по мере необходимости. С любыми вопросами обращайтесь по адресу: [email protected]

Нортпорт

Vision Long Island недавно находился в центре Нортпорта, где несколько небольших предприятий все еще открыты для еды на вынос днем ​​и ночью.

Некоторые из предприятий, которые открыты для продажи на вынос, включают:

Northport Harbour Delicatessen
Martoni’s Italian Eatery
Винный бар
Main Street Café
Golden China
Греческий ресторан Venus
Токио
Mamma Mias Pizzeria
Copenhagen Bakery
Robkes

Роб Бройденбах из магазина деликатесов Northport Harbour Delicatessen, оба из которых были опорой в городе на протяжении десятилетий, предлагает отличные яичные бутерброды, супы и обеды.

Martoni’s, гораздо более новом заведении, подают отличный кофе, домашние супы и другие закуски и продукты. У них также есть макароны на продажу для людей, которые делают запасы и обнаруживают, что их местный супермаркет пуст.

Винный бар открыт на вынос и предлагает свое эклектичное меню, которое включает и другие открытые рестораны города. Это буквально универсальный магазин еды на вынос, конечно же.

Наконец, открыт Maroni’s, предлагающий множество горячих и готовых к употреблению фрикаделек, отмеченных наградами.Мария Марони работает целыми днями и ночами, чтобы подготовить эту операцию для местных покровителей.

Люди могут взять еду на вынос и поесть на набережной, оставаясь при этом на значительном расстоянии друг от друга, или просто безопасно прогуляться по городу, избегая тесного контакта с другими людьми.

Многие розничные магазины закрылись по собственному желанию еще до принудительного отключения, которое произошло вчера вечером и в прошлый понедельник. Нортпорт — это деревня, которая в значительной степени зависит от доходов от туризма, поэтому большинство ресторанов, баров и розничных торговцев получают выгоду летом, а январь и февраль — самые медленные месяцы месяца.Остановка, происходящая в марте, когда большинство этих предприятий начинают восстанавливать работу, на самом деле может быть хуже, чем зимой, и для многих изнуряет. К сожалению, наш друг Джин из парикмахерской Оскара был вынужден закрыться на прошлой неделе в ожидании приказа о закрытии. Надеемся увидеть его снова.

Мы надеемся, что люди смогут найти ответственный способ покровительствовать этим малым предприятиям или другим в вашем собственном центре города. Только так эти люди смогут пережить тяжелые экономические времена для всех нас.

Farmingdale

Ни один центр города не принес жилье, рабочие места, экономическую активность и широкое адаптивное повторное использование с развитием, ориентированным на транзит, как деревня Фармингдейл, но поскольку эта пандемия начинает вызывать серьезные экономические проблемы, очень немногие места или отрасли промышленности останутся невредимыми, и ни одна из них не останется без изменений. более уязвимы, чем наши местные предприятия на Мэйн-стрит.

Мэр деревни Фармингдейл Ральф Экстранд и Попечительский совет деревни не только работают над обеспечением безопасности своего сообщества; они навещают торговцев по всей деревне, чтобы справиться с текущим экономическим кризисом.Мэр Экстранд говорит нам: «Каждую ночь мы проводили вынос из разных мест. Мы размещаем на веб-сайте Village и всем жителям, у которых есть постоянный контакт, список названий ресторанов и номеров телефонов, которые занимаются доставкой и вывозом. Мы предоставили всем продавцам информацию SBA, чтобы подать заявку на получение денег. Мы делаем все возможное, чтобы Фармингдейл оставался деревней, которой можно гордиться ».

Торговая палата Фармингдейла просит, чтобы Фармингдейл собрался вместе, чтобы поддержать предприятия, которые поддерживают сообщество.«Каждый день владельцев малого бизнеса и организации просят высказывать суждения в отношении общественной безопасности, подвергая риску себя, своих сотрудников и свое будущее», — заявляет президент Джозеф Гарсия. «Наши рестораны, пивоварни и многие другие были вынуждены изменить бизнес-модели в мгновение ока, чтобы соответствовать государственным правилам и рекомендациям по предотвращению распространения COVID-19. Подавляющее большинство наших членов все еще работают. Заведения по производству продуктов питания и напитков предусмотрели условия для еды на вынос, встречи у обочины, бесплатной доставки, скидок, а также алкоголя на вынос и даже с доставкой.Пожалуйста, продолжайте поддерживать наш бизнес здесь, в Фармингдейле. Сделайте заказ, выпейте пива или вина. Продолжайте вести дела по телефону. Также подумайте о приобретении подарочных карт для использования в будущем. Мы хотим, чтобы Фармингдейл оставался сильным и динамичным бизнес-сообществом ».

Вот несколько местных ресторанов, в которых он работает:

Мэйн-стрит 317 открыта для проезда и доставки
Мэйн-стрит 317, Фармингдейл (516) 512-5317

Bagel Hut открыт для еды на вынос и доставки
525 Fulton Street (Rt 109) Farmingdale (516) 249-3300

Caracara Mexican Grill открыт для обочины и доставки
354 Main Street, Farmingdale (516) 777-2272

Charlotte’s Desserts открыт для еды на вынос, у обочины и доставки
294 Main Street, Farmingdale (516) 586-3595

Chiddy’s Cheesesteaks открыт для приема и доставки
191 Main Street, Farmingdale (631) 609-1425

Croxley Ales открыт для еды на вынос, у обочины и доставки
190 Main Street, Farmingdale (516) 293-7700

Dominican Restaurant 4 открыт для еды на вынос и доставки
305 Main Street, Farmingdale (516) 586-6005

Flux Coffee открыт для еды на вынос
211 Main Street, Farmingdale (516) 586-8979

Пиццерия Frankie’s открыта для еды на вынос и доставки
313 Main Street, Farmingdale (516) 502-1304

Grecian Grill открыт на вынос и доставку
261 Main Street, Farmingdale (516) 753-1260

High Tide Taco открыт для еды на вынос и доставки
257 Main Street, Farmingdale (516) 586-5255

Library Café открыто для еды на вынос, у обочины и доставки
274 Main Street, Farmingdale (516) 752-7678

Литология открыта для обочины и доставки
211A Main Street, Farmingdale (516) 962-0585

Пицца на Мэйн-стрит открыта для еды на вынос, у обочины и доставки.
Мэйн-стрит, 302, Фармингдейл (516) 777-3600

Американская решетка Палмера открыта для обочины и доставки
123 Фултон-стрит, Фармингдейл (516) 420-0609

Соболь открыт на вынос
155 b Main Street, Farmingdale (516) 588-0500

Stuff-A-Bagel открыт для еды на вынос и доставки
234 Main Street, Farmingdale (516) 420-4287

Эта Meetball Place открыта для обочины и доставки
206 Main Street, Farmingdale (516) 586-8880

The Republic Pub открыт для еды на вынос и доставки
217 Main Street, Farmingdale (516) 293-4400

Тимьян на вашей стороне (Le Petit Café) открыт для еды на вынос, у обочины и доставки
314 Main Street, Farmingdale (516) 465-9660

Tiny Thai открыт для еды на вынос
187 Main Street, Farmingdale (516) 694-3302

TOA открыт для еды на вынос и доставки
122 Secatogue Avenue, Farmingdale (516) 777-8888

Tre Scalini открыт для еды на вынос и доставки
196 Main Street, Farmingdale (516) 249-0140

Vespa Italian Kitchen & Bar открыт для еды на вынос и доставки
282 Main Street, Farmingdale (516) 586-8542

Wings Over Farmingdale открыт для выезда на вынос
221 Main Street, Farmingdale (516) 756-9464

Farmingdale также опубликовал список местных предприятий, которые все еще открыты, и список услуг, которые они предлагают клиентам, доступ к которым вы можете получить здесь.

Минеола

Vision не работал в центре города Минеола на четвертый день вынужденного отключения большинства работ.

Рестораны, с которыми мы смогли поговорить или которые мы наблюдали открытыми, включают:

PS Burgers
Kaiyo Japanese Cuisine
Recovery Room Бар и гриль
Burrito Blvd. Мексиканский гриль
Пицца спагеттини
Лас Винас Перуанская кухня
Сердце Португалии
Пикколо Буссала Семейный стиль
Пицца Тальо в римском стиле
Gyro Stop

(Стоит отметить, что очередь в один из местных оружейных магазинов выходила в 8:30 ночи.)

У нас была еда на вынос из Taglio Roman Style Pizza, которая была отличной на вкус. Мы также заехали, чтобы увидеть Авелино и Элизабет из Сердца Португалии. Их особенное блюдо «Октуп на гриле с овощами» было особенно вкусным!

К сожалению, компании сообщили о снижении продаж в среднем на 90%, даже при наличии заказов на вынос. Большинству пришлось уволить от 50 до 80% своего персонала, и они работают в составе базовых бригад. Но все же стоит отметить, что доставка еды на вынос по-прежнему разрешена в соответствии с принудительными мерами, которые должны быть введены в действие в воскресенье.

Vision уже обратилась к более чем 160 независимым малым предприятиям, которые были уничтожены в результате принудительного закрытия большинства предприятий на Мэйн-стрит.

East Meadow

East Meadow были последней группой, ошеломленной внезапным закрытием предприятий в понедельник, поскольку они старались поддерживать свои предприятия в чистоте в надежде остаться открытыми. После того, как пришел приказ о проигрыше, владельцы начали серьезно работать над тем, чтобы придумать, как компенсировать потерю дохода.

«Еще пять минут назад мы проводили дезинфекцию и планировали оставаться открытыми», — сказал в понедельник днем ​​Фрэнк Камарано, менеджер World Gym в Ист-Медоу. «Теперь все просто ошеломлены, как и я. Участники убиты горем, и теперь они не знают, что делать ».

Г-н Камарано также является председателем правления Торговой палаты Ист-Мидоу и вице-президентом Совета торговых палат Нассау. Работа на этих должностях позволила ему контактировать с многочисленными местными предприятиями, чтобы успокоить нервы, но ряд местных владельцев чувствуют, что им некуда идти.Прямо сейчас он работает над сбором ресурсов и информации о планах помощи на разных уровнях правительства, которые, возможно, могут помочь.

«Я думаю, что люди должны услышать, что« вы не одиноки », — сказал г-н Камарано. «Я знаю, что это звучит глупо, но это правда».

Фрэнк Боррелли, владелец итальянского ресторана Borrelli’s на Ист-Мидоу, надеется сохранить свои двери открытыми, предлагая меню на вынос, но из-за приказа Куомо ему пришлось уволить весь официант, хотя ему было больно это сделать.Он пообещал нанять их, как только будет снят запрет на собрания, но на данный момент он должен сделать все, что в его силах.

«Я думаю, мы могли бы доставить пиццу с« карантини »на вынос», — сказал Боррелли, ссылаясь на ослабление законодательства о спиртных напитках, чтобы разрешить продажу алкоголя за пределами помещений. Г-н Боррелли также рассказал о том, как его бизнес пережил ураган «Сэнди», но, по крайней мере, мог бы рассчитывать на близлежащий Колизей Нассау, который поможет привлечь клиентов. Но на этот раз все по-другому, поскольку запрет на публичные собрания означает как минимум месяц без таких послаблений.

Местные компании, специализирующиеся на фитнесе, работают над продолжением предоставления услуг на виртуальном уровне своим клиентам. Энтони Бевилаква, владеющий AB Fitness в Ист-Мидоу, назначит своим сотрудникам три получасовых занятия утром и три вечера для участников, а также семинары по питанию каждый вечер.

«Один из лучших способов борьбы с коронавирусом — оставаться здоровым», — сказал г-н Бевилаква. «Все определенно более напряжены в это время. Но единственное, что вы можете контролировать, — это себя и свои действия.”

Вы можете узнать больше в Long Island Herald.

Площадь Франклина и Элмонт

В минувший вторник предполагалось, что на площади Франклина и Элмонта начнется приток деловых людей в местные рестораны и бары. Вместо этого после распоряжения губернатора Куомо о том, чтобы бары и рестораны переключились на питание на вынос и доставку, а не в заведения, где можно пообедать, воцарилось молчание. Такой поворот событий заставил местных владельцев встревожиться в то время, которое должно быть для них одним из самых загруженных периодов года.

«Это может закрыть мой ресторан», — сказала Энн Анджелино, владелица ресторана Murph’s на Франклин-сквер. Г-жа Анджелино недавно инвестировала 10 000 долларов в свой бизнес в рамках подготовки ко Дню Святого Патрика и боится, что не сможет окупить затраты с помощью текущего приказа о закрытии. Кроме того, она не может подать заявление на страхование от безработицы как владелец собственного бизнеса.

Это проблема, которую рассматривают во всем регионе, поскольку владелец за владельцем сталкиваются с резким падением продаж и покровительством, поскольку местные жители остаются дома, опасаясь распространения коронавируса.Это заставило местных жителей бороться, пытаясь помочь своему бизнесу.

«В ближайшие недели или две всем действительно будет больно», — сказал президент Торговой палаты Эльмонта Пол Сапиенца, который также владеет кондитерской Sapienza Bake Shop в центре Эльмонта. «Если у них нет денег, им придется закрыть».

Г-н Сапиенца заявил, что некоторые предприятия могут брать ссуды или использовать деньги в резерве, но закрытие все еще может привести к увольнению большого числа сотрудников.Сотрудники, работающие неполный рабочий день, вероятно, будут первыми, большинство из которых будут студентами или людьми, ищущими дополнительный располагаемый доход, но чем дольше будет длиться кризис, тем труднее будет местному бизнесу платить даже небольшому количеству сотрудников.

Это главная забота Марио Тестани, владельца ресторана «Филомена», который чувствует, что у него достаточно денег, чтобы пережить кризис, но беспокоится о своих сотрудниках. Он пытается придумать лучший способ оставаться открытым и продолжать платить им, при этом заботясь о безопасности других.

Но, кроме того, главная проблема заключается в том, как предприятия будут оплачивать свои текущие расходы. «Я должен буду заплатить своему домовладельцу, несмотря ни на что», — сказал Энтони Капогна, владелец ресторана Olivetto Pizzaria and Ristorante, который все еще открыт для еды на вынос. Но будущее внезапно стало очень неопределенным для него и многих местных предприятий на Лонг-Айленде.

Вы можете узнать больше о площади Франклина и Эльмонте в Long Island Herald.

Роквилл Центр

Роквилл-центра также понесли убытки в это время, так как владельцы работают над тем, чтобы выяснить, как двигаться вперед в это время.

В местных ресторанах говорится о сокращении бизнеса в сочетании с сокращением штата, чтобы помочь справиться с резким падением доходов. Хотя перехода на еду на вынос может быть достаточно, чтобы рестораны оставались на плаву, этого недостаточно для работников, которые полагаются на этот бизнес.

Многие работники с почасовой оплатой зависят от своей зарплаты, так что это сбивает с толку, — сказал Джордж Кортен, владелец ресторанов Джорджа Мартина в Роквилл-центре. «Нам нужно некоторое облегчение со стороны федерального правительства или правительства штата, [потому что] у вас есть много людей, которые беспокоятся не только о здоровье, но и в финансовом отношении.Но даже в этом случае г-н Кортен также отметил, что «безопасность наших гостей — наша главная забота, поэтому остановка — очень разумный шаг. Это единственный способ выровнять кривую «.

Тем не менее, бизнес страдает. Томми Масврудис, владелец закусочной Pantry Diner, сказал, что даже при предложении еды на вынос его закусочной придется значительно сократить штат. Хотя он хотел бы сохранить подол до возвращения бизнеса, он считал более ответственным поставить их в положение, при котором они могли бы подавать документы на пособие по безработице.

Это не просто рестораны, так как The Little Gym в Роквилльском центре, который обслуживает детей и принадлежит супружеской паре Алу Мерфи и Мигель Мадера, на время вынужден был закрыть свои двери и изо всех сил пытается получить прибыль. «Это определенно действует на нервы, — сказала мисс Мерфи. «Мы рассчитываем на то, что люди приходят на занятия. Я надеюсь, что правительство нам поможет, потому что, если люди не смогут прийти, это повлияет на наш бизнес. На данный момент мы просто делаем все возможное, чтобы наш бизнес продолжался.”

Sportset, еще один местный тренажерный зал, надеется сохранить своих членов, предлагая виртуальные занятия. Владелец Деннисон Сильвио рассказал о том, как он надеялся, что он не остановится, и вкладывал средства в дополнительный персонал и методы стерилизации, чтобы обеспечить безопасность клиентов. «Я действительно надеялся, — сказал г-н Сильвио, — даже если мы потеряем деньги, мы сможем оставаться открытыми и быть отдушиной для общества. Я планировал работать [с] скелетной командой. Теперь мы вынуждены закрыться, и это сложно, потому что я не знаю, сколько времени это продлится.”

Между тем местная торговая палата, возглавляемая президентом Брайаном Куртье, работает над тем, чтобы обратиться к местным предприятиям в центре города, чтобы помочь продвинуть варианты еды на вынос и доставки. Палата работала с Village Hall, чтобы попытаться получить какое-то облегчение, предложив бесплатную парковку на время закрытия. Он также призывает жителей покупать подарочные карты у местных предприятий. Он отметил, что даже после закрытия магазина людям по-прежнему нужны покупки на такие вещи, как дни рождения, юбилеи и дни рождения, а подарочные карты — это способ помочь местному бизнесу, обеспечивая такие случаи.

Вы можете узнать больше об усилиях Rockville Centre в Long Island Herald.

Гринпорт

Предприятия Гринпорта готовятся к последствиям закрытия из-за коронавируса, поскольку жизнь на главной улице покупок остановилась. Как и в остальной части Лонг-Айленда, в Деревне наблюдается серьезное снижение покровительства, поскольку жители избегают общественных мест и больших скоплений людей.

«В городе очень тихо, — сказал Скотт Раулсом, владелец книжного магазина Burton’s. «У нас не было более двух покупателей одновременно.”

Г-н Раулсом сказал, что он надеется, что изолированные люди воспользуются его книжным магазином для развлечения, отметив, что он может осуществлять доставку, доставку на месте или другие транзакции, которые не происходят лично. Тем временем он просто дезинфицирует все и поддерживает свой магазин в максимальной чистоте для ограниченного числа клиентов, которые все еще входят.

Для других предприятий март превращается из месяца, который обычно зависит от постоянных клиентов, до месяца, в котором почти нет бизнеса.«Мы подошли к марту, уже зная, что это будет месяц спада, и теперь вы кладете это поверх него. Мы играем на слух », — сказала Нэнси Курис из Blue Duck Bakery. Пекарня обычно зависит от постоянных клиентов, но большинство из них — пожилые жители, которые избегают спадов из-за проблем со здоровьем.

Другие предприятия оценили риск и решили на время просто закрыть магазин. «Старый сарай», которым владеют Рена Кейси-Вильгельм и ее муж Джейсон, решили, что в их личных интересах временно закрыть магазин.Двое из них страдали от ослабленной иммунной системы и не хотели рисковать своим здоровьем или здоровьем своих престарелых родителей.

«Экономические последствия, безусловно, в краткосрочной перспективе, будут серьезными, — сказал супервайзер Southold Скотт Рассел. «Трудно предсказать влияние на финансовое здоровье предприятий в долгосрочной перспективе».

Местные предприятия надеются, что ссуды от SBA помогут их получить, не вкладывая слишком много денег в доходы прошлым летом. Владельцы кажутся встревоженными, но оптимистично настроенными по поводу того, что это пройдет и жизнь может вернуться в нормальное русло в ближайшее время.Тем временем они призывают к солидарности жителей и владельцев бизнеса.

«Мы все вместе, и этот вирус поражает каждого из нас во многих отношениях как с точки зрения здоровья, так и с точки зрения нашей местной экономики», — сказала г-жа Кейси-Вильгельм. «Мы уверены, что с другой стороны у нас все получится».

Вы можете прочитать больше в Suffolk Times.

В ночь 2 экономического кризиса, связанного с коронавирусом, компания Vision Long Island переместилась в центр Хиксвилла.Вооружившись дезинфицирующими средствами для рук и дезинфицирующими салфетками, мы были счастливы увидеть несколько ресторанов, предлагающих клиентам еду на вынос.

Вот некоторые из ресторанов, которые посещали или наблюдали открытыми: Punto Rojo Colombian; Кафе «Заправляй свое тело»; Перуанская кухня Jalea; Перец горошком; Новые горячие хлеба; Магазин сладостей Бенгали; Корона куриный гриль; Кандагар Гриль; Гриль с лимонным листом; Бирьяни Хаус; Gyro Stop; Dosa World; Кебаб Хаус; Курица и ребрышки по-техасски; Чупан Гриль; Сакана японская; Бахатар Халал Кабаб; Хабульский чайный дом; Трулло Доро; Mulberry Street; Masala Wok.

Vision также зашел, чтобы увидеть Тони в Food Universe, который ведет оживленный бизнес.

Все рестораны, с которыми мы говорили, до понедельника упали на 20-50% от нормальной работы. Переход к еде только на вынос привел к еще большему падению этих показателей. Больше всего людей беспокоили предстоящие выходные, когда защищено 50% или более их бизнеса. Еда на вынос только в субботу вечером сильно отличается от полноценной столовой.

Центр города Хантингтон также начал ощущать последствия закрытия, поскольку приказ о закрытии ресторанов и театров вступил в силу в прошлый понедельник.Было странно видеть, как обычно шумная темнота и тишина в центре города наступает в 8 часов вечера, когда местные предприятия подчиняются.

Рестораны по-прежнему предлагают обслуживание у обочины и еду на вынос, что разрешено по заказу, но Paramount, а также местный театр AMC были закрыты. Некоторые рестораны полностью закрылись, отключились и закрыли свои предприятия после 8.

Staples, такие как Little Vincent’s и Skorpios, были готовы обслуживать клиентов с заказами на вынос, но владельцы признали, что потеря бизнеса им навредит.Тем временем Besito’s, популярная горячая точка, был закрыт.

Одно из новейших предприятий Хантингтона, кафе Main Street Board Game Café, находится в особом положении благодаря порядку. Кафе закрывается в 8, но розничная часть магазина может оставаться открытой, чтобы продавать настольные игры. Это привело к тому, что ему пришлось уволить рабочих, поскольку у него больше нет для них работы. Также неясно, получит ли розница в конечном итоге аналогичный приказ о досрочном закрытии.

Вы можете узнать больше на сайте Huntington Now.

Вестбери

По мере роста обеспокоенности по поводу коронавируса мэр деревни Уэстбери Питер Кавалларо, Правление и деревенские агентства предпринимают шаги, чтобы заверить жителей, что делается все возможное для укрепления их здоровья и безопасности.

Деревня, как и другие районы Лонг-Айленда, добилась больших успехов благодаря духу двухпартийности и сотрудничества, с гиперлокальной ориентацией и объединением местных групп, чтобы поддержать преобразование центра города.Пандемия коронавируса грозит изменить эту защиту.

Что касается местных предприятий, мэр Кавалларо отмечает, что чем дольше длится пандемия, тем сильнее эти предприятия будут испытывать огромное давление. «Нам необходимо поддерживать малый бизнес, поскольку у него нет длинного страховочного троса». Деревня просит жителей делать покупки в местных магазинах, где они могут. «Без этой поддержки в эти трудные времена, — говорит мэр, — этих предприятий может не быть здесь, когда все закончится».

Мэр отмечает, что когда дело доходит до здоровья и безопасности, у округа и штата есть много ресурсов.И наоборот, у даунтаунов меньше инструментов в их арсенале. Мэр отмечает, что отрадная новость заключается в том, что деревня находится в хорошей форме. «Зонирование на месте, и у нас здоровый центр города».

Местные рестораны находят способы безопасного обслуживания своего сообщества. Владелец ресторана Toskana Pizzeria, Дженнифер Баутаж, отмечает важность постоянных покупок в местных магазинах, особенно сейчас, во время кризиса. «Людям нужно делать покупки в местных магазинах, вкладывать средства в малый бизнес, магазины Mom and Pop в своих сообществах.В противном случае мы все проиграем ».

Вот список местных предприятий, которые еще открыты:

Кафе Gino’s открыто с 10:00 до 20:00 на вынос.
237 Post Ave, Westbury, телефон (516) 997-1912.

Kabul Kabab House открыт с 12:00 до 21:00 на вынос и доставку.
247 Post Avenue, Westbury , Телефон (516) 280-4753.

Мороженое и кофейня Nana’s открыты с 11:00 до 20:00 на вынос и доставку.
225A Post Avenue, Westbury, телефон (516) 338-6888.

Punta Cana Grill открыт с 11:00 до 21:00 на вынос и доставку.
162 Post Ave, Westbury, телефон (516) 280-4099.

Пиццерия Toskana открыт с 10 до 20 часов на вынос и доставку.
63 Post Avenue, Westbury, телефон (516) 414-7585.

Guiradelco, Phillipine Ресторан открыт на вынос.

Дом Авто, 15 Пост

St. Brigid’s Deli, 99 Пост

Розита Мини-продуктовый, 150 Пост

Кондитерская Марии, 167 Пост

Willy’s Fish, 249 Drecel

метро, ​​211 пост

Rite Aid, 210 Пост

Cremosa Market, 230 Post

Hernandez Agency, 254 Maple

Скидка Нового Света, пост 242

Супермаркет Браво, 306 Пост

No Pal Mexican, 263 Post

Dunkin Donuts, 253 Пост

Westbury Floral, 53 Post

Супермаркет, 129 Пост

Почтовая Аптека, 173 Пост

Уотли Вайн, 193 Пост

Mediterranean Kabob House, 190 Post

Jin’s Apple Farm, 215 Post

Пекарня Глории, 219 Пост

Post Bagels, 226 Post

Allstate, 239 Post

CVS 307 Сообщение

Donohue Cecere Funeral, 290 Post

Joe’s Cleaners, 263 Post

Bank of America, 248 Post

Deli Salvadoreno, 243 Post

Westbury Valet Cleaners, 123 Post

Прачечные на постах 278, 184 и 89

Окружной совет по развитию бизнеса Уэстбери будет продолжать продвигать планы восстановления, оказывая значительное влияние на то, чтобы существующие предприятия были открыты для проживания в это непростое время.Многие из предприятий пищевой промышленности предоставляют услуги самовывоза или доставки у обочины, чтобы уважать опасения жителей. Поскольку CDC рекомендует изменения, мы вытесним их из бизнеса. В эти тяжелые времена позвольте всем оставаться в безопасности и молиться о больных, Ванесса Эспозито, исполнительный директор

Vision заехал в Гираделько, чтобы отведать восхитительный шашлык и вкусный кальцоне от Дженнифер, Майка и Билла в Тоскане.

Люди должны посетить эти рестораны, если вы хотите, чтобы они продолжали работать.

и национальность в эпоху империй

110 На холодной тропе тот же лагерь, что и

Освобожденные дворяне 257 родственники a

Хоккеист Сергей Зубов: биография, достижения, тренерская работа

Сергея Александровича Зубова поклонники знают как спортсмена с мировым именем, имеющего в своей копилке несколько весомых наград, наличием которых может похвастаться далеко не каждый хоккеист за свою карьеру. Достаточно интересным фактом его биографии является то, что спортсмен играл в хоккей до сорока лет, при этом все самые значимые события в его жизни произошли до того, как он достиг двадцати четырех лет.

Биографические данные из жизни хоккеиста

Зубов Сергей Александрович родился 22 июля 1970 года в Москве. Первым тренером юного спортсмена был Борис Штанько. Спортивная карьера Зубова началась с игры за ЦСКА. Хоккеист провел в этом клубе четыре года — с 1988 по 1992 год. За это время ему удалось забить семнадцать голов и сделать девятнадцать результативных передач. Всего за Сергея Зубова сыграно сто шестьдесят три партии.

Следующий, 1992 год, начался для хоккеиста настоящим прорывом.Восемнадцатилетний Сергей Зубов, в отличие от своих годовалых, сумел добиться невероятных высот. Повзрослев, он стал чемпионом Советского Союза, выйдя на лед плечом к плечу с известными звездами мирового хоккея. На льду Сергей был в сборной Виктора Тихонова. Олимпиада стала для Зубова первой и последней в его спортивной карьере. Спустя некоторое время в составе сильной команды Сергей Зубов успешно выступил на молодежном первенстве — ребятам досталось золото.

В возрасте двадцати одного года молодой хоккеист Сергей Зубов попал в основную команду.Он сыграл за россиян шесть матчей на чемпионате мира. А четыре года спустя, в 1996 году, он принял участие в четырех матчах чемпионата мира по футболу. После чемпионата мира в составе сборной России футболист больше не выходил на лед.

Спортивная карьера в НХЛ

Первая игра в НХЛ в составе «Нью-Йорк Рейнджерс» состоялась 6 декабря 1992 года. Рекордом для молодого спортсмена стал результат восьмидесяти девяти очков за сезон 1993–1994 годов. Он стал лучшим игроком по игре.

В очередной раз Зубов отличился в 86-м чемпионате НХЛ. В игре «Даллас» — «Анахайм» буквально через несколько минут после ее начала он забросил первую шайбу, чем в дальнейшем заслужил любовь и уважение многих болельщиков.

Из-за серьезной травмы в сезоне 2008-2009 годов Сергею удалось провести всего десять матчей. За год ему удалось сделать около четырех программ. После этого в последний раз он выходил на лед в ноябре 2008 года. Это была игра против знаменитой команды «Сан-Хосе Шаркс».

Спустя год бывший игрок легендарной НХЛ подписал контракт с другой базой. Новым «домом» для него стала Континентальная хоккейная лига СКА. Вместе с лигой СКА Зубов получил несколько «горячих» предложений от клубов НХЛ, которые он успешно отклонил в пользу последнего этапа своей карьеры игрока.

Дома все это время Сергей практически не появлялся, пока не пришел прямо в СКА на несколько лет. Изначально он не хотел уходить в сборную по личным причинам, а после этого ему помешал ряд неблагоприятных обстоятельств.

Перед Евротуром в Ванкувере в 2010 году Зубов посчитал предложение ему запасного игрока естественным плевком в лицо. Хоккеист признался, что очень хотел хотя бы еще раз сыграть за сборную, но, к сожалению, этого не произошло.

Основные достижения

Сергей Зубов — хоккеист, в арсенале которого много достижений и наград. Среди его основных достижений:

• 1988–1989 — хоккеист стал абсолютным чемпионом Советского Союза в сезоне 1988/1989.
• 1989 г. — Зубову присвоено почетное звание Чемпиона мира среди молодежи.
• 1992 г. — российскому хоккеисту присвоено почетное звание олимпийского чемпиона.
• 1994 — обладатель Кубка Стэнли.
• 1999 г. — двукратный обладатель Кубка Стэнли.

Познавательная статистика хоккеиста Сергея Зубова

Сергей Зубов — хоккеист, который за свою карьеру в НХЛ провел более тысячи матчей, а точнее тысяча пятьдесят восемь.За это время спортсмен набрал семьсот семьдесят один балл. Это сто пятьдесят две шайбы и шестьсот девятнадцать передач.

Среди всех известных отечественных хоккейных защитников «Зуб» занимает первое место по набранным очкам и экипировке. По количеству голов спортсменка занимает второе место. Первое место занял Сергей Гончар. Он забил сто девяносто один гол.

Также второе место занимает Зубов по количеству сыгранных матчей.Первое место занял спортсмен Алексей Житников с результатом в тысяча восемьдесят пять проведенных игр.

В истории игр НХЛ по количеству набранных очков в защите звезда российского и мирового хоккея занимает восемнадцатое место. По количеству голов Сергей Зубов находится на тридцать первом месте. На шестнадцатом месте в НХЛ хоккеист держится по количеству безупречной экипировки.

Тренерская работа Сергея Александровича Зубова

Сергей Зубов — тренер СКА.Принятие решения о завершении игры в роли защитника далось ему непросто. Не сумев выйти на лед в новом сезоне из-за серьезной травмы, спортсмен завершил спортивную карьеру и с 2011 года Сергей Зубов является тренером СКА.

Двум сезонам в ЦСКА предшествовал год тренерской работы в Санкт-Петербурге. Впоследствии бывший спортсмен снова вернулся в Питер. Под его чутким руководством команде ЦСКА удалось выиграть Кубок Гагарина. Все это время Сергей Александрович специализировался на работе с защитниками.

С июля 2015 года Сергей Зубов — тренер сборной России. Хороший игровой опыт должен помочь тренеру вновь сформированной национальной сборной подготовить ребят к победе на предстоящих Олимпийских играх 2018 года.

Личная жизнь всемирно известного российского тренера

Какие еще хобби есть у великого тренера, кроме хоккея? Сергей Зубов очень любит свою семью и уделяет ей много времени. У Сергея Александровича есть жена Ирина, а также дети — сын Паша и дочь Настя.Отгул Зубов С.А. предпочитает рыбачить или смотреть матчи любимых баскетбольных команд.